Практическая работа

З а д а н и е №1

Изучить карту первичного иммунного обследования иммунного статуса больного З., 25 лет. Микроскопировать готовые мазки с тестом Е-розеткообразования, найти «розетки», зарисовать, описать микроскопическую картину, зарисовать механизм реакции розеткообразования. Составить калибровочные кривые по Манчини, определить содержание IgM, IgG и IgA в сыворотке обследуемого. Оформить протокол исследования (рисунки, калибровочный график, таблица). Сделать заключение. Ответить на вопросы:

1. Какие тесты позволяют оценить состояние клеточного иммунитета, а какие – гуморального?

2. Каковы возможные причины иммунодефицита?

Показатель	Норма	У обследуемого З.
Лейкоциты, мм3	5500	3700
Нейтрофилы, %	60	55
Лимфоциты, %	35	44
Моноциты, %	5	1
Т-РОК, %	68	?
В-РОК, %	18	?
АФ, %	60	35
ФП	4,2	2,9
IgA, г/л	1,6	?
IgM, г/л	1,4	?
IgG, г/л	15	?

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

1. Оценивают факторы неспецифической резистентности организма.

2. Подсчитывают лейкоцитарную формулу по общепринятой методике.

3. Подсчитывают количество Т- и В-лимфоцитов проводится в реакция Е- и ЕАС-розеткообразования (Е-РОК и КАС-РОК).

а) Е-розетки – комплексы, состоящие из Т-лимфоцитов человека и прилипающих к ним эритроцитов быка. Розеткообразующей считается клетка с тремя и более прилипающими эритроцитами.

б) ЕАС-розетки – комплексы, которые образуют В-лимфоциты с эритроцитами барана (Е), нагруженными антителами (А) и комплексами (С).

Учет результатов проводят подсчитывая количество розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов и выражают в процентах.

4. Определение уровней иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Три порции расплавленного 3%-ного агара смешивают в соотношении 1:1 соответственно с антиглобулиновыми сыворотками против IgM, IgG и IgА. Этими смесями покрывают три стеклянные пластины. В застывшем агаре каждой пластины делают лунки, в которые вносят по 0,2 мкл стандартной сыворотки с известным содержанием иммуноглобулинов трех классов (М, G и А): неразведенной, и в разведениях 1:2, 1:4, 1:6 и 1:8. В другие лунки каждой пластины вносят испытуемые сыворотки, взятые от обследуемых людей, в которых хотят определить содержание IgM, IgG и IgА. После суточного выдерживания во влажной камере при 4°С измеряют диаметры образовавшихся колец преципитации с разведениями стандартной сыворотки на каждой из трех пластин и строят калибровочные кривые, отражающие концентрацию IgM, IgG и IgА в этой сыворотке (d_зоны=f(СIg)). Затем измеряют диаметры колец с исследуемой сывороткой (на трех пластинах) и по калибровочным кривым определяют концентрацию IgM, IgG и IgА в сыворотках обследуемых.

Исходный уровень содержания иммуноглобулинов в стандартной сыворотке:

IgG – 8,41 мг/мл (133 МЕ/мл)

IgM – 1,12 мг/мл (109 МЕ/мл)

IgA – 1,55 мг/мл (104 МЕ/мл)

З а д а н и е №2

Классифицировать набор предложенных иммунобиологических лечебных и лечебно-профилактических препаратов. Результаты представить в виде схемы.

Название (Н):

Классификационное положение (КП):

Действующее начало (ДН):

Получение (П):

Применение (Пр):

Способ применения (СП):

занятие №12

инфекция. иммунитет

Контрольное занятие

Вопросы для подготовки