Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторные частная микробиология.doc
Скачиваний:
3
Добавлен:
14.08.2019
Размер:
701.95 Кб
Скачать

5. Ход работы

Морфологию бактерий изучают на изолированной колонии, выращенной на агаровой пластинке чашки Петри, колонию описывают по следующей схеме:

1. Величина колонии – точечные (D – меньше 1 мм), мелкие (D – 1-2 мм), средние (D – 2-4 мм), и крупные (D – 4-6 мм и более).

2. Форма колонии - округлая, амебовидная, ризоидная.

3. Оптические свойства – прозрачная, матовая, флуоресцирующая, полупрозрачная (просвечивает), непрозрачная, блестящая.

4. Цвет – отмечают цвет колонии и выделение пигмента в среду.

5. Поверхность – гладкая, шероховатая, складчатая, бугристая.

6. Профиль – плоский, выпуклый, кратерообразный, врастающий в агар и т. д.

7. Край колонии – ровный, волнистый, лопастной, ризоидный и т. д.

8. Консистенция – маслянистая, тестообразная, вязкая, пленчатая.

При описании края и структуры колонии чашки Петри, не открывая, помещают под микроскоп дном вверх.

Для описания физиологических и биохимических признаков определяемый микроорганизм из агаровой культуры (морфологически обособленная колония), соблюдая стерильность, засевают последовательно в шесть пробирок с диагностическими питательными средами: 1-МПБ, 2-МПА-прямой, 3-МПА-косой, 4-МПЖ, 5-молоко, 6-косяки картофеля. В пробирки 2 и 4 микроорганизм пересевают уколом, в остальные - микробиологической петлей. Посевы помещают в термостат при температуре 25-28 оС, исключая пробирку с МПЖ, которую оставляют при комнатной температуре (не выше 25 оС).

Через 5-7 дней культивирования из пробирки №3 (МПА) готовят параллельно два препарата: один — прижизненный (раздавленная или висячая капля), второй — постоянный (мазок), окрашенный по Граму. Прижизненный препарат микроскопируют, пользуясь объективом ВИ-40; мазок рассматривают с объективом МИ-90. Просматривая препараты, делают зарисовки микроорганизмов, обращая внимание на форму, взаимное положение клеток и на соотношение размеров бактерий при разном увеличении микроскопа; определяют отношение к окраске по Граму.

Для изучения характера движения бактерий прижизненный препарат желательно микроскопировать в темном поле микроскопа.

Для определения рода и вида изучаемых микроорганизмов, часто пользуются определителем или таблицей. При этом выбор информационного материала основывается на объекте или среде, из которого выделены микроорганизмы. В данном опыте мы изучаем воздушную микрофлору. Ниже в качестве примера приводится таблица для определения некоторых форм бактерий, наиболее часто выделяемых из воздуха (сокращенно по Ленису).

Таблица для определения некоторых форм бактерий

(сокращенно по Ленису)

А. Определение родов

1.

Кокки

2

— Палочки

3

2.

В жидкой среде рост одиночными клетками, двойчатками или неправильными скоплениями. Микрококк (Micrococcus)

— В жидкой среде рост пакетами, напоминающими тюки товаров Сарцина (Sarcina)

— В жидкой среде рост длинными цепочками. Стрептококк (Streptococcus)

3.

Бесспоровые формы. Бактерии (Bacterium)

— Споровые формы. Бациллы (Bacillus)

Б. Род Микрококк (Micrococcus)

1.

На агаре и желатине белый, серый, желтый или оранжевый рост

2

— На агаре и желатине рост розовый до ярко-красного

11

— На агаре и желатине рост синий. М. cyaneus Cohn.

2.

Желатина разжижается

3

— Желатина не разжижается

6

3.

Молоко свертывается

4

— Молоко не свертывается

5

4.

Рост белый. М. acidi lactis Kruger.

— Рост желтый. М. citreus Passet.

— Рост оранжевый. М. aureus (Bosenb.) Migula.

5.

Рост белый. М. butyri Keith.

— Рост желтый. М. chromoflavus Huss.

— Рост серо-оранжевый. М. cremoides Zimmerm.

— Рост буро-желтый. М. badius L. и N.

6.

Молоко свертывается

7

— Молоко не свертывается

8

7.

Рост белый. М. lactis acidi Leichm.

Рост желтый. М. lactis acidi Marpm.

— Рост оранжевый. М. umbilicatus Weiss.

8.

Рост белый

9

— Рост иного цвета

10

9.

Подвижные формы. М. agilis albus Catterina.

— Неподвижные формы. М. candicans Flugge.

10.

Рост желтый. М. sulfureus Zimmerman.

— Рост оранжевый. М. aurantiacus Cohn.

— Рост буро-желтый. М. versicolor Lbs.

— Рост прозрачный. М. concentricus Zimmerman.

11.

Подвижные формы. М. agilis All Cohen.

— Неподвижные формы М. roseus L. и N.

В. Род Сарцина (Sarcina)

1.

На агаре и желатине белый, серый, желтый или оранжевый рост

2

— На агаре и желатине розовый или красный рост.

Sarcina rosea Schroter

2.

Рост белый или серый. Sarcina alba Zimmerm.

— Рост желтый. Sarcina lutea Flugge.

— Рост оранжевый. Sarcina aurantiaca Flugge.

— Рост буро-желтый. Sarcina fulva Stubenrath.

Г. Род Стрептококк (Streptococcus)

1.

Желатина разжижается. Sir. gracilis L. и N.

2.

— Желатина не разжижается Молоко свертывается.

Str. pyogenes Bosenbach.

2

— Молоко не свертывается. Str. Kefir Migula.

Д. Род Бактерии (Bacterium)

1.

Рост белый до серого, субстрат не окрашивается

2

— Рост белый до серого, субстрат окрашивается в зеленый, синий или темно-бурый цвет

7

— Рост желтый до оранжевого

9

— Рост розовый, красный до буро-красного

12

— Рост синий до фиолетового

13

2.

Колонии с ровным, зазубренным или лопастным краем

3

— Колонии с неправильными выростами или лучами.

В. vulgare L. и N.

3.

Неподвижные формы

4

— Подвижные формы

6

4.

Молоко свертывается

5

— Молоко не свертывается. В. lactis innocuum Lbs.

5.

Газообразование на молоке. В. acidl lactici Нпрре

— Газообразования на молоке нет. В. limbatum Marpmann

6.

Молоко свертывается, газообразования нет. В. colt Esch.

— Молоко не свертывается, газообразования нет.

В. Stutzeri L. и N.

7.

Желатина разжижается, субстрат зеленый. В. fluorescens Flugge

— Желатина не разжижается

8

8.

Субстрат окрашивается в зеленый, реже бурый цвет.

В. putidum Fl.

— Субстрат окрашивается в синий до черного цвета.

В. syncyaneum Fl.

9.

Рост ярко-желто-зеленый; очень маленькие палочки, подвижные, медленно разжижающие желатину. В. turcosutn Zimm.

— Рост лимонно- и золотисто-желтый. Палочки неподвижны, желатина не разжижается. В. luteum Fl.

— Рост желтовато-белый до оранжево-бурого

10

— Рост лимонно-желтый с красным прокрашиванием субстрата. В. erythrogenes L и N.

— Рост оранжевый до кирпично-красного

11

10.

Желатина не разжижается, неподвижные палочки. В. crenoides

— Желатина разжижается, подвижные формы.

В. ochraceum pimm.

11.

Неподвижные формы. В. fulvum Zimmerm.

— Подвижные формы. В. chrysogloea Zopp.

12.

Желатина не разжижается, неподвижные формы.

В. latericium L. и N.

— Желатина разжижается, подвижные формы.

В. prodigiosum L. и N.

13.

Рост фиолетовый. В. violaceum Schroter

— Рост синий. В. coeruleum L. и N.

Е. Бациллы (Bacillus)

1.

Аэробные формы

2

— Строго анаэробные формы

8

2.

Укол в желатине с боковыми ответвлениями

3

— Укол в желатине без ответвлений

4

3.

Ответвления тонкие, длинные, похожие на корневые мочки. Слабо­подвижный бацилл. Вас. mycoides Fl.

— Ответвления очень короткие. Неподвижный бацилл. Вас. ellenbachensis Caron

4.

Рост на картофеле в виде тонкой, просвечивающей пленки. Вас. tumescens Zopp.

— Рост на картофеле в виде белого выпуклого налета. Вас. охаlaticus Zopp.

— Рост на картофеле сероватый, плоский, мучнистый. Вас. subtilis Cohn

— Рост на картофеле желтовато-бурый

5

— Рост на картофеле с морщинистыми складками

7

5.

Медленно двигающиеся формы. Вас. megaterium De Bary

7

— Быстро двигающиеся формы

6

6.

На агаре и желатине серый прозрачный рост; очень крупные споры с ребрышками. Вас. asterosporus A. M.

— Желтый рост; маленькие палочки с цилиндрическими спорами. Вас. parvus A. M.

7.

Рост беловато-серый. Вас. mesentericus vulgatus Fl.

— Рост желтоватый. Вас. mesentericus fuscus Fl.

— Рост розовый до розовато-бурого. Вас. mesentericus ruber Fl.

— Рост серо-синий до черно-бурого. Вас. mesentericus niger Lunt

8.

Образования масляной кислоты нет; энергичное разложение белков; спорообразование плектридиальное. Вас. putrificus Bienstov

— Масляная кислота образуется, белки не разлагаются, спорообра­зование клостридиальное

9

9.

Подвижные формы. Вас. amylobacter mobilis A. M.

— Неподвижные формы. Вас. anylobacter immobilis A. M.