23. Радиоиммунный метод. Иммуноэлектронная микроскопия. Генетические методы диагностики. Метод молекулярной гибридизации (пцр и др.).

Радиоиммунный метод то-же самое, что ИФА только антиглобулиновая. сыворотка метится не ферментами, а радиоизотопом и результат реакции определяется радиосчетчиком типа счетчика Гейгера.

Иммуная электронная микроскопия то-же что и РИФ только с использованием электронного микроскопа. Методы молекулярной гибридизации экспертные методы диагностики вирусных инфекций.

ДНК-зонд – используется короткая специфическая последовательность нуклеотидов в качестве зонда. Его получают путём выделения и рестрикции (разрезание) ДНК-вируса.

Молекулярный зонд (1) опускают в исследуемый материал (выделенная из Т-хелперов двунидчатая ДНК. Подвергается рестрикции (2)). Результат: если в исследуемом материале есть комплементарный участок (3), зонд достроится (4), а если нет, то не достроится (5).

ПЦР – принцип предыдущего метода. В качестве праймера используется укороченный участок ДНК-вируса, к нему добавляют полимеразы. При наличии в исследуемом материале комплементарных участков праймер достраивается. Далее как в ДНК-зонде. При повторении нескольких циклов количество специфических нуклеиновых кислот увеличивается в миллион раз. Очень специфический метод, позволяющий определить в исследуемом материале даже одну молекулу.

24. Гиперчувствительность немедленного типа (в-зависимая). Анафилаксия. Сывороточная болезнь. Атопии. Механизмы их возникновения, методы предупреждения.

ГЧНТ - гуморальная В — зависнмая реакция иммуной системы в ответ на действие атопических {не инфекционных) антигенов. Обусловлена накоплением Ig-E {реагинов) и их фиксации на мембранах тучных клеток. При повторном попадании антигенов образуются иммунные комплексы, которые нарушают проницаемость мембран, в результате биологические активные вещества (БАВ - гистамин, простогландины, брадикинин и т.д.) выходят из клеток. Проявления обусловлены точками приложения БАВ: бронхи - бронхиальная астма, эндотелий сосудов - анафилактический шок, отек Квинке, кожный эпителий – дерматиты.

Сывороточная болезнь. В отличии от анафилактических реакций (до 15 минут) возникает спустя 5-7 дней от введения антигена – сыворотки, содержащей чужеродные белки. С 5-7 дня на белки сыворотки образуются антитела, которые при слиянии с антигенами образуют иммунные комплексы, которые осаждаются на клетках, вызывая цитопатическое действие, которое приводит к поражению внутренних органов (особенно почек). Профилактика сывороточной болезни и анафилаксии заключается в том, что сыворотки нужно вводить дробно, малыми дозами, через определённый промежуток времени и они должны быть хорошо очищены.

Атопии (поллиноз, дерматит, бронхиальная астма и. т. д.) – повышенная чувствительность к чужеродным веществам – аллергенам. Методы предупреждения: десенсибилизация специфическая – введение внутрикожно малых доз аллергена. Способствует истощению Ig-E, эффективность 1,5 года. Неспецифическая десенсибилизация – применение антигистаминных препаратов (димедрол, супрастин и. т.д.). Механизм действия: 1. стабилизация мембран тучных клеток. 2. блокирование гистаминовых рецепторов. 3. инактивация гистамина.

25. Гиперчувствительность замедленного типа (Т-зависимая), механизм её проявления. Роль в патогенезе инфекционных болезней, иммунитете. Практическое использование аллергических проб (примеры).

ГЧЗТ – Т-зависимая реакция иммунной системы обусловленная в ответ на действие инфекционных аллергенов образованием Т-ГЧЗТ лимфоцитов. Образование макрофагального, лимфоцитарного инфильтрата с целью отграничения места введения антигена.

Механизм: к месту попадания аллергена мигрируют макрофаги под действием лимфокинов, вырабатываемых Т-ГЧЗТ, которые несут на своей поверхности рецепторы к аллергенам. Образуется клеточный инфильтрат, специфическое воспаление (бруцеллёз, туберкулёз и т.д.). Роль в патогенезе – защита через альтерацию (брюшной тиф – отторжение пейеровых бляшек). Роль в иммунитете – формирование нестерильного иммунитета (туберкулёз, сифилис). Практическое использование – в аллергическом методе диагностики путём постановки аллергических проб. Позволяет подтвердить диагноз, прогнозировать течение заболевания и подобрать группу лиц для вакцинации.