- •Билеты по микробиологии
- •1. Возникновение микробиологии. Работы Пастера и Коха
- •2. Предмет и основные этапы развития микробиологии
- •3. Основные этапы развития медицинской микробиологии
- •1908Г.- Нобелевская премия
- •1908 Г. – и.И. Мечников и Эрлих п.
- •4. Характеристика основных таксономических категорий
- •5. Три домена живой природы. Теория существования прокариот
- •6. Главный современный критерий систематизации прокариот
- •3 Раздела мб по объектам –эукариоты, прокариоты, вирусы
- •7. Значение бактерий в эволюции жизни на земле
- •8. Распространение и функциональная роль бактерий
- •9. Главные отличия прокариот от эукариот
- •10. Три источника энергии у бактерий
- •11. Типы дыхания бактерий
- •12. Этапы биосинтеза белка
- •13. Ферменты микроорганизмов
- •14. Особенности строения прокариотической клетки
- •15. Морфология бактерий
- •16. Цитоплазма бактериальной клетки
- •17. Строение и функции цитоплазматической мембраны
- •18. Периплазматическое пространство бактерий
- •19. Строение муреина (пептидогликана, пг) кс бактерий
- •20. Действие лизоцима и литических ферментов на пг
- •21. Действие пенициллина и в-лактамных антибиотиков на пг
- •23. Пептидная часть кс. Особенности строения и синтеза
- •25. Особенности строения кс Гр(-) бактерий
- •26. Строение и функции липополисахарида внешней мембраны бактерий
- •27. Особенности строения кс микобактерий
- •28. Микроорганизмы, лишенные кс
- •29. Капсула бактерий
- •30. Строение и свойства эндоспор бактерий
- •31. Образование, функции, прорастание эндоспор
- •32. Бактериальные фимбрии (пили, ворсинки), классификация фимбрий
- •33. Типы жгутикования, строение и работа жгутиков бактерий
- •34. Включения в цитоплазме бактерий
- •35. Особенности размножения бактерий
- •36. Покоящиеся формы бактерий
- •37. Методы микроскопии м/о
- •38. Основные методы окраски м/о, применяемые в медицинской микробиологии
- •39. Исследование м/о в окрашенном и неокрашенном состоянии
- •40. Понятие об идентификации бактерий
- •41. Способы культивирования
- •42. Классификация и назначение питательных сред
- •4. Консервирующие (траспортные)-
- •43. Культивирование м/о в лабораторных условиях
- •44. Особенности культивирования облигатных анаэробов
- •45. Рост и размножение бактерий. Факторы роста
- •46. Метод получения чистых культур м/о
- •48. Особенности строения бактериальной колонии
- •49. Особенности строение и функции бактериальной биопленки
- •50. Гетерогенность микробных популяций. Морфологические типы клеток микробных популяций
- •51. Биовар, серовар
- •52. Классификация м/о по отношению к температуре
- •53. Особенности строения бактериального генома
- •1. Плазмиды
- •54. Организация генетического материала у бактерий
- •55. Понятие о плазмидах. Характеристика основных типов плазмид
- •56. Генетическая трансформация бактерий
- •3 Способа передачи генетической информации
- •57. Коньюгация бактерий
- •58. Характеристика процесса трансдукции
- •59. Характеристика процесса трансформации
- •63. Движение бактерий – 2-й фактор патогенности
- •64. Понятие дисбиоценоза, пути коррекции
- •65. Особенности колонизации м/о различных органов человека
- •66. Особенности постоянной и транзиторной микрофлоры человека
- •67. Основные закономерности строения нормальной микрофлоры
- •68. Микрофлора тела здорового человека
- •69. Функции микробиоты кишечника
- •70. Роль микрофлоры толстого кишечника
- •71. Микрофлора ротовой полости
- •72. Микрофлора кожи
- •73. Понятие сукцессии, причины
- •74. Гетерогенность микробных популяций. Морфологические типы клеток микробных популяций
- •75. Иммуноферментный анализ
- •76. Реакции агглютинации, разновидности и применение
- •77. Реакции преципитации, разновидности и применение
- •78. Реакции связывания комплемента
- •79. Реакции иммунофлюоресценции
- •80. Этапы цикла амплификации при проведении пцр
- •81. Основные компоненты пцр, достоинства и недостатки метода
- •82. Открытие вирусов, основы классификации
- •1 Классификация. Тип строения вириона и механизм взаимодействия с клеткой-хозяином
- •2 Классификация. Характеристика природы хозяина
- •83. Строение вирусной частицы
- •84. Особенности генома вирусов
- •87. Строение бактериофагов
- •88. Типы вирусных инфекций бактерий, понятие лизогении
- •89. Значение бактериофагов и их применение в медицине
79. Реакции иммунофлюоресценции
Различают три разновидности метода прямой, непрямой, с комплементом. Реакция Кунса является методом экспресс-диагностики для выявления антигенов микробов или определения антител.
Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета.
Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.
Прямая - флюорисцирующие АТ+исследуемый АГ
Непрямой – универсальная флюорисцирующая сыворотка + специфические АТ+исследуемый АГ
80. Этапы цикла амплификации при проведении пцр
(ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) в биологическом материале (пробе).
Этапы:
Обычно при проведении ПЦР выполняется 20—35 циклов, каждый из которых состоит из трёх стадий
Денатурация
Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96 °C (или до 98 °C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5—2 мин, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется плавлением (денатурацией), так как разрушаются водородные связи между двумя цепями ДНК. Обычно, перед первым циклом проводят длительный прогрев реакционной смеси в течение 2—5 мин для полной денатурации матрицы и праймеров.
Отжиг
Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от состава праймеров и обычно выбирается равной температуре плавления праймеров. Неправильный выбор температуры отжига приводит либо к плохому связыванию праймеров с матрицей (при завышенной температуре), либо к связыванию в неверном месте и появлению неспецифических продуктов (при заниженной температуре). Время стадии отжига — 30 сек, одновременно, за это время полимераза уже успевает синтезировать несколько сотен нуклеотидов. Поэтому рекомендуется подбирать праймеры с температурой плавления выше 60 °C и проводить отжиг и элонгацию одновременно, при 60-72 °C.
Элонгация
ДНК-полимераза реплицируетматричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадияэлонгации. Полимераза начинает синтез второй цепи от 3'-конца праймера, который связался с матрицей, и движется вдоль матрицы, синтезируя новую цепь в направлении от 5' к 3' концу. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы Taq и Pfu наиболее активны при 72 °C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 7—10 мин.