Раздел II Типовые патологические процессы.

Тема Воспаление II. Фагоцитоз

Цель занятия:

1. Создать модель фагоцитоза инородных тел макрофагами в перитонеальном экссудате крысы.

2. Наблюдать стадии фагоцитоза инородных клеток макрофагами в перитонеальном экссудате крысы.

Опыт 1.Фагоцитоз птичьих эритроцитов в асептическом экссудате брюшной полости белой крысы (опыт Мечникова), изучение фагоцитоза в окрашенном препарате.

Метод:

Крысе внутрибрюшинно 5 мл взвеси птичьих эритроцитов (Двукратно с интервалом в 15 - 20 мин. Через 45 мин после первого введения эритроцитов взятие экссуда, делается мазок, окрашивается краской Май-Грюнвальд

Результат:

Стадия приближения – эритроциты лежат вблизи макрофага, без контакта с мембраной последнего- не видна, т.к. динамический процесс

Стадия прилипания макрофага к эритроциту — найти макрофага, прилипшего к гусиным эритроцитам.

Стадия погружения — найти макрофаг, поглощающий гусиный эритроцит неизмененной структуры.

Стадия переваривания — найти макрофаг, поглотивший гусиные эритроциты, но еще не переваривший их — эритроциты, в основном, сохраняют свою структуру, однако могут набухать и иметь нечёткие границы. При полном переваривании удаётся найти макрофаг с об­ломками гусиных эритроцитов.

Зарисовать все стадии фагоцитоза.

Оценка бактерицидной активности фагоцитов проводится путем инкубации фагоцитов пациента в собственной или донорской нормальной сыворотке, содержащей опсонины, с суспензией живых бактерий (стафилококки, кишечные палочки) или убитых дрожжей. У здоровых людей за 2ч фагоциты поглощают и разрушают примерно 95% бактерий. Если в лейкоцитах после инкубации с сывороткой здорового донора обнаруживаются живые бактерии, это свидетельствует о нарушении переваривания, в отсутствие снижения способности к захвату.

Фагоцитоз — способность клеток захватывать и поглощатьпутем рецепторного эндоцитоза при участии микрофиламентов объекты размером более 1 мкм.

Стадия приближения – главный мех-м - положительный хемотаксис

Стадия прилипания - обеспечивается связыванием опсонинов с опсониновыми рецепторами фагоцита.

Стадия погружения - за счет работы цитоскелета фагоцита, путем образования ложноножек или по механизму «застёжки-молнии».

Стадия переваривания - действие кислород-зависимого свободнорадикального механизма альтерации объекта и дополнительный бескислородный литический эффект лизосомальных гидролаз.

1. Стадия приближения

Механизм миграции:

После маргинации лейкоциты образуют тонкие протоплазматические отростки — псевдоподии, с помощью которых они проникают через межэндотелиальные щели, а затем через базальную мембрану — за пределы кровеносного сосуда. Возможно существует и трансцеллюлярный путь эмиграции лимфоцитов, т.е. через цитоплазму эндотелиальных клеток.

Эмигрировавшие лейкоциты в очаге В. продолжают активное движение (миграцию), причем преимущественно в направлении к химическим раздражителям - хемоатрактантам.

Ими могут быть продукты протеолиза тканей или жизнедеятельности микроорганизмов.

4 хим группы:

1. белковые

2. липидные

3. полисахаридные

4. биогенные амины

См. ниже

Хемотаксис
стимуляторы	Ингибиторы
Лизос ферменты	Трипсин
Комплемент	Хемотрипсин
Активатор плазминогена	АцХолинэстераза
Продукты гидролиза ФГена	Ингибиторы ПМЯ
ЭХФ эозинофил хемоатрактический Факутор тучн Кл	Стрептолизин О
Лимфокины: ИЛ8	Алкоголь
Хемотаксич фактор макрофагов	Кофеин
М/о: эндотоксины, ЛПС микробн стенки	ГКортикоиды