- •Розділ і загальна мікробіологія тема і. Мікробіологічна (бактеріологічна) лабораторія
- •Правила роботи й техніка безпеки в бактеріологічних лабораторіях і на студентських мікробіологічних практикумах
- •Мікроскопія
- •Тема 2. Морфологія бактерій
- •Морфологія мікоплазм
- •Морфологія рикетсій та хламідій
- •Тема 3. Дослідження забарвлених мікроорганізмів Лабораторне заняття 1. Дослідження забарвлених мікроорганізмів.
- •1. Нанесення досліджуваного матеріалу на предметне скло.
- •Тема 4. Дослідження бактерій у непофарбованому вигляді
- •Тема 5. Морфологія грибів та актиноміцетів
- •Тема 6. Методи стерилізації
- •Залежність температури від тиску
- •Тема 7. Культивування мікроорганізмів
- •Tema 8. Визначення виду мікроорганізмів
- •Тема 9. Вплив біологічних факторів на бактерії
- •Тема 10. Бактеріологічне дослідження матеріалів у лабораторії
- •Тема 11. Серологічні методи дослідження у ветеринарній мікробіології
Залежність температури від тиску
Тиск пари |
температура |
0,505 х Ю5Па(0,5атм) |
110-112 °С |
1,01 х Ю5 Па(1,0атм) |
120-121 °С |
1,515 х ios Па(1,5атм) |
124-126 °С |
2,02 х Ю5Па(2,0атм) |
133-133 °С |
В автоклаві стерилізують скляний посуд, інструменти, халати, рушники, живильні середовища тощо. Перед стерилізацією пробірки, колби закривають ватно-марлевими пробками, при потребі обгортають (по кілька штук) папером або поміщають у паперові пакети. Живильне середовище (у пробірках, флаконах, колбах) наливають з таким розрахунком, щоб під час кипіння пробки не змочувались.
Режим стерилізації залежить від виду матеріалів, які стерилізують. Так, більшість живильних середовищ стерилізують при температурі 110-112 °С протягом 20-30 хв., скляний посуд - при 124-126 °С протягом 40-60 хвилин. Вітчизняна промисловість випускає електричні автоклави двох типів: вертикальні та горизонтальні (рис. 23). В умовах мікробіологічної лабораторії зручніші горизонтальні.
Автоклав горизонтальний (АГ-]). Основними частинами автоклава є стерилізаційна та парова камери, кришка з центральним запором, ємність з електронагрівними елементами, електрощит та постамент.
Стерилізаційна камера розміщена всередині парової, у днищі має отвір для надходження пари. Парова камера обладнана спускним краном для випуску повітря на початку розігрівання автоклава та випуску пари після закінчення стерилізації, манометром з триходовим краном, сифонною трубкою. Пара надходить у парову камеру з казанка по патрубку. При роботі автоклава конденсат, утворюваний під час стерилізації, зливається через той же патрубок у ємність.
На патрубку є вентиль, за допомогою якого після закінчення стерилізації припиняють надходження пари з ємності у парову камеру.
Ємність має колонку з поділкою для визначення рівня води і лійкою для наливання води, манометр з триходовим краном і сифонною трубкою, запобіжний клапан. У кришку казанка вмонтовано елсктро-нагрівні елементи. Парова камера і казанок мають металеві кожухи, які зменшують втрати тепла та запобігають опікам при роботі з ними.
На циферблатах манометрів відмітка 2 атм (2,02 * 105 Па) відповідає максимальному тиску, що допускається в автоклаві. Запобіжний клапан відрегульовано на тиск пари 2 атм (2,02 х 105 Па).
Експлуатація автоклава. Автоклав установлюють з урахуванням діючих правил техніки безпеки. Встановлений і випробуваний автоклав експлуатують у такому порядку:
відкривають випускний кран і вентиль;
ємність наповнюють водою до верхньої відмітки на кожусі водомірного скла. Для цього відкривають верхній кран водовказівної колонки. Воду наливають через лійку. Після наповнення нею ємності кран закривають;
відкривають кришку автоклава, для чого повертають штурвал проти годинникової стрілки;
заповнюють стерилізаційну камеру матеріалом;
закривають кришку автоклава і поворотом штурвала за годинниковою стрілкою міцно її затискають;
повертають ручку вмикача у положення "Ввімкнено" (при цьому загоряється сигнальна лампа) і ручку перемикача у положення "Нагрівання";
після того, як пара витисне повітря та конденсат з парової камери, закривають випускний кран. Ознакою повного витиснення повітря з камери є те, що пара виходить рівномірно, струменем;
коли у паровій камері тиск досягне заданого рівня, ручку перемикача повертають у положення "Стерилізація" й відмічають час початку стерилізації;
після закінчення стерилізації ручку перемикача ставлять у положення "0" (горизонтально), закривають вентиль і випускають пару з парової камери через шланг спускного крана;
коли тиск у паровій камері по манометру знизиться до поділки "0" і з шланга перестане виходити пара, автоклав відкривають і вміст його виймають.
Забороняється:
доливати воду в казанок при стерилізації і нагріванні, тобто при наявності тиску в камері;
залишати автоклав у робочому стані без нагляду;
вмикати автоклав при відсутності чи недостатній кількості води в казанку;
користуватись автоклавом після того, коли вийшов останній строк чергового огляду інспекцією технагляду.