microbiol_MR_sbornik
.pdf
(МПА) за секторним методом (метод Голда ) з метою отримання ізольованих колоній.
притискаючи її V і IV пальцями правої руки до долоні, і обпалюють край пробірки. Обережно вводять петлю в пробірку, охолоджуючи її об внутрішню поверхню, після чого беруть матеріал. Потім виймають петлю із пробірки, знову обпалюють її край та пробку і закривають пробкою. Після цього розподіляють матеріал по чашці Петрі, як вказано на малюнку. Після посіву петлю прокалюють (стерелізують) в полум’ї.
4.3. Навчальні задачі, тести, завдання, що доповнюють самостійну
роботу на практичному занятті, а також довідкові матеріали. До завдання № 1. Складіть перелік апаратури, яку ви побачили у бактеріологічній лабораторії кафедри мікробіології, вірусології та імунології.
До завдання № 2. Складіть перелік простих та спеціальних правильних середовищ.
До завдання № 3. Назвіть мікроорганізми з урахуванням морфологічних та тинкторіальних властивостей.
До завдання № 4. Дайте відповідь на запитання: чому метод Голда закономірно забезпечує отримання ізольованих колоній.
5.Матеріали післяаудиторної самостійної роботи. Доповіді на теми:
190.Внесок Л. Пастера та його школи у розвиток мікробіології. 191.Внесок Р.Коха та його школи у розвиток мікробіології. 192.Роль російських та українських вчених у розвитку мікробіології.
Внесок Д. Самойловича. 193.Внесок М. Тереховського. 194.Внесок Д.І. Івановського. 195.Внесок Г.Н. Габричевського. 196.Внесок Д.Л. Романовського. 197.Внесок Ф.Я. Чистовича. 198.Внесок Л.С. Цепковського. 199.Внесок Г.М. Мінха. 200.Внесок О.О. Мочутковського. 201.Внесок Ф.О. Лина. 202.Внесок І.Ї. Мечникова. 203.Внесок М.Ф. Гамалії. 204.Внесок Д.К. Заболотного.
205.Внесок В.К. Високовича. 206.Внесок В.В. Підвисоцького. 207.Внесок З.В. Єрмольєвої. 208.Внесок П.Ф. Здродовського. 209.Внесок В.М. Жданова. 210.Внесок А.О. Смородинцева. 211.Внесок М.П. Чумакова. 212.Внесок Л.О. Зільбера. 213.Внесок С.М. Мінервіна. 214.Внесок С.С. Дяченка. 215.Внесок В.С. Деркача. 216.Внесок С.Г. Мосінга
Методичну розробку склала викладач Литвин А.А.
Українська медична стоматологічна академія
Кафедра мікробіології, вірусології та імунології
Затверджено |
Навчальний |
предмет |
|
на засіданні кафедри |
мікробіологія, |
“____” __________ 200__ р. |
вірусологія та |
протокол № ____ |
імунологія___ |
Зав. кафедри _____________ |
|
МЕТОДИЧНА РОЗРОБКА ДЛЯ САМОСТІЙНОЇ РОБОТИ СТУДЕНТІВ
МЕДИЧНОГО ФАКУЛЬТЕТУ
Тема: Виділення чистих культур аеробних бактерій (2-й етап дослідження). Культуральні властивості бактерій.
Тема: Виділення чистих культур аеробних бактерій (2-й етап дослідження). Культуральні властивості бактерій.
Кількість навчальних годин: __2__
1.Актуальність теми:
Виділення чистої культури аеробних бактерій складається з 4-ох послідовних етапів.
На першому етапі мікроскопують досліджуваний матеріал і проводять посів цього матеріалу на живиньні середовища, в той час як на другому приступають до вивчення культурних, морфологічних, тинкторіальних влоастивостей з наступним пересівом колоний на щільні живильні середовища з метою накопичення чистої культури. Макропічне вивчення
колоній дає змогу отримати інформацію щодо величини колонії, форми, ступеня прозорості, характеру поверхні, розміщення по відношенню до живильного середовища; а мікроскопічне надає дані щодо характеру країв і структури. Всі отримані ознаки є складовими характеристики бактерій, що має значення у проведенні діагностики інфекційних захворювань. Бактерії характеризуються високим темпом розмноження. Швидкість розмноження залежить від видової належності бактерій і умов вирощування ( характе середовища, pH, t0 , аерація). На різних живильних середовищах ріст мікроорганізмів проявляеться або в рівномірному помутнінні середовища, або у вигладі осаду або в утворенні плувки. На поверхні твердих живильних середовищ бактерії утворюють колонії. Зовнішній вигляд колоній у деяких бактерій настільки характерний, що може скупчене однією з диференційних ознак. Для лікарів дуже важливо вміти правильно проводити посіви бактерій на живильні середовища, оцінювати культуральні властивості, мікроорганізмів, аналізувати отримані данні для визначення належності мікроорганізму до певного виду, наступної постановки діагнозу, призначення епіотропного ліування.
2.Навчальні цілі:
Знати, засвоїти:
1.Ріст та розмноження мікроорганізмів. Вегетативні форми та форми спокою мікробів.
2.Фази розмноження мікробів у рідкому живильному середовищі
встаціонарних умовах.
3.Колонії, особливості їх формування у різних видів бактерій. Пігментоутворення.
4.Виділення чистих культур аеробних бактерій (2-й етап
дослідження). (α=ІІ).
Вміти, опанувати навичками, вміннями:
1.Додержання правил протиепідемічного режиму і техніки безпеки в бактеріологічній лабораторії.
2.Посів патологічного матеріалу петлею на щільні живильні середовища.
3.Знезаражування інфікованого матеріалу, антисептична обробка рук, контамінованих досліджуваним матеріалом або культурою мікробів.
4.Виготовлення препаратів для мікроскопічного дослідження.
5.Забарвлення препаратів складним методом (за Грамом).
6.Мікроскопія препаратів в світловому мікроскопі з імерсійним об’єктивом.
7.Диференціація мікроорганізмів за морфологічними і тинкторіальними ознаками. (α=ІІІ).
12.Матеріали доаудиторної самостійної роботи.
12.1. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми
Дисципліна |
Знати |
Вміти |
Медична біологія, генетика, |
Рівні організації життя. Клітина - |
Працювати із світловим |
паразитологія |
елементарна генетична і |
мікроскопом. Забарвлювати |
|
структурно-функціональна |
препарати. |
|
біологічна одиниця. Прокаріотичні і |
|
|
еукаріотичні клітини. |
|
Гістологія, цитологія та ембріологія |
Поняття про клітину, як |
Працювати із світловим |
|
елементарну живу систему. Методи |
мікроскопом. Забарвлювати |
|
мікроскопічних досліджень. |
препарати. |
|
Загальний план будови |
|
|
еукаріотичної клітини. Форма і |
|
|
розміри клітин. Клітинна мембрана. |
|
|
|
|
Біофізики, інформатика і медична |
Фізичні принципи оптичної |
|
апаратура |
мікроскопії |
|
Медична біологія, генетика, |
Клітина як відкрита система. |
|
паразитологія |
Організація потоку речовин, енергії |
|
|
та інформації в клітині. Клітинний |
|
|
цикл. Будова хромосоми. Ендота |
|
|
екзоцитоз. Рецепторні функції |
|
|
плазмолем. Репродукція клітин. |
|
|
Розмноження – універсальна |
|
|
властивість живого. Статеве і |
|
|
безстатеве розмноження. |
|
Біоорганічна, фізична та колоїдна |
Поняття про осмос, осмотичний |
Працювати із світловим |
хімія |
тиск та осмотичний гомеостаз. |
мікроскопом. Забарвлювати |
|
Будова і функція білків, вуглеводів, |
препарати. |
|
ліпідів. Розчини. Визначення |
|
|
конценрації водневих іонів. |
|
|
|
|
Біофізики, інформатика і медична |
Структурна організація біологічних |
|
апаратура |
мембран. Динамічні властивості |
|
|
мембран. Пасивний транспорт |
|
|
речовин крізь мембранні структури. |
|
|
Активний транспорт, основні види. |
|
3.2.Граф логічної структури 3.3. Рекомендована література
Основна (навчальна): Додаткова:
42. Определитель бактерий Берджи, т.1 и т.2, М., Мир, 1977.
43.Ross P.W.,Peutherer J.F. Clinical microbiology. London-ntw-York. 1987.
44.Hart T.,Shears P. Color atlas of medical microbiology, Mosby-Wolf, 1996.
45.Fields B.N.,Knipe D.M. Field’s virology., N.-Y., Raven Press, 1990. 46.Johnson A.G.,et al. Microbiologe and immunology. Baltimore, W-W, 1989. 23.Schaechter M.et al. Mechanisms of Microbial Diseases, Baltimore, W-W, 1993.
3.4. Орієнтовна карта для самостійної роботи з літературою за темою:
Виділення чистих культур аеробних бактерій (2-й етап дослідження). Культуральні властивості бактерій.
Основні завдання |
|
Вказівки |
Відповіді |
|
Вивчити: |
|
|
|
|
1. |
Ріст та розмноження |
1. |
Ріст мікроорганізмів. |
|
мікроорганізмів. |
2. |
Розмноження мікроорганізмів. |
|
|
Вегетативні форми та |
3. |
Поняття про вегетативні форми та форми |
|
|
форми спокою мікробів. |
спокою мікробів. |
|
||
2. |
Фази розмноження |
1. |
Поняття про періодичну культуру бактерій. |
|
мікробів у рідкому |
2. |
Значення періодичних культур для медичної |
|
|
живильному середовищі в |
практики. |
|
||
стаціонарних умовах. |
3. |
Фази розмноження мікробів у рідкому |
|
|
|
|
живильному середовищі. |
|
|
3. |
Колонії, особливості |
1. |
Визначення поняття “ізольована колонія” |
|
їх формування у різних |
2. |
Способи отримання ізольованих колоній. |
|
|
видів бактерій. |
3. |
Практичне значення ізольованих колоній. |
|
|
Пігментоутворення. |
4. |
Культуральні властивості бактерій – поняття |
|
|
|
|
та практичне значення визначення |
|
|
|
|
культуральних властивостей. |
|
|
4. |
Виділення чистих |
1. |
Мета 2-го етапу дослідження при виділенні |
|
культур аеробних |
чистих культур аеробних бактерій. |
|
||
бактерій (2-й етап |
2. |
План 2-го етапу. |
|
|
дослідження). |
|
|
|
|
3.5. Матеріали для самоконтролю
А. Питання для самоконтролю 32.Дайте визначення поняття: ріст бактерій.
33.Дайте визначення поняття: розмноження бактерій.
34.Дайте визначення поняття: культуральні властивості бактерій. 35.Як можуть проявлятись культуральні властивості бактерій у
рідких живильних середовищах?
36.Як можуть проявлятись культуральні властивості бактерій на щільних живильних середовищах?
37.Назвіть, які дослідження проводять на другому етапі виділення чистих культур аеробних бактерій.
38.Як може розрізнятись поверхня ізольованих колоній різних видів бактерій?
39.Що таке ізольована колонія?
40.На які групи поділяють ізольовані колонії бактерій в залежності від їх розміру?
41.Які пігментиможуть утворювати бактерії? 42.Яким можебути характер краю ізольованої колонії?
43.Якою може бути структура бактеріальної ізольованої колонії? 44.Як досліджують характер краю иа структуру ізольованих
колоній бактерій?
45.Для чого виділяють ізольовані колонії бактерій?
46.Якою може бути концистенція ізольованої колонії бактерій?
Б.Тести для самоконтролю:
1.Стерилізація вуглеводовмісних середовищ текучою парою проведена в один день: зранку, вдень та ввечорі по 30 хвилин. Як потрібно було стерилізувати середовища?
А. Стерилізувати 1 годину В. Стерилізувати 15 хвилин С. Стерилізувати 45 хвилин
Д. Середовища необхідно стерилізувати тричі з інтервалом 24 години.
Е.Стерилізувати двічі на добу
3.Після закінчення роботи в лабораторії студент повинен провести знезараження свого робочого місця. Яку хімічну речовину він повинен для цього використовувати?
А. Ефір В. Соляну кислоту
С. Антибіотики Д. Хлороформ
Е.Спирт
48. Які середовища застосовують для культивування мікроорганізмів при кишкових інфекціях?
А. Ендо (Левіна), Вісмут-сульфатний агар
В.Ендо, Борде-Жангу С. Кітта-Тароцці, Левіна
Д.Клауберга ІІ, Левіна Е. МПА, Сабуро
2.В лабораторії було приготоване середовище Ендо і розлито в чашки Петрі. Коли через 2 дні його повинні були використати для виділення кишкових бактерій, виявилося, що середовище має червоний колір. Яка найбільш імовірна помилка, зроблена при приготуванні середовища?
А. Невірно вибраний засіб стерилізації
В.Надлишкова кількість індикатора
С. Не дотримано співвідношення глюкози і лактози
Д.При розливі середовища до нього влучили бактерії з повітря
Е.Не було перевірене рН середовища
4.Матеріали для аудиторної самостійної роботи
4.3.Перелік навчальних практичних завдань, які необхідно
виконати на практичному занятті:
1.Ознайомитися з культуральними властивостями різних видів мікроорганізмів:
а) холерний вібріон у лужній пептонній воді; б) стрептокок у цукровому бульйоні;
в) лептоспіри у середовищі Уленгута; г) стафілокок у м'ясопептонному бульйоні (МПБ). Замалювати і вказати характер росту.
2.Опишіть культуральні властивості бактерій, враховуючи характер росту ізольованих колоній (заповніть таблицю).
3.Виготовити препарати з ізольованих колоній, забарвити за Грамом. Мікроскопіювати, замалювати.
13.Пересіяти ізольовані колонії № 1 і № 2 на скошений МПА з метою накопичення чистих культур бактерій.
4.4.Професійні алгоритми (орієнтовна карта), щодо опанування
навичками та вміннями.
Завдання №1. |
Вказівки: |
||
1. Ознайомитися з культуральними властивостями |
Зверніть увагу на характер росту різних видів |
||
різних видів мікроорганізмів: |
мікроорганізмів: |
||
1) |
холерний вібріон у лужній пептонній воді росте |
||
а) холерний вібріон у лужній пептонній воді; б) |
|||
|
з утворенням ніжної плівки на поверхні |
||
стрептокок у цукровому бульйоні; |
|
середовища; |
|
2) |
стрептокок у цукровому бульйоні росте з |
||
в) лептоспіри у середовищі Уленгута; г) |
|||
|
утворення м осаду; |
||
стафілокок у м'ясо-пептонному бульйоні (МПБ). |
3) |
стафілокок у м’ясо-пептонному бульйоні |
|
Замалювати і вказати характер росту. |
|
викликає дифузне помутніння середовища; |
|
|
4) |
лептоспіри у середовищі Улепгута ростуть не |
|
|
|
змінюючи живильне середовище. |
|
Завдання №2. |
Вказівки: |
||
Опишіть культуральні властивості бактерій, |
Оберіть – які характеристики відповідають |
||
враховуючи характер росту ізольованих колоній |
досліджуваній колонії: |
||
(заповніть таблицю). |
Культуральні властивості |
||
|
а) величина колоній: |
||
|
∙ |
крупні – 4-5 мм в діаметрі і більше; |
|
|
∙ |
середні – 2-4 мм; |
|
|
∙ |
мілкі – 1-2 мм; |
|
|
∙ |
карликові – менше 1 мм. |
|
|
б) форма обрисів колоній: |
||
|
∙ |
правильні округлі; |
|
|
∙ |
неправильні округлі; |
|
|
∙ |
розеткоподібна; |
|
|
∙ |
різоїдна. |
|
|
в) ступінь прозорості: |
||
|
∙ |
непрозорі; |
|
|
∙ |
напівпрозорі; |
|
|
∙ |
прозорі. |
|
|
г) колір колоній: |
||
|
∙ |
безбарвні; |
|
|
∙ |
пігментовані; |
|
|
∙ |
колір пігмента. |
|
|
д) характер поверхні: |
||
|
∙ |
гладка; |
|
|
∙ |
блискуча; |
|
|
∙ |
волога або зморшкувата; |
|
|
∙ |
матова; |
|
|
∙ |
суха. |
|
|
є) положення колонії на живильному середовищі: |
||
|
∙ |
над живильним середовищем; |
|
|
∙ |
занурені в середовище; |
|
|
∙ |
на рівні середовища (плоскі); |
|
|
∙ |
щільно прилягаючі до середовища. |
|
|
е) структура: |
||
|
∙ |
гомогенна; |
|
|
∙ |
аморфна; |
|
|
∙ |
зерниста; |
|
|
∙ |
волокниста. |
|
|
ж) характер краю: |
||