Reanim_2014
.pdf
СРАВНЕНИЕПРОЦЕССОВ НЕКРОЗАИ АПОПТОЗА
КАКАЯ РОЛЬМИТОХОНДРИЙВКЛЕТОЧНОЙДИСФУНКЦИИ ПРИАСФИКСИИ?
ЧТОПРОИСХОДИТВСТВОЛЕМОЗГАКРЫСЯТ ВУСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ГИПОКСИИ?
Ствол мозга крысят, которые испытали действие умеренной гипоксии
Перивентрикулярний отек. Микрофотография. Окраска гематоксилин-
эозином. Ок. 10; Об. 40.
ВЫВОД. У животных, которые испытали действие тяжелой гипоксии, наблюдается апонекроз и некроз нейроцитов ствола мозга, в то время как у животных, которые испытали действие умеренной гипоксии, такие явления отсутствуют.
КАКИЕИЗМЕНЕНИЯ МИТОХОНДРИЙ У КРЫСЯТВУСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ГИПОКСИИ?
Опытные |
Количество |
Удельныйвес |
Диаметр |
Сумма |
группы |
митохондрий |
поврежденных |
митохондр |
поверхносте |
|
ед/мкм2 |
митохондрий |
ий |
й |
|
(М+m) |
(%) |
d, мкм |
митохондри |
|
|
|
|
йвединице |
|
|
|
|
объема – |
|
|
|
|
Sitot, мкм2 |
|
|
|
|
|
Интактные |
14, 5± 0,5 |
2,1 |
0,20±0,02 |
3,9±0,3 |
животные |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Животные, |
13,6 ±0,8 |
6,4 |
0,34±0,04* |
4,8±0,5* |
которые |
|
|
|
|
испытали |
|
|
|
|
действие |
|
|
|
|
умеренной |
|
|
|
|
гипоксии |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Животные, |
|
|
|
|
которые |
8,0±0,6 * |
17,0* |
0,41±0,02* |
3,2±0,2* |
испытали |
|
|
|
|
действие |
|
|
|
|
тяжелой |
|
|
|
|
гипоксии |
|
|
|
|
“Структурныйдистресс”митохондрий нейроцитов
*- р<0,05 относительно показателей
крысятнафонетяжелойгипоксии.Ув.6400.
интактных животных MX - митохондрии, dMX - деструкции митохондрий, rMX – растворение митохондрий
КАКИЕМОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕИЗМЕНЕНИЯ ПРОИСХОДЯТВМИТОХОНДРИИ У КРЫСЯТВУСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ГИПОКСИИ?
Везикулярные митохондрии на фоне разрушенных форм при умеренной гипоксии. MX – митохондрии, vMX – везикулярные формы митохондрий. Ув. 6400.
Разные стадии деструкции митохондрий при тяжелой гипоксии. MX – митохондрии, dMX – деструкция митохондрий, іМХ – инкапсуляция митохондрии. Ув. 8000.
ВЫВОД. При умеренной гипоксии на электронной микроскопии отмечается большое количество везикулярних митохондрий на фоне разрушенных форм.
При тяжелой гипоксии наблюдается деструкция и дискомплексация крист, разрушение внутренней и внешней митохондриальных мембран, часто в органеллах сохранена только оболочка, имеет место их инкапсуляция. Последняя стадия изменений является одним из возможных путей запуска апоптотической программы в
клетке.
ЧТО ПРОИСХОДИТ С МИЕЛИНОМ У КРЫСЯТ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛІИ ТЯЖЕЛОЙ ГИПОКСИИ ?
Ув. 9600. Е – отек, D – деструкция
ВЫВОД. Под действием гипоксии у животных идет мозаичное разрушение миелина, которое наиболее выражено при тяжелой гипоксии и вызывает деструкцию клетки с элементами отека.
СУЩЕСТВУЕТЛИГЕНЕТИЧЕСКАЯОБУСЛОВЛЕННОСТЬ АПОПТОЗА?
Среди генов, которые отвечают за развитие апоптоза в мозге крыс, наиболее известные - индуктор CD95 АРО- 1/FAS и ингибитор апоптоза Всl-2.
ПРОАПОПТОТИЧЕСКИЙГЕН CD95
•Взапускепрограммыапоптоза
важнуюрольиграет
расположенныйнаклеточной
мембранеспецифический рецептор CD95 АРО-1/FAS, образованныйкомплексом трансмембраннихпротеинов, которыевходятв суперсемействоцитокинов
АНТИАПОПТОТИЧЕСКИЙГЕНВсl-2
•ГенВсl-2 относитсякпротеинам, которыеблокируют wtp53 и являютсяглавнымингибитором апоптоза.
•Расположен вмитохондриальной мембранеиобусловливает значительную рольвпроцессах окислительного фосфорилирования
УРОВЕНЬЭКСПРЕССИИПРОАПОПТОТИЧЕСКОГОРЕЦЕПТОРА CD95 АРО-1/FAS УКРЫСЯТВУСЛОВИЯХЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ГИПОКСИИ
Ствол мозга крысят, которые испытали действие тяжелой гипоксии
* - p<0,05 относительно интактных |
|
|
|
|
|
животных |
Слабая экспрессия (1 балл) проапоптотического |
||||
** - p<0,05 относительно животных с |
рецептора CD95 АРО-1/FAS в цитоплазме |
одиночных |
|||
умеренной гипоксией |
нейроцитов. |
Иммуногистохимическая |
реакция, |
||
|
|
непрямий |
стрептовидин-пероксидазный |
метод |
|
|
|
||||
|
|
выявления |
экспрессии |
CD95 |
АРО-1/FAS. |
ВЫВОД. |
Микрофотография. Ок. 10; Об. 40. |
Апонекроз и некроз нейроцитов ствола мозга, наблюдаемый при |
|
тяжелой |
гипоксии и отсутствие этих изменений у животных, которые |
испытали действие умеренной гипоксии, по нашему мнению, обусловлен достоверно более низким уровнем экспрессии проапоптотического гена
CD95.
УРОВЕНЬЭКСПРЕССИИАНТИАПОПТОТИЧЕСКОГОГЕНАВСL-2 УКРЫСЯТВ УСЛОВИЯХЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙМОДЕЛИГИПОКСИИ
Ствол мозга крысят, которые испытали действие тяжелой гипоксии.
*- p<0,05 относительно интактных животных
**- p<0,05 относительно животных с умеренной гипоксией
Увеличение экспрессии гена Всl-2 (3 балла) в цитоплазме нейроцитов. иммуногистохимичная реакция, непрямий стрептовидин – пероксидазний метод выявления экспрессии Всl-2. Микрофотография. Ок. 10; Об. 40.
ВЫВОД. Выявлено достоверно высший уровень экспрессии антиапоптотического протеина Всl-2 у крысят при тяжелой гипоксии, чем у интактных животных и животных, которые испытали действие умеренной гипоксии.
Что можетлежатьвоснове проблемытяжестиасфиксии?