Gosudarstvennaya_farmakopeya_RB

2.5. МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

2.5.1. КИСЛОТНОЕ ЧИСЛО

Кислотным числом IА называют массу (в мг) калия гидроксида, необходимую для нейтрализации свободных кислот, содержащихся в 1 г испытуемого вещества.

Около 10,00 г или указанную в частной статье навеску испытуемого вещества (г) растворяют в 50 мл смеси равных объемов спирта Р и эфира Р, предварительно нейтрализованной 0,1 М раствором калия гидроксида, если нет других указаний в частной статье, используя в качестве индикатора 0,5 мл раствора фенолфталеина Р1.

#Если испытуемое вещество в целях консервации было насыщено углерода диоксидом Р, перед взвешиванием его выдерживают в выпарительной чашке в течение 24 ч в вакуум-эксикаторе.

#Если испытуемое вещество не растворяется в смеси растворителей, к колбе

присоединяют обратный холодильник и слегка нагревают на теплой водяной бане при постоянном перемешивании до растворения вещества. Затем прибавляют

0,5 мл раствора фенолфталеина Р1 и титруют 0,1 М раствором калия гидроксида

до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 15 с.

#Если объем 0,1 М раствора калия гидроксида, требуемый для титрования,

менее 2 мл, то соответствующим образом увеличивают массу навески испытуемого вещества или используют разбавленный титрант (в последнем случае вносят соот- ветствующие изменения в формулу расчета).

Кислотное число IА вычисляют по формуле:

I А = 5,610 ×V , m

где:

V – объем 0,1 М раствора калия гидроксида, израсходованного на титрование, в миллилитрах; 5,610 – масса калия гидроксида, соответствующая 1 мл 0,1 М раствора калия

гидроксида, в миллиграммах;

m – масса навески испытуемого вещества, в граммах.

2.5.2. ЭФИРНОЕ ЧИСЛО

Эфирным числом IЕ называют массу (в мг) калия гидроксида, необходимую для омыления эфиров, содержащихся в 1 г испытуемого вещества.

# Эфирное число IЕ определяют по разности между числом омыления и кислотным числом и вычисляют по формуле:

I E = I S - I A ,

где:

IS – число омыления;

IА – кислотное число.

2.5.3. ГИДРОКСИЛЬНОЕ ЧИСЛО

Гидроксильным числом IОН называют массу (в мг) калия гидроксида, эквивалентную массе кислоты, связывающейся при ацилировании 1 г испытуемого вещества.

МЕТОД А

Навеску испытуемого вещества, в соответствии с табл. 2.5.3.-1, помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 150 мл, если нет других указаний в

частной статье. Прибавляют объем раствора уксусного ангидрида Р1, указанный в таблице 2.5.3.-1.

К колбе присоединяют воздушный холодильник, помещают в кипящую водяную баню, поддерживая уровень воды в бане на 2,5 см выше уровня жидкости в колбе, и нагревают в течение 1 ч. Затем через верхний конец воздушного

холодильника прибавляют 5 мл воды Р. При помутнении к раствору прибавляют пиридин Р до полного исчезновения мути, отмечая израсходованный объем. Колбу встряхивают, помещают в кипящую водяную баню на 10 мин. Затем колбу извлекают

из водяной бани и охлаждают до комнатной температуры. Воздушный холодильник и

стенки колбы промывают 5 мл спирта Р, предварительно нейтрализованного

раствором фенолфталеина Р1. Полученный раствор титруют 0,5 М раствором

калия гидроксида спиртовым, используя в качестве индикатора 0,2 мл раствора

фенолфталеина Р1.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Гидроксильное число Iон вычисляют по формуле:

где:

V1 – объем 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованного на титрование испытуемого вещества в миллилитрах;

V2 – объем 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на

титрование в контрольном опыте в миллилитрах;

m – масса навески испытуемого вещества, в граммах;

28,05 – масса калия гидроксида, которая соответствует 1 мл 0,5 М раствора калия гидроксида, в миллиграммах;

IА – кислотное число.

МЕТОД В

Навеску испытуемого вещества помещают в сухую коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 5 мл и прибавляют 2,0 мл пропионового ангидрида реактива Р. Колбу закрывают, осторожно встряхивают до растворения вещества и оставляют на 2 ч, если нет других указаний в частной статье. Затем

содержимое колбы помещают в коническую колбу с широким горлом вместимостью

500 мл, в которой содержится 25,0 мл раствора 9 г/л анилина Р в циклогексане Р и 30 мл кислоты уксусной ледяной Р.Полученный раствор перемешивают, оставляют на 5 мин, прибавляют 0,05 мл раствора кристаллического фиолетового Р и

титруют 0,1 М раствором кислоты хлорной до появления ярко-зеленого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

где:

V1 – объем 0,1 М раствора кислоты хлорной, израсходованной на титрование

испытуемого вещества, в миллилитрах;

V2 – объем 0,1 М раствора кислоты хлорной, израсходованной на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах;

m – масса навески испытуемого вещества в граммах;

5,610 – масса калия гидроксида, которая соответствует 1 мл 0,1 М раствора калия гидроксида, в миллиграммах.

Количество воды, содержащейся в испытуемом веществе, определяют

полумикрометодом (2.5.12).

Пересчет гидроксильного числа Iон проводят по формуле:

Iон = (найденное значение гидроксильного числа вещества) – 31,1 · у ,

где:

у – содержание воды в испытуемом веществе, в процентах.

2.5.4. ЙОДНОЕ ЧИСЛО

Йодным числом Ii называют массу (в г) галогена в пересчете на йод, которое может связаться со 100 г испытуемого вещества в описанных условиях.

Метод А

Если нет указаний в частной статье, используют метод А. Замена метода А методом В требует проведения валидации.

Навеску вещества (в соответствии с Табл. 2.5.4.-1, если нет других указаний в частной статье) помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл,

предварительно высушенную или промытую кислотой уксусной ледяной Р, растворяют в 15 мл хлороформа Р, если нет других указаний в частной статье. К

полученному раствору медленно прибавляют 25,0 мл раствора йода бромида Р.

Колбу закрывают пробкой и выдерживают в темном месте при частом

перемешивании в течение 30 мин, если нет других указаний в частной статье. Прибавляют 10 мл раствора 100 г/л калия йодида Р, 100 мл воды Р и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при интенсивном перемешивании до светло-

желтой окраски, затем прибавляют 5 мл раствора крахмала Р и титруют 0,1 М

раствором натрия тиосульфата по каплям до обесцвечивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Йодное число II вычисляют по формуле:

где:

V1 – объем 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование испытуемого вещества, в миллилитрах;

V2 – объем 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование

в контрольном опыте, в миллилитрах; т — масса навески испытуемого вещества, в граммах.

Метод В

Масса испытуемого вещества должна быть такая, что избыток добавленного

раствора йода хлорида Р должен составлять 50 - 60 % от общего количества, т.е.

100 - 150 % от связанного количества.

Навеску испытуемого вещества (в соответствии с Табл. 2.5.4.-2, если нет

других указаний в частной статье) помещают в колбу с притертой пробкой

вместимостью 250 мл, предварительно высушенную или промытую кислотой уксусной ледяной Р, растворяют в 15 мл смеси равных объемов циклогексана Р – кислота уксусная ледяная Р, если нет других указаний в частной статье. Если необходимо, вещество

расплавляют перед растворением (точка плавления более 50 º С). Очень медленно

добавляют объем раствора йода хлорида Р, соответствующий табл. 2.5.4. - 2. Колбу

закрывают пробкой и выдерживают в темном месте при частом перемешивании в течение 30 мин, если нет других указаний в частной статье. Прибавляют 10 мл

раствора 100 г/л калия йодида Р, 50 мл воды Р и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при постоянном, интенсивном перемешивании до светло-желтой окраски. Добавляют 5 мл раствора крахмала Р и продолжают титрование, добавляя

по каплям 0,1 М раствор натрия тиосульфата до полного обесцвечивания.

Параллельно проводят контрольный опыт. Йодное число II вычисляют по формуле:

где:

V1 – объем 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование

испытуемого вещества, в миллилитрах;

V2 – объем 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах;

т— масса навески испытуемого вещества, в граммах.

#Метод С.

#Допускается проводить определение йодного числа по следующей

методике.

Навеску испытуемого вещества (в соответствии с Табл. 2.5.4.-3) помещают в

сухую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, растворяют в 3 мл хлороформа Р, если нет других указаний в частных статьях, медленно прибавляют

20,0 мл раствора йода хлорида Р (0,1 М).

Колбу закрывают пробкой, смоченной раствором 10 г/л калия йодида Р, и выдерживают в темном месте при частом перемешивании в течение 1 ч, если нет других указаний в частной статье. Прибавляют 10 мл раствора 100 г/л калия йодида Р, 50 мл воды Р и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при постоянном,

интенсивном перемешивании до светло-желтой окраски, затем прибавляют 3 мл xлороформа Р, интенсивно перемешивают, прибавляют 5 мл раствора крахмала Р

и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата по каплям до обесцвечивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

# При анализе твердых жиров навеску растворяют в 6 мл эфира Р, прибавляют 20,0 мл 0,1 М раствора йода хлорида Р. Дальнейшее определение

проводят как указано выше.

2.5.5. ПЕРЕКИСНОЕ (ПЕРОКСИДНОЕ) ЧИСЛО

Перекисным (пероксидным) числом I p называют количество эквивалентов (в

ммоль) активного кислорода, соответствующее количеству пероксидов, содержащееся в 1000 г испытуемого вещества, определяемое методами, приведенными ниже.

Если нет указаний в частной статье, используют метод А. Замена метода А методом Б в этом случае требует проведения валидации.

МЕТОД А

Около 5,00 г испытуемого вещества помещают в коническую колбу с притертой стеклянной пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 30 мл смеси:

хлороформ Р - кислота уксусная ледяная Р (2:3). Колбу встряхивают до растворения вещества, прибавляют 0,5 мл насыщенного раствора калия йодида Р, перемешивают в течение 1 мин и прибавляют 30 мл воды Р. Полученный раствор

титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата, медленно добавляя титрованный

раствор при непрерывном перемешивании почти до полного исчезновения желтой окраски. Затем прибавляют 5 мл раствора крахмала Р и продолжают титровать,

интенсивно перемешивая до обесцвечивания раствора.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Объем 0,01 М раствора натрия тиосульфата Р, израсходованный на

титрование в контрольном опыте, не должен превышать 0,1 мл.

Пероксидное число рассчитывают по формуле:

I p = 10×(V1 -V2 ) , m

где:

V1 — объем 0,01 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование испытуемого вещества, в миллилитрах;

V2 — объем 0,01 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на

титрование в контрольном опыте, в миллилитрах;

m — масса навески испытуемого вещества, в граммах.

МЕТОД В

Испытания проводят в защищенном от света месте.

Навеску испытуемого вещества, в соответствии с таблицей 2.5.5.-1, помещают в коническую колбу с притертой стеклянной пробкой, прибавляют 50 мл смеси:

триметилпентан Р - кислота уксусная ледяная Р (2:3).

Колбу закрывают пробкой и содержимое перемешивают до растворения вещества. К полученному раствору мерной пипеткой прибавляют 0,5 мл

насыщенного раствора калия йодида Р. Колбу закрывают пробкой, оставляют на

60 ± 1 с, тщательно встряхивая раствор не менее трех раз, прибавляют 30 мл воды Р и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, добавляя титрованный раствор

постепенно при постоянном и интенсивном перемешивании почти до полного исчезновения желтой окраски йода. Затем прибавляют около 0,5 мл раствора крахмала Р1 и продолжают титрование при постоянном интенсивном

перемешивании вблизи точки эквивалентности с целью полного высвобождения

йода из слоя органического растворителя. Раствор натрия тиосульфата прибавляют по каплям, до исчезновения синей окраски.

Если объем 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на

титрование, менее 0,5 мл, определение повторяют с 0,01 М раствором натрия тиосульфата при постоянном и интенсивном перемешивании.

Примечание: Для пероксидных чисел около 70 и более наблюдается задержка обесцвечивания индикатора крахмала от 15 с до 30 с, что обусловлено способностью триметилпентана всплывать на поверхность водной фазы. Поэтому

необходимо время для смешивания растворителя с титрованным раствором для

полного высвобождения йода. Для пероксидных чисел менее 15 рекомендуют использовать 0,01 М раствор натрия тиосульфата. С целью предотвращения

расслоение фаз и быстрого высвобождения йода, к реакционной смеси допускается

прибавление небольшого количества (0,5 % - 1 % (м/м)) эмульгатора с высоким

гидрофильно-липофильным балансом (ГЛБ).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Если объем титрованного раствора, израсходованный на титрование в контрольном опыте, превышает 0,1 мл, испытание повторяют со

свежеприготовленными реактивами.

Пероксидное число I p рассчитывают по формуле:

I p = 1000×(V1 -Vо ) ×c , m

где:

с – концентрация раствора натрия тиосульфата, в молях на литр;

V1 – объем раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование

вещества, в миллилитрах;

V0 – объем раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в

контрольном опыте, в миллилитрах; т – масса навески испытуемого вещества, в граммах.

2.5.6. ЧИСЛО ОМЫЛЕНИЯ

Числом омыления IS называют массу (в мг) калия гидроксида, необходимую для нейтрализации свободных кислот и омыления сложных эфиров, содержащихся в 1 г испытуемого вещества.

Навеску испытуемого вещества (в соответствии с Табл.2.5.6.-1, если нет

других указаний в частной статье) помещают в колбу из боросиликатного стекла вместимостью 250 мл, снабженную обратным холодильником.

# Если испытуемое вещество в целях консервации было насыщено углерода диоксидом, перед взвешиванием его выдерживают в выпарительной чашке в

течение 24 ч в вакуум-эксикаторе.

Прибавляют 25,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и

несколько стеклянных шариков. К колбе присоединяют обратный холодильник и

нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, если нет других указаний в

частной статье. Прибавляют 1 мл раствора фенолфталеина Р1 и горячий раствор тотчас титруют 0,5 М раствором кислоты хлористоводородной.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Число омыления Is вычисляют по формуле:

IS = 28,5 ×(V2 -V1 ) , m

где:

V1 — объем 0,5 М раствора кислоты хлористоводородной, израсходованный на титрование испытуемого вещества, в миллилитрах;

V2 — объем 0,5 М раствора кислоты хлористоводородной, израсходованный на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах; т – масса навески испытуемого вещества, в граммах;

28,05 – масса калия гидроксида, соответствующая 1 мл 0,5 М раствора кислоты хлористоводородной, в миллиграммах.

2.5.7. НЕОМЫЛЯЕМЫЕ ВЕЩЕСТВА

Термин «Неомыляемые вещества» применяется к веществам, нелетучим при температуре от 100ºС до 105ºС, которые экстрагируются органическим растворителем из испытуемого вещества после его омыления. Содержание

неомыляемых веществ вычисляют в процентах (м/м).

Следует использовать стеклянную посуду со шлифами без смазки.

Навеску испытуемого вещества (m, г), указанную в частной статье, помещают

в колбу вместимостью 250 мл, снабженную обратном холодильником. Прибавляют

50 мл 2 М раствора калия гидроксида спиртового Р и нагревают на водяной бане в

течение 1 ч, периодически перемешивая круговыми движениями. Затем охлаждают до температуры ниже 25ºС и количественно переносят содержимое колбы в

делительную воронку с помощью 100 мл воды Р. Полученный раствор осторожно встряхивают с тремя порциями эфира, свободного от пероксидов, Р по 100 мл каждая. Все эфирные извлечения собирают в отдельную делительную воронку, в

которую предварительно помещают 40 мл воды Р, осторожно встряхивают в течение нескольких минут, позволяют смеси полностью расслоиться, после чего отбрасывают водный слой. Эфирный слой промывают двумя порциями воды Р, по

40 мл каждая. Затем тщательно промывают поочередно 40 мл 30 г/л раствора калия гидроксида Р и 40 мл воды Р; повторяют данную процедуру три раза. Затем эфирный слой несколько раз промывают 40 мл воды Р, до отсутствия щелочной

реакции в водном слое по фенолфталеину. Эфирный слой количественно переносят

в доведенную до постоянной массы колбу с помощью эфира, свободного от пероксидов Р.

Эфир отгоняют с соответствующими предосторожностями и к остатку

прибавляют 6 мл ацетона Р. Затем аккуратно удаляют растворитель в потоке

воздуха. Остаток в колбе сушат до постоянной массы при температуре от 100ºС до 105ºС, охлаждают в эксикаторе и взвешивают (а, г).

Содержание неомыляемых веществ вычисляют по формуле:

где:

а – масса остатка, г;

m – масса испытуемого вещества, г.

Остаток растворяют в 20 мл спирта Р, предварительно нейтрализованного по

раствору фенолфталеина Р, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида

спиртовым. Если объем 0,1 М раствора натрия гидроксида спиртового,

пошедшего на титрование, более 0,2 мл, расслоение слоев прошло не полностью; при этом взвешенный остаток не может рассматриваться как «Неомыляемые

вещества». В этом случае испытания необходимо повторить.

2.5.8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИННОГО АЗОТА В СОЕДИНЕНИЯХ, КОТОРЫЕ СОДЕРЖАТ ПЕРВИЧНУЮ АРОМАТИЧЕСКУЮ АМИНОГРУППУ

# Нитритометрическое титрование применяют для количественного

определения соединений, содержащих первичную или вторичную ароматическую

аминогруппу, для определения гидразидов, а также ароматических нитросоединений после предварительного восстановления нитрогруппы до аминогруппы.

Растворяют указанное количество испытуемого вещества в 50 мл кислоты

хлористоводородной разбавленной Р или в другом указанном растворителе и прибавляют 3 г калия бромида Р. Охлаждают в воде со льдом и затем медленно

титруют, при постоянном перемешивании, 0,1 М раствором натрия нитрита поддерживая температуру раствора около 15°C, если нет других указаний в частной статье.

# Перед началом титрования прибавляют 0,1 М раствор натрия нитрита со

скоростью 2 мл/мин. К концу титрования (приблизительно за 0,5 мл до

эквивалентного количества) скорость титрования уменьшают до 0,05 мл/мин.

#Конечную точку титрования определяют электрометрическими методами (2.2.19 или 2.2.20) или с помощью внутренних индикаторов, или внешнего

индикатора.

#При потенциометрическом титровании в качестве индикаторного электрода

применяют платиновый электрод, электродом сравнения служит хлоридсеребряный или насыщенный каломельный электрод.

#В качестве внешнего индикатора используют йодкрахмальную бумагу. Титрование проводят, пока через 1 мин, если нет других указаний в частной статье, после прибавления 0,1 М раствора натрия нитрита капля титруемого раствора, взятая с помощью стеклянной палочки, не будет вызывать синее окрашивание

бумаги. Параллельно проводят контрольный опыт.

#В качестве внутренних индикаторов используют тропеолин 00 (0,2 мл

раствора тропеолина 00 Р), тропеолин в смеси с метиленовым синим (0,2 мл

раствора тропеолина 00 Р и 0,1 мл раствора метиленового синего Р) или раствор нейтрального красного 5 г/л (0,1 мл раствора в начале титрования и 0,1 мл в конце

титрования). Титрование с тропеолином 00 проводят до перехода окраски от

красной к желтой, со смесью тропеолина 00 с метиленовым синим – от красно- фиолетовой к голубой, с нейтральным красным – от красно-фиолетовой к синей.

Выдержку в конце титрования с нейтральным красным увеличивают до 2 мин.

2.5.9.ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЗОТА ПОСЛЕ МИНЕРАЛИЗАЦИИ СЕРНОЙ КИСЛОТОЙ

#Прибор для определения азота (Рис. 2.5.9.-1) состоит из парообразователя

1 с предохранительной трубкой 2, сменных грушевидных колб с длинным горлом 3,

воронки для ввода раствора натрия гидроксида 4 с зажимом или краном 5, брызгоуловителя 6, прямого холодильника 7 и сменных конических колб – приемников 8. В случае применения прибора, в котором для соединения отдельных частей используются резиновые трубки и пробки, перед первым употреблением их

необходимо прокипятить в течение 10 мин в 5% растворе натрия гидроксида и тщательно промыть водой Р.

ПОЛУМИКРОМЕТОД

Указанную массу испытуемого вещества (m, г), содержащего около 2 мг азота, помещают в колбу для сжигания, прибавляют 4 г измельченной смеси, состоящей из

100 г калия сульфата Р, 5 г меди сульфата Р и 2,5 г селена Р, и три стеклянных шарика. Смывают прилипшие к горлу колбы частицы 5 мл кислоты серной Р, таким образом, чтобы кислота стекала по стенкам колбы. Содержимое колбы