Практические работы.

1. Приготовление нервно-мышечного препарата и препарата изолированной икроножной мышцы лягушки.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой приготовления НМП и икроножной мышцы лягушки.

ОСНАЩЕНИЕ: препаровальный набор инструментов, лоток, салфетки, операционный столик, раствор Рингера, лягушка.

ХОД РАБОТЫ:

1. Обездвиживание лягушки. Существует несколько способов обездвиживания: наркотизация (например, эфирный наркоз), введение миорелаксантов в подкожный лимфатический мешок, разрушение ЦНС путём декапитации и введения препаровальной иглы в спинномозговой канал.

Этапы приготовления нервно-мышечного препарата и изолированной мышцы. а – перерезка позвоночника; б – снятие кожи с лапок; в – препарат задних лапок; г – отрезание уростиля; д – расположение бедра; е – препарирование седалищного нерва; ж – места перерезания лапки; з – нервно-мышечный препарат икроножной мышцы; и – препарат изолированной мышцы.

2. Приготовление препарата двух задних лапок. Позвоночник перерезается на один см выше проксимального конца копчика (примерно посередине туловища), отделяются внутренности вместе с передним отделом туловища. С помощью марлевых повязок - через первую - удерживают остаток позвоночника, через вторую – захватывают кожу и быстрым движением удаляют её с лапок.

3. Приготовление препарата одной лапки. Препарат задних лапок берётся в левую руку за остаток позвоночника (через марлю) и срезается ножницами хвостовая кость (уростиль). Препарат переворачивается на вентральную поверхность и под контролем зрения (чтобы не повредить нервные стволы крестцового сплетения) разрезается продольно по средней линии позвоночника на две половины. Один препарат помещается в стаканчик с раствором Рингера, другой – используется для приготовления нервно-мышечного препарата.

4. Приготовление нервно-мышечного препарата. Заключается в препарировании икроножной мышцы и седалищного нерва.

Препарирование икроножной мышцы начинается с области пяточного (ахиллова) сухожилия. Под сухожилие подводят браншу ножниц, отделяют его по всей длине и перерезают ниже сесамовидной косточки. Захватив конец пяточного сухожилия пинцетом, отводят икроножную мышцу в сторону, разрывая фасции, соединяющие её с другими тканями.

При препарировании нерва препарат переворачивают задней (дорсальной) поверхностью кверху. Двумя большими пальцами рук раздвигают мышцы бедра и обнажают лежащий в глубине седалищный нерв. С помощью стеклянных крючков препарируют нерв на всём протяжении до коленного сустава, подрезая все веточки нерва ножницами. Затем, перерезают конечность выше и ниже коленного сустава.

5. Приготовление препарата изолированной мышцы. От нервно-мышечного препарата отсекают нерв.

2. Сравнение возбудимости нерва и скелетной мышцы.

Сокращение мышцы в экспериментальных условиях может быть достигнуто как раздражением самой мышцы (прямое раздражение), так и раздражением двигательного нерва, иннервирующего данную мышцу (непрямое раздражение). Мерой возбудимости является пороговая сила раздражителя.

ЦЕЛЬ: сравнить возбудимость нервной и мышечной тканей.

ОСНАЩЕНИЕ: стимулятор, электроды, универсальный штатив со столиком Энгельмана, раствор Рингера, нервно-мышечный препарат.

ХОД РАБОТЫ: нерв нервно-мышечного препарата помещается на электроды стимулятора, определяется пороговая сила раздражителя, вызывающая возбуждение нерва и сокращение мышцы. Затем электроды помещаются на мышцу. Пороговая сила, подобранная для непрямого раздражения, оказывается недостаточной для прямого раздражения мышцы. Увеличивайте силу раздражителя до тех пор, пока мышца не ответит сокращением.

Непрямое раздражение мышцы	Прямое раздражение мышцы

Пороговые значения силы раздражения	нерв	скелетная мышца