Практические работы.

Счётная камера Горяева представляет собой толстую стеклянную пластину (предметное стекло) с углублением в центре, равным 1/10 мм. На дне камеры нанесены две сетки Горяева, разграниченные глубокой поперечной канавкой. Сбоку от сеток находятся стеклянные прямоугольные пластинки, к которым притирают специальные шлифовальные покровные стекла. Сетка Горяева представляет собой квадрат 3 х 3 мм, который разделен сверху и слева на 15 равных частей и состоит из 225 больших квадратов. Каждый третий ряд как сверху, так и слева разделен еще на 4 части и таким образом на пересечении образуются квадраты, разделенные на 16 малых. Большие квадраты, рассеченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или горизонтальными линиями; и квадратами чистыми, без линий.

Счётная камера Горяева. Меланжеры.

а) – вид сверху; б) – вид сбоку; а – для эритроцитов

в) – сетка Горяева. б – для лейкоцитов

Сторона большого квадрата 1/5 мм; площадь большого квадрата 1/25 мм²; глубина камеры равна 1/10 мм; объем большого квадрата 1/250 мм³.

Сторона малого квадрата 1/20 мм; площадь малого квадрата 1/400 мм²; глубина камеры равна 1/10 мм; объем малого квадрата 1/4000 мм³.

Для исключения ошибок подсчёта форменных элементов, связанных с их нахождением на границах квадратов, применяют правило Егорова: клетки считают внутри квадрата и на его верхней и левой границах.

1. Подсчёт эритроцитов в камере Горяева.

Камера Горяева должна быть сухой и чистой. К ней притирают покровное стекло до появления радужных полос (только при этих условиях соблюдается правильный объем камеры). Смеситель (меланжер) также должен быть чистым и обязательно сухим, на его короткий капилляр надевают резиновую трубку с грушей. В меланжер для эритроцитов (красная палочка в шарообразном расширении) до нижней метки "0,5" набирают кровь, погрузив в нее кончик смесителя; затем до метки "101" за шарообразным расширением 3% гипертонический раствор, в котором эритроциты сморщиваются - кровь разводится в 200 раз. Кровь набирают строго до метки, но если получилось больше, необходимо выпустить на ватку или фильтровальную бумагу. Закончив набор жидкости, переведите смеситель (меланжер) в горизонтальное положение, снимите резиновую трубку, закройте капилляр с обеих сторон большим и указательным пальцами и тщательно перемешайте кровь с жидкостью в расширении смесителя, встряхивая его. Кровь готова для подсчета эритроцитов. Полученной смесью заполняют счетную камеру Горяева. После заполнения камеры оставьте на 1-2 минуты в покое для оседания форменных элементов, приступайте к подсчету при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения (диафрагма прикрыта и несколько опущен конденсор). Эритроциты считают в 5 больших (5 * 16 = 80 малых) квадратах. Подсчёт производят по формуле: Э = А*4000*200*10^⁶/80

где Э - количество эритроцитов в 1 л крови; А - сумма эритроцитов в 5-ти больших квадратах (80-ти малых); 4000 - множитель, приводящий к объёму крови 1 мкл (объём малого квадрата 1/4000 мкл); 200 - разведение крови (кровь в меланжере разводится в 200 раз); 80 - число малых квадратов; 10^⁶ - количество мкл в одном литре. Количество эритроцитов в норме: у женщин 3,9-4,7 10^¹² /л; у мужчин 4-5 10^¹² /л.

Произведите подсчёт количества эритроцитов в 1 л крови, сделайте заключение о соответствии полученных результатов нормативным.