- •Учебно-методический комплекс
- •Раздел 3. Методические рекомендации для студентов, в том числе для самостоятельной аудиторной и внеаудиторной работы Ижевск 2008
- •Раздел 1: морфология микроорганизмов. Лабораторное занятие №1.
- •Работа № 1: Правила работы в бактериологической лаборатории.
- •Работа №2: Устройство оптического микроскопа. Иммерсионная система.
- •Работа №3: Правила приготовления микропрепаратов. Приготовление микропрепаратов из чистой культуры.
- •Работа № 4: Приготовление мазков из культур с плотной питательной среды и окраска их простым методом.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №2.
- •Работа №1: Отличия прокариот и эукариот:
- •Работа №2: Сложные методы окраски бактерий. Метод Грама.
- •Работа № 4: Методы определения подвижности микробов. Темнопольная микроскопия.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №3.
- •По Граму.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие № 4.
- •Раздел 2. Физиология микроорганизмов. Лабораторное занятие № 5
- •Работа № 1: Способы получения чистых культур бактерий.
- •Работа № 2: Основные требования к питательным средам
- •Работа № 3: Жидкие и плотные питательные среды.
- •Работа № 4: Методы механического разобщения бактерий. Техника посева бактерий бак.Петлей.
- •Работа № 5: Схема выделения чистой культуры аэробных бактерий (зарисовать)
- •Работа № 6: Характер роста бактерий на жидких питательных средах
- •Работа №7: Описание полонии (паспорт колонии).
- •Работа №1: Среды для определения сахаролитических свойств бактерий.
- •Работа № 2: «Пестрый ряд» кишечной палочки
- •Работа № 3: Факторы патогенности стафилококка
- •Работа 5: Среды для выращивания анаэробов
- •Работа № 7: Схема выделения чистой культуры анаэробов.
- •Работа № 8: Изучение чистой культуры, выделенной самостоятельно при проведении уирс
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие № 7
- •Работа № 1: Техника овоскопии, заражения и вскрытия куриного эмбриона.
- •Работа №2: Культуры клеток для культивирования вирусов.
- •Работа №3: Питательные среды для культур клеток:
- •Работа №4: Методы индикации вирусов
- •Работа №5: Строение бактериофага.
- •Работа № 6: Получение бактериофагов.
- •Работа № 7: Методы титрования фагов.
- •Работа №8: Методы фагодиагностики:
- •Работа № 9: Диагностические и лечебно-профилактические фаги.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №8.
- •Лабораторное занятие №9
- •Фагоцитоз -
- •Работа № 4: определение лизоцима в биологических жидкостях методом титрования
- •Основные понятии по теме
- •Работа № 1: ориентировочная реакция агглютинации (ра) для определения неизвестной культуры
- •Работа №2: развернутая реакция агглютинации (ра) при определении неизвестной культуры
- •Работа № 4: Реакция непрямой гемагглютинации (рнга) при серодиагностике инфекций
- •Работа № 5: Реакция иммунофлюоресценции (риф)
- •Работа № 7: диагностические препараты, используемые для постановки изучаемых реакций
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 11
- •Работа №2: определение токсигенности дифтерийной палочки
- •Работа №6: реакция нейтрализации in vivo на белых мышах при диагностике ботулизма
- •Работа №7: иммунопрепараты по теме занятия
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №12
- •Работа №1: кожно-аллергические пробы (кап) с инфекционными аллергенами
- •Иммуномодуляторы:
- •Работа №2: иммуноферментный анализ (ифа) для определения антител в парных сыворотках
- •Работа №3: реакции розеткообразования (е-рок, еас-рок) и бластной трансформации лимфоцитов (рбтл)
- •Работа №4: оценка иммунного статуса человека и иммунограмма здорового человека
- •Работа №5: реакция торможения гемагглютинации (ртга) для идентификации вируса гриппа
- •Работа №6: ртга в парных сыворотках на определение антител при серодиагностике гриппа
- •Работа №7: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» при идентификации вируса полиомиелита
- •Работа №8: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» на определение антител при серодиагностике полиомиелита
- •Работа №9: иммунопрепараты по изучаемой теме
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 16
- •Работа № 1: классификация вакцин
- •Работа №2: Календарь профилактических прививок приказ от 27.06.2001 № 229
- •Работа №3: приготовление убитой вакцины
- •Других иммунопрепаратов
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 17
- •Цель: оценить степень усвоения теоретического материала и практических навыков по теме: «Инфекция и иммунитет»
- •Практическое занятие № 2
- •Возбудители брюшного тифа и паратифов а и в
- •Лабораторная диагностика брюшного тифа
- •Возбудители сальмонеллезных токсикоинфекций
- •Возбудители внутрибольничных сальмонелезных инфекций
- •Возбудитель кишечного иерсиниоза
- •Возбудители кишечного кампилобактериоза
- •Возбудитель холеры
- •Методы экспресс- диагностики:
- •Возбудитель ботулизма
- •Лабораторная диагностика ботулизма
- •Возбудитель протейной токсикоинфекции
- •Стафилококки
- •Лабораторная диагностика
- •Проблема госпитальной стафилококковой инфекции
- •Возбудители:__________________________________________________________________________________________________________
- •Стрептококки
- •Гломерулонефрит
- •Менингококковая инфекция
- •Менингококковый сепсис
- •Менингит
- •Практическое занятие № 6
- •Микоплазмы пневмонии
- •Хламидии пневмонии
- •Лабораторная диагностика
- •Гемофильная палочка
- •Бактериологический метод диагностики
- •Возбудитель столбняка
- •Возбудители анаэробной газовой инфекции
- •Диагностика раневой анаэробной инфекции
- •Лабораторная диагностика
- •Практическое занятие № 8
- •Возбудитель дифтерии
- •Лабораторная диагностика
- •Определение антитоксического иммунитета:
- •Лабораторная диагностика
- •Рнга практическое занятие № 9
- •Возбудители туберкулеза
- •Лабораторная диагностика
- •Возбудители актиномикоза
- •Лабораторная диагностика
- •Лабораторная диагностика
- •Практическое занятие № 10
- •Возбудители бруцеллеза
- •Лабораторная диагностика
- •Ра: Реакция Хеддельсона
- •Ифа, рнга, рск, кап
- •Прямая риф, рнга, рск, кап
- •Алгоритм ответа
- •Культивирование: лабораторные животные
- •Работа 1: Культура фибробластов в норме и при цпд вируса.
- •Работа 4. Идентификация вируса гриппа в ртга
- •Работа 6: рск при диагностике кори.
- •Сравнительная характеристика возбудителей вирусных респираторных инфекций (таблица)
- •Лабораторное занятие №13
- •Работа 1: Реакция нейтрализации «цветня проба» при идентификации вируса полиомиелита в исследуемом материале.
- •Работа реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» на определение антител при серодиагностике полиомиелита
- •Работа 1: Оценить готовый результат ифа в парных сыворотках при серодиагностике клещевого энцефалита (определение IgM)
- •Работа3.: Метод флюоресцирующих антител-мфа (н риф) при серодиагностике глпс.
- •Практическое занятие № 15.
- •Работа 1: тельца Пашена и тельца Гварниери при натуральной оспе
- •Работа 2: структура вируса вич
- •Антигены вич
- •Работа 3: иммуноблотинг при диагностике вич-инфекции
- •Практическое занятие № 16.
- •Практическое занятие № 17
- •Гонококк
- •Бледная трепонема
- •Возбудители урогенитального хламидиоза
- •Возбудители риккетсиозов
- •Лабораторная диагностика
- •Возбудители возвратного тифа
- •Лабораторная диагностика
- •Список основной литературы
Работа 5: Среды для выращивания анаэробов
1. Среда Цейсслера (глюкозо – кровяной агар) в чашке Петри
Принцип:
___________________________
___________________________
2. Среда Китта-Тароцци (сахарный бульон, кусочки паренхиматозных органов, высокий столбик, слой вазелинового масла).
Принцип:
______________________
______________________
исходная с ростом
3. Среда Вильсона-Блера - железосульфитный агар ( 3% МПА + 1% глюкозы+ 20% сульфит натрия + 8% хлорид железа) разливают высоким столбиком, сверху вазелиновое масло. Позволяет выявить сероводородную активность
Принцип:
______________________
______________________
исходная с ростом.
4. Тиогликолевая среда – используется как жидкая, так и полужидкая и плотная.
5. Молоко по Тукаеву (1% пептонная вода + 5% обезжиренного молока) используется для выявления протеолитической активности бактерий.
Работа 6: Рост анаэробов при посеве на молоко.
Большинство анаэробов вызывают створаживание молока.
Для приготовления мазка стерильной бактериологической петлей берут содержимое пробирки со дна пробирки. Окрашивают по Граму. Клостридии представляют крупные Грам (+) палочки с непрокрашенными терминальными или субтерминальными спорами.
Клостридии Грам (+)
Работа № 7: Схема выделения чистой культуры анаэробов.
I этап. Изучение исследуемого материала: а) микроскопия, б) посев в 5 пробирок со средой Китта-Тароцци (сразу после ее прогревания на водяной бане при t 80 0С 15-20 мин и быстрым охлаждением).
II этап. Изучение культуральных свойств (характер изменения среды Китта-Тароцци) и получение изолированных колоний по методу Вейнберга (разведения в расплавленном сахарном агаре с последующим помещением в трубки Вейон-Виньяля) -
.
или по методу Цейсслера (посев с разобщением на глюкозо –
кровяной агар)
III этап. Изучение колоний. Отсев на среду Китта-Тароцци для накопления чистой культуры.
IV этап. Изучение чистой культуры
а) морфологические и тинкториальные свойства - мазок в окраске по Граму, Гинсу, Ожешко;
б) биохимические – «пестрый» ряд, посев в молоко, на среду Вильсона-Блера и др.,
в) антигенные и токсигенные свойства - на лабораторных животных.
V этап. Учет результатов Заключение о виде.
Работа № 8: Изучение чистой культуры, выделенной самостоятельно при проведении уирс
1. Культуральные свойства:
2. Морфологические и тинкториальные свойства в окраске по Граму:
___________________
Грам ( )
Подпись преподавателя_____________________
Вопросы для самоконтроля:
Факторы агрессии.
Ферменты, зависящие от субстрата в среде.
Классификация ферментов по направленности действия.
Использование ферментов микробов.
Среды для выявления факторов патогенности.
Состав и назначение среды ЖСА.
Методы получения изолированных колоний анаэробов.
Принципы создания анаэробных условий в среде Китта-Тороцци.
Что такое брожение?
Способ получения энергии у облигатных анаэробов.
Методы создания анаэробных условий.
Жидкие среды для культивирования анаэробов.
Среда Вильсона-Блера.
Химические методы создания анаэробных условий.
На каких средах получают изолированные колонии анаэробов?
Как создаются анаэробные условия в микроанаэростате?
Конечные продукты расщепления белков.
Как выявляют образование сероводорода, индола, аммиака?
Реактивы на выявление сероводорода, индола, аммиака.
Среды для изучения сахаролитических свойств бактерий.
Среды, содержащие лактозу.
Как выглядят лак (+) колонии на среде Эндо, Левина, Плоскирева?
Конечные продукты расщепления углеводов.
Состав и назначение среды Раппопорта.
Дифференцирующий компонент среды Раппопорта.
Среды для изучения протеолитических свойств.
Свойства облигатных анаэробов.
Биологические методы создания анаэробных условий.
II этап выделения чистой культуры анаэробов.
Среды для выращивания анаэробов (жидкие и плотные).
Химические методы создания анаэробных условий.
Назначение и принцип работы трубок Вейон-Виньяля.
Какие бактерии могут существовать без кислорода?
Среды для выращивания анаэробов.
Как создаются анаэробные условия в эксикаторе?
Состав и применение кровяного агара.
III этап выделения чистой культуры анаэробов.
Состав и назначение среды Цейсслера.
Как создаются анаэробные условия в методе Фортнера.
Принципы создания анаэробных условий в среде Китта-Тороцци.