3.Цель самоподготовки:

Необходимо проработать следующие вопросы:

1.Определение фермента диастазы.

2.Основные качественные показатели меда.

4.Исходный уровень знаний:

• содержание глюкозы, сахарозы, фруктозы в меде

• белковые вещества, кислоты, минеральные вещества, содержащиеся в меде

• диастазное число

5.План изучения темы:

1.Коррекция знаний и умений студентов.

2.Подготовка к лабораторной работе.

3.Выполнение лабораторной работы.

4.Подсчет диастазного числа.

5.Оформление результатов и защита лабораторной работы

6. Основная литература:

1. Н. П. Елинов. Основы биотехнологии. – С.-Петербург, 1995. – 600 с.

2. Г. А. Строев. Биологическая химия. – М.: Высшая школа, 1986. – 480 с.

7. Вопросы для самоконтроля.

1. Перечислите химические вещества, входящие в состав меда.

2. Требования к меду высокого качества.

3. Гигроскопичность меда.

4. Диастазное число.

8. Контрольные задания:

1.Какие сахара входят в состав меда.

2.Формула для подсчета диастазного числа.

3.Перечислите белковые вещества, кислоты, минеральные вещества, содержащиеся в меде

9. План выполнения лабораторной работы:

1.Подготовка оборудования к выполнению лабораторной работы.

2.Определение фермента диастазы.

3.Подсчет диастазного числа.

10. Методика определения:

Используемое оборудование

• водяная баня

• 9 пробирок

• нормальный раствор NaCl (0,58 г NaCl на 100 мл воды)

• 1% раствор крахмала

• раствор КI.

СХЕМА ООД

Последовательность действий	Способ выполнения действий и контроль
1. Приготовление исходного раствора	Приготовить раствор, содержащий в 1 мл воды 0,1 г меда.
2.Определение диастазного числа.	Раствор разливают в 9 пробирок в следующих количе­ствах, мл: 1.0; 1,3; 1,7; 2,1; 2,8; 3,6; 4,6; 6,0 и 7,7. Затем в каждую пробирку доливают воды до 10 мл, а после этого по 0,5 мл раствора поваренной соли и по 5 мл 1 %-ного раствора крахмала. Все пробирки тщательно взбалтывают и ста­вят в водяную баню на 1 ч при температуре 40 ±1 С. Пробирки охлаждают, до комнатной температуры и в каждую вливают по одной капле раствора КI. Из 9 пробирок выбирают одну, в которой не образовалось синей окраски. Если например, такой пробиркой окажется пятая по счету, в которой содержится 2.8 г раствора меда или 0,28 г чистого меда, то по ней определяется диастазное число. Для этого 5 (количество 1 %-ного раствора крахмала) делят на количество меда, содержащегося в пробирке, то есть на 0,28.

Лабораторная работа № 5

Тема: Выделение казеина и других белков из молока.

1.Цель работы: закрепить теоретические знания по получению белков в промышленности. Освоить метод получения казеина, альбумина и глобулина. Научиться оценивать целевой продукт.

2.Мотивация цели: данная тема позволяет расширить не только область знаний студента по предмету, но и область дальнейших профессиональных применений.

3.Цель самоподготовки.

Необходимо проработать следующие вопросы:

-область применения биотехнологии в промышленности;

-оборудование для получения казеина, альбумина и глобулина;

-ферменты, используемые для выделения казеина из молока;

-методы количественного определения казеина в полученном продукте.

4.Исходный уровень знаний.

Студент должен знать:

-основные виды белков, получаемых в промышленности;

-основные виды сырья, используемого для получения белков;

-правила использования оборудования для получения казеина;

-правила проведения титрования;

-меры безопасности при работе с используемыми реагентами;

-физические свойства белков молока.

5.План изучения темы:

1.Коррекция знаний и умений студентов.

2.Сборка лабораторного оборудования.

3.Выполнение лабораторной работы.

4.Анализ полученного продукта.

5.Оформление результатов и защита лабораторной работы.

6.Основная литература:

1.Н.П.Елинов. Основы биотехнологии. С.-Петербург.-1995.-600с.

2.У.Э.Виестур, И.А.Шмитте, А.В.Жилевич. Биотехнология. Биотехнологические агенты, технология, аппаратура. Рига.-1987.

3.С.Д.Варфоломеев, С.В. Калюжный. Биотехнология. Кинетические основы микробиологических процессов. Москва.-МГУ,1982.

7.Вопросы для самоконтроля:

1.Перечислите белки, получаемые в промышленности.

2.Перечислите сырье для получения белков.

3.Назовите фермент, используемый для выделения казеина.

8.Контрольные задания:

1.Запишите названия белков, получаемых в промышленности.

2.Зарисуйте лабораторную установку.

3.Подготовьте таблицу для занесения результатов лабораторной работы.

9.План выполнения лабораторной работы:

1.Сборка оборудования для проведения работы.

2.Выделение из молока казеина кислотой, альбумина и глобулина – нагреванием.

3.Выделение казеина из молока сычужным ферментом.

4.Количественное определение казеина в молоке формалиновым методом.

5.Оформление результатов.

10.Методика определения.

Используемые оборудование и реагенты:

-колба на 150 мл;

-бюретка;

-фарфоровая чашка;

-пипетка;

-вода;

-молоко;

-уксусная кислота:

-сычужный фермент;

-этиловый спирт;

-фенолфталеин;

-формалин;

-гидроксид натрия.

СХЕМА ООД

Последовательность действий.	Способ выполнения действий и контроль.
1. Выделение из молока казеина кислотой, альбумина и глобулина нагреванием.	В колбу на 100-150 мл пипеткой отмерить 10 мл молока и 50 мл дистиллированной воды. Содержимое колбы размешать и из бюретки прилить по каплям 5%-ную уксусную кислоту до появления заметных хлопьев казеина. Отфильтровать выпавший осадок казеина. В пробирке вскипятить 5-6 мл прозрачного фильтрата, наблюдать сначала появление мути, а затем выпадение хлопьев альбумина и глобулина.
2. Выделение казеина из молока сычужным ферментом.	В фарфоровую чашку отмерить 40-50 мл молока, нагретого до 35-40С. прилить к молоку при быстром помешивании 5 мл сычужного фермента. Молоко оставить в покое на 2-3 минуты, а затем наблюдать сгустки параказеина. Шпателем разрезать сгусток во взаимно перпендикулярных направлениях; подогреть содержимое чашки до 45С и наблюдать в местах разреза выделения сыворотки.
3. Количественное определение казеина в молоке формалиновым методом	Приготовить 1% спиртовой раствор фенолфталеина (1г фенолфталеина растворить в 70 мл этилового спирта и добавить 30 мл воды). Для приготовления нейтрализованного формалина к 50 мл 30-40% формалина добавить 0,5 мл 1% раствора фенолфталеина (спиртового) и при перемешивании оттитровать 1н раствором NaOH до слабо-розового окрашивания. В колбу на 50-100 мл отмерить пипеткой 10 мл молока. Добавить 10 капель 1% раствора спиртового фенолфталеина, все размешать и оттитровать 0,1 н раствором щелочи до слабо-розового окрашивания, не исчезающего при взбалтывании. В колбу добавить 2 мл нейтрализованного формалина, размешать. Слабо-розовое окрашивание исчезает. В бюретке отметить уровень щелочи и содержимое колбы вновь оттитровать до такого же слабо-розового окрашивания, как в первый раз, не исчезающего при перемешивании. Сделать отсчет по бюретке, показывающей 0,1 н раствора щелочи количество, пошедшей на титрование смеси в колбе, и рассчитать общее количество (содержание) общего белка и казеина в молоке. Для установления содержания общего белка количество 0,1 н раствора NaOH, пошедшее на титрование, после добавления формалина, умножить на коэффициент 1,94, а для определения содержания казеина – на коэффициент 1,51. Содержание белка и казеина выражено в %.

11. Обработка результатов эксперимента.

Заполнить таблицу:

№ пробирки	Изменение окраски	Вывод

Лабораторная работа №8