Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
микробиология колок.docx
Скачиваний:
145
Добавлен:
16.05.2015
Размер:
165.14 Кб
Скачать
  1. Молекулярно-генетические методы исследования (молекулярная гибридизация, пцр), принципы проведения, использование в санитарной микробиологии.

Метод основан на выявлении в биоматериале из внешней среды или препарата чистой культуры последовательности нуклеиновых кислот.

Молекулярная гибридизация:

Процесс, в котором одноцепочечная ПК исследуемого организма (мишень) при взаимодействии с комплементарным фрагментом ПК, включающей метку (зонд) образует двухцепочечный комплекс.

Назначение метода – выявление степени сходства различных ДНК. Применяется для идентификации микроорганизмов, особенно тех, которые трудно и медленно растут (микоплазмы, хламидии, вирусы).

Материалы для исследования – объекты окружающей среды (вода, почва).

Методы гибридизации – в растворе, на фильтре, на стекле.

Зонд – это двухцепочечные ил одноцепочечные фрагменты ДНК меченые затонной, флюорисцентной или ферментной меткой.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР):

Это способ быстрого получения множественных копий специфической последовательности ДНК бактерий, грибов, вирусов до количества, достаточного для идентификации другими методами.

Назначение – индикация микроорганизмов в объектах внешней среды, пищевых продуктов, материале от больных; идентификация микроорганизмов; генетическое типирование; выявление генов вирулентности.

Основные компоненты – исследуемая проба ДНК; смесь ДНТФ (дезоксинуклеотидтрифосфат); достраивание с помощью ДНК-полимеразы; праймеры – синтетические фрагменты ДНК; специфический буфер; минеральное масло; мембрана.

  1. Микробное загрязнение окружающей среды. Источники загрязнения, объекты загрязнения. Неблагоприятное воздействие микроорганизмов внешней среды на человека. Микробиологические аспекты охраны окружающей среды.

  1. Патогенные микробы во внешней среде. Пути попадания, условия и сроки выживания. Роль объектов внешней среды в распространении инфекционных болезней.

Микроорганизмы широко распространены в окружающей среде. Большинство из них – сапрофиты, но имеются и патогенные.

Пути неблагоприятного воздействия микроорганизмов окружающей среды на человека:

  1. Попадание патогенных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности в организм человека приводят к развитию заболеваний,

  2. Порча объектов окружающей среды, необходимых человеку (воды, продуктов, сырья, объектов) – чаще сапрофиты.

Патогенные микроорганизмы составляют очень небольшую часть мира микробов (1:30 тыс.). Основной их резервуар и источник – человек и теплокровные животные. Все патогенные микроорганизмы окружающей среды можно разделить на три группы:

  1. Патогенные МО, выделяемые человеком и передающиеся другому человеку посредством объектов внешней среды (возбудители кишечных инфекций, простейшие): ЧЕЛОВЕК-СРЕДА-ЧЕЛОВЕК.

  2. Патогенные МО животных, передаваемые человеку через загрязненные ими объекты среды (сибирская язва, лептоспироз, туляремия): ЖИВОТНЫЕ-СРЕДА-ЧЕЛОВЕК.

  3. Патогенные МО естественно обитающие во внешней среде и вызывающие заболевания при попадании в организм человека (микоза, ботулизм, синегнойная инфекция): СРЕДА-ЧЕЛОВЕК.

Сохранение патогенных МО в окружающей среде.

Условия выживания МО определяются рядом факторов (температура, рН, наличие органических, химических веществ, лучистой энергии, дезинфектантов, степенью микробного загрязнения, наличие бактериофагов и др.).

Для патогенных МО естественная среда обитания – живой организм, в котором они размножаются, накапливаются и из которого выделяются. Внешняя среда служит местом временного сохранения патогенных микроорганизмов, в которой под влиянием различных факторов они в различные сроки погибают. В процессе эволюции некоторые МО приспособились обитать во внешней среде и длительно в ней выживают, формируя споры. В некоторых условиях патогенные МО могут размножаться во внешней среде.

По длительности выживания во внешней среде патогенные МО можно разделить на 3 группы:

  1. Постоянные обитатели окружающей среды (возбудитель ботулизма, патогенные грибы),

  2. Сохраняющиеся длительное время (десятки лет) – (возбудители столбняка, газовой гангрены),

  3. Сохраняющиеся сравнительно недолго (до нескольких месяцев): энтеробактерии – 2-4 недели, бруцеллы, микобактерии – неск. месяцев, многие вирусы.

Деление МО на эти группы условно, сроки выживания зависят от условий и сильно колеблются.