5. Прямой и косвенный методы определения санитарно-эпидемиологического состояния объектов внешней среды. Достоинства и недостатки.

Практическая санитарная микробиология использует 2 основных метода оценки санитарно-эпидемического состояния внешней среды.

1. Методы прямого обнаружения возбудителя

• Являются наиболее точными и надёжными критериями оценки эпидемиологической опасности внешней среды.

• Основной недостаток методов — низкая чувствительность.

Посев на питательные среды.

Трудность выделения патогенных микроорганизмов обусловливают следующие факторы:

• 1. Сравнительно низкое содержание патогенных микроорганизмов во внешней среде, составляющих лишь 1/30 000 всего видового состава микрофлоры внешней среды. При этом патогенная микрофлора распределена во внешней среде неравномерно, что делает необходимым проведение серийных исследований в динамике определённого периода.

• 2. Выделение одного возбудителя далеко не всегда свидетельствует о присутствии других видов патогенов. Необходимо проведение разнонаправленных исследований, что сложно осуществимо. Ситуацию значительно усугубляет возрастание роли условно-патогенных микроорганизмов, способных вызвать эпидемические вспышки заболеваний.

• 3. Определённые проблемы создаёт изменчивость патогенов; последние, попадая во внешнюю среду, часто приобретают новые свойства, затрудняющие их распознавание.

• 4. На практике выделение возбудителей часто осложняют конкурентные взаимоотношения между патогенами и сапрофитами при совместном выращивании на питательных средах.

• 5. Трудность выделения возбудителя связана также с недостаточной элективностью питательных сред и необходимостью использовать лабораторных животных и культуры тканей.

2. Методы косвенной индикации возможного присутствия возбудителя во внешней среде

Используют 2 критерия, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии возбудителя во внешней среде:

• общее микробное число (ОМЧ) и

• содержание санитарно-показательных микроорганизмов (СПМ).

1. ОМЧ определяют путём подсчёта всех микроорганизмов в 1 г или 1 мл субстрата; используя этот критерий, обычно исходят из предположения, что чем больше объект загрязнён органическими веществами, тем выше ОМЧ и тем вероятнее присутствие патогенов. Однако это не всегда так, т.к. ОМЧ может быть большим за счёт сапрофитов, а патогены могут отсутствовать, либо преобладание сапрофитов значительно укорачивает сроки выживания патогенов во внешней среде. Поэтому более адекватно расценивать ОМЧ как показатель интенсивности загрязнения внешней среды органическими веществами.

2. Санитарно-показательными называют микроорганизмы, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии патогенов во внешней среде. То есть при их определении исходят из предположения, что чем больше объект загрязнён выделениями человека и животных, тем больше будет санитарно-показательных микроорганизмов и тем вероятнее присутствие патогенов.

6. Косвенный метод санитарно-микробиологического анализа. Общее микробное число (ОМЧ). Количество мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (МАФАнМ). Наиболее вероятное число (НВЧ). Характеристика показателей. Методы определения. Интерпретация результатов.

Используют 2 критерия, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии возбудителя во внешней среде:

• общее микробное число (ОМЧ) и

• содержание санитарно-показательных микроорганизмов (СПМ).

1. ОМЧ определяют путём подсчёта всех микроорганизмов в 1 г или 1 мл субстрата; используя этот критерий, обычно исходят из предположения, что чем больше объект загрязнён органическими веществами, тем выше ОМЧ и тем вероятнее присутствие патогенов. Однако это не всегда так, т.к. ОМЧ может быть большим за счёт сапрофитов, а патогены могут отсутствовать, либо преобладание сапрофитов значительно укорачивает сроки выживания патогенов во внешней среде. Поэтому более адекватно расценивать ОМЧ как показатель интенсивности загрязнения внешней среды органическими веществами.

2. Санитарно-показательными называют микроорганизмы, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии патогенов во внешней среде. То есть при их определении исходят из предположения, что чем больше объект загрязнён выделениями человека и животных, тем больше будет санитарно-показательных микроорганизмов и тем вероятнее присутствие патогенов.

Как дополнительный показатель в настоящее время также используют индекс наиболее вероятного числа (НВЧ), имеющий доверительные границы, в пределах которых может колебаться истинное количество искомого микроба с 95% вероятностью. Для определения НВЧ исследования проводят 3, 5 и 10 раз; показатель определяют по специальным таблицам Хоскенса-Муре.

Определение МАФАнМ (в масле):

По 1 мл разведений масла (1:100 и 1:1000) в стерильные пустые чашки Петри, расплавленный и остуженный до 45° МПА (15-20 мл). После инкубации посевов разведений масла на чашках Петри при температуре 30° в течение 72 часов считаются колонии только в посевах тех разведений, где выросло от 15 до 300 колоний. Количество микроорганизмов в 1 мл рассчитывается по формуле: К=АВ/С, где К – КОЕ (количество микробов в 1 мл), А – количество колоний на чашке, В – объем масла, в котором хотим определить количество микроорганизмов (1 мл), С – объем посева.