23. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха. Методы забора проб (седиментационный, аспирационный, фильтрационный). Определяемые показатели.

Седиментационный метод применяется обычно для качественной характеристики микробного загрязнения. Метод основан на естественном осаждении микроорганизмов под действием силы тяжести. Метод чрезвычайно прост, но слабо чувствителен и мало достоверен. В большей степени является качественным, чем количественным и позволяет, в основном, определить лишь спектр присутствующих микроорганизмов.

Аспирационный метод – более точный метод. Забор проб воздуха проводится пробоотборными устройствами различной конструкции, которые обеспечивают отбор биологического аэрозоля с величиной частиц диаметром до 1,4 мкм. Импакторы – приборы, в которых происходит принудительное осаждение микроорганизмов из прокачиваемого через прибор воздуха на поверхность плотной питательной среды (прибор Кротова, ПАБ-1, ПАБ-2 и др.). Импинджеры – группа приборов, в которых воздух проходит через жидкость (питательную среду, стерильную воду, физиологический раствор), в результате чего микроорганизмы задерживаются в ней и могут быть обнаружены.

Фильтрационный метод. Используются мембранные фильтры из нитроцеллюлозы или ацетата целлюлозы. При отборе пробы, проходя через фильтр, воздух вызывает его электризацию, поэтому улавливание микроорганизмов происходит только в самом поверхностном слое фильтра толщиной около 0,3 мкм. Это не только обеспечивает высокую эффективность улавливания, но и позволяет элюировать (десорбировать) задержанные частицы, бактерии и вирусы для дальнейшего исследования.

24. Методы забора материала для санитарно-микробиологического анализа при исследовании поверхностей, оборудования, предметов обихода. Основные исследования микробиологические показатели. Исследование смывов на БГКП и S. Aureus.

Методы выделения микроорганизмов с предметов обихода и медицинских изделий

Метод смывов. С помощью увлажненных стерильных ватных тампонов на металлических стержнях или салфеток (5*5 см), которые заготавливаются. В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливается по 10 см³ стерильной 0,1% пептонной воды или стерильного физиологического раствора, при этом тампон остается над жидкостью, не касаясь ее. Перед взятием смыва тампон погружают в жидкость. Смывы с крупного оборудования и инвентаря, поверхностей, стен берут 100 см² с помощью шаблона, сделанного из проволоки. Смоченным ватным тампоном или марлевой салфеткой отбирают поверхность, ограниченную шаблоном, во взаимно перпендикулярных направлениях. При взятии смывов с мелких объектов отбирают всю поверхность предмета. При обследовании объектов, где невозможно применить шаблон, исследуют последнюю порцию промывных вод (около 100 см³), взятой после мойки объекта.

При взятии смывов с рук увлажненным стерильной жидкостью тампоном протирают ладонные поверхности обеих рук сначала вдоль, потом поперек, затем межпальцевые пространства, ногти и подногтевые пространства. После взятия смыва тампон вновь погружают в пробирку со стерильной жидкостью для проведения десорбции микроорганизмов.

Для определения БГКП тампоны или марлевые салфетки опускают в пробирки с 5 см³ среды Кесслера. При исследовании на стафилококки проводят посев тампоном на ЖСА и параллельно засевают 0,5 мл смывной жидкости в 6,5 % солевой бульон. При исследовании на наличие энтеробактерий и псевдомонад тампон инкубируют в 0,1 % пептонной воде с последующим высевом на среду Эндо.

Ориентировочный перечень объектов, подлежащих бактериологическому контролю в ЛПУ:

• Аппаратура для ИВЛ

• Чистые щетки для мытья рук

• Операционный стол

• Рабочий стол анестезиологов

• Наркозная аппаратура (набор реанимационной укладки)

• Кожа операционного поля

• Фартуки (клеенчатые или полиэтиленовые)

• Кровать, подготовленная для больного

• Смывы с рук всех участвующих в операции

• Полотенца для рук персонала

• Кушетка для перевязок

• Халат медицинских сестер

• Внутренняя поверхность холодильника для хранения лекарств

• и т.д.

25. Микрофлора пищевых продуктов. Пути и источники микробной контаминации пищевых продуктов. Особенности существования микробов в пищевых продуктах. Специфическая и неспецифическая микрофлора пищевых продуктов.

Пищевые продукты относятся к числу важнейших объектов, загрязнение которых патогенными микроорганизмами или обильное обсеменение условно-патогенными может нанести существенный ущерб здоровью человека.

С санитарной точки зрения продукты обладают двумя важными особенностями:

1. Значительная часть продуктов является благоприятной средой для сохранения и размножения патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (сальмонеллы, шигеллы, стафилококки….) и могут быть факторами передачи большой группы инфекций.

2. Пищевые продукты, как и все объекты внешней среды, часто содержат обильную сапрофитную микрофлору, которая может существенно ухудшать качество продуктов.

В пищевых продуктах различают специфическую и неспецифическую микрофлору:

1. Специфическая или производственная флора – стандартные микроорагнизмы, которые вносят в процессе приготовления того или иного продукта, это обязательное звено технологического процесса при изготовления хлеба, пива, вина, кисломолочных продуктов.

Для получения простокваши, кумыса, йогурта, творога используется Streptococcus lactis (Грам+ диплококк), Streptococcus cremoris (цепочки кокков), кефира – специальная закваска – кефирные зерна (молочнокислые стрептококки, лактобактерии, дрожжеподобные грибы), в бифидокефире – бифидобактерии. В ацидофилине – Lactobacterium bulgaricus и L. acidophilus. В твердых сырах молочнокислые палочки, кокки, грибы (плесневые – пенициллум, рокфорум).

2. Неспецифическая - случайные МО из окружающей среды – сапрофиты, ОПМ, УПМ. Многие пищевые продукты характеризуются обильной аэробной и анаэробной сапрофитной микрофлорой.

Степень загрязнения посторонней микрофлорой зависит от многих факторов:

• Способа получения,

• Условий транспортировки,

• Условий хранения,

• Условий технологической обработки,

• Соблюдения санитарного режима.

Загрязнение продуктов патогенной и условно-патогенной микрофлорой происходит из различных источников. Так, контаминация продуктов животного происхождения может быть эндогенной (ОПМ – если животное больно или носитель – сальмонеллез, туберкулез, стафилококковые инфекции…), УПМ – транслокация МО из кишечника при транспортировке на мясокомбинат голодных животных ( в холоде, при длительном ожидании). Но чаще экзогенное – при убое, при разделке туш, из оборудования мясокомбината, одежды и рук рабочих, при транспортировке.

Вторичное загрязнение мясных, рыбных и молочных продуктов, полуфабрикатов патогенными микроорганизмами может происходить на различных этапах транспортировки, переработки через выделения больных, бактерионосителей, при использовании загрязненных воды, посуды, оборудования.

Многие патогенные микроорганизмы способны длительное время (дни-месяцы) сохраняться в пищевых продуктах и при благоприятных условиях могут размножаться (сальмонеллы, шигеллы, клостридии, стафилококки в консервированных продуктах).

В связи с этим с пищевыми продуктами алиментарным путем могут передаваться многие возбудители кишечных инфекций (брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезу, дизентерия, эшерихиозы, холера), бруцеллеза, сальмонеллеза, сибирской язвы, ботулизма. После употребления пищевых продуктов, массивного обсеменения

26. Система сертификации пищевых продуктов. Группы микроорганизмов, по которым осуществляется нормирование микробиологических показателей качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов.

Сертификация - форма осуществляемого органом по сертификации подтверждения соответствия объектов требованиям технических регламентов, положениям стандартов; действие третьей стороны, доказывающее, что обеспечивается необходимая уверенность в том, что идентифицированная продукция, процесс или услуга соответствует конкретному нормативному документу.

Сертификация продукции - деятельность по подтверждению соответствия продукции установленным требованиям. Сертификация - заключается в прохождении процедуры получения сертификата соответствия исходя из идентификации продукции, т.е. установление тождественности характеристик продукции её существенным признакам.

Сертификаи соответсвия : обязательный сертификат, сертификаты Таможенного союза, сертификат соответствия техрегламента, свидетельство о гигиенической регистрации

Сертификат качества – нерегулируемое государством свидетельство о соответствии продукции характеристикам, которые удовлетворяют потребителей. Сертификат качества к обязательной сертификации отношения не имеет,

государственное регулирование или техническое регулирование касается только требований безопасности.

• В Республике Беларусь микробиологические показатели безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов регламентированы:

• СанНПиГН «Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов», утв. Постановлением МЗ РБ 09 июня 2009г., №63;

• Стандартами и техническими условиями на группу (вид) продуктов.

Гигиенические нормативы по микробиологическим показателям включают следующие группы микроорганизмов:

• 1. Санитарно – показательные (СПМ), к которым относятся: мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы (КМАФАнМ) и бактерии группы кишечных палочек (колиформы);

• 2. Условно-патогенные микроорганизмы- E coli, S aureus, бактерии рода Proteus, B. cereus и сульфитредуцирующие клостридии;

• 3. Патогенные микроорганизмы, в том числе Salmonella, Listeria monocytoges;

• 4. Микроорганизмы порчи – дрожжи и плесневые грибы;

• 5.Пробиотические микроорганизмы (молочно-кислые, бифидобактерии);

Нормирование микробиологических показателей качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов осуществляется для большинства групп микроорганизмов по альтернативному принципу т.е. нормируется масса (объем), в которой не допускаются

-бактерии группы кишечных палочек,

-большинство условно-патогенных микроорганизмов,

-патогенные микроорганизмы, в том числе Salmonella и Listeria monocytoges.

В других случаях (КМАФАнМ, количество плесеней и дрожжей, пробиотических микроорганизмов) норматив отражает количество колониеобразующих единиц в 1г (см³) пробы (КОЕ/г, см³).

Распределение продуктов по степеням микробиологическим рисков в зависимости от рН продукта:

Высокая степень риска

• рН 7: Сырое мясо и домашняя птица, яичный желток, обработанный паром рис и др.

• рН 6: Кукуруза, картофель и др.

• рН 5: Бобы и др.

Умеренная степень риска:

• рН 4: Апельсины, виноград и др.

• рН 3: Яблоки, сливы и др.

• рН 2: Лимоны и др.

По предложению экспертных групп Кодекс Алиментариус (структурная единица при FAO/ВОЗ), различают 6 категорий пищевых продуктов (приведены в порядке снижения степени риска):

1.  Охлажденное и замороженное мясо, птица, рыба, мясные продукты, молоко и молочные продукты, яичные сухие продукты, моллюски, и крабы, кокосовые орехи  2.   Пищевой лед, злаковые продукты, готовые к употреблению шоколад и какао-продукты   3.  Сухие супы, сухофрукты, мороженая и копченая рыба, быстрозамороженные овощи, сыр  4.  Быстрозамороженные фрукты и соки.    5.  Продукты, подвергнутые термической стерилизации  6.  Пищевые и технологические добавки: красители, ароматизаторы, желатин, специи, сахар, крахмал и др.