- •Санитарная микробиология. Определение, задачи. Объекты санитарно-микробиологического исследования. Связь санитарной микробиологии с инфекционной микробиологией, гигиеной, эпидемиологией.
- •Цели и этапы санитарно-микробиологического исследования. Плановый санитарно-микробиологический контроль и обследований по эпидемиологическим показаниям. Нормативно-методические документы.
- •Принципы и методы санитарной микробиологии. Этапы и варианты бактериологического метода количественного определения микроорганизмов в объектах внешней среды.
- •Методы культивирования микроорганизмов (глубинный метод посева в плотные среды, поверхностный метод посева на плотные среды метод мембранных фильтров, метод посева на жидкие среды)
- •Прямой и косвенный методы определения санитарно-эпидемиологического состояния объектов внешней среды. Достоинства и недостатки.
- •Молекулярно-генетические методы исследования (молекулярная гибридизация, пцр), принципы проведения, использование в санитарной микробиологии.
- •Патогенные микробы во внешней среде. Пути попадания, условия и сроки выживания. Роль объектов внешней среды в распространении инфекционных болезней.
- •Санитарно-показательные микроорганизмы. Определение. Требования, предъявляемые к санитарно-показательным микроорганизмам.
- •Санитарно-показательные микроорганизмы – индикаторы фекального загрязнения.
- •Санитарно-показательные микроорганизмы – индикаторы аэрозольного загрязнения.
- •Вода как фактор передачи возбудителей инфекционных болезней. Основные виды патогенных микроорганизмов, передаваемых с водой. Факторы и сроки выживания патогенных микроорганизмов в воде
- •Санитарно-микробиологические показатели, определяемые при исследовании воды различных водных источников. Характеристика показателей и их нормативы.
- •Методы отбора проб воды для санитарно-микробиологического анализа (питьевая вода централизованного водоснабжения, открытые водоемы и др.).
- •Санитарно-микробиологическое исследование почвы. Подготовка и обработка почвы для анализа. Показатели краткого и полного санитарно-микробиологического анализа почвы.
- •Санитарная микробиология воздуха. Микрофлора воздушной среды (атмосферный воздух, воздух закрытых помещений).
- •Санитарно-микробиологическое исследование воздуха. Методы забора проб (седиментационный, аспирационный, фильтрационный). Определяемые показатели.
- •Пищевые продукты как факторы передачи инфекций и инвазий. Патогенные микроорганизмы в пищевых продуктах, пути попадания, факторы и сроки выживания.
- •Санитарная микробиология мяса. Экзогенный и эндогенный пути обсеменения мяса животных микроорганизмами. Мясо и мясные продукты как фактор передачи инфекционных заболеваний.
- •Санитарно-микробиологическое исследование мяса и мясных продуктов. Микробиологические показатели, контролируемые при плановом санитарно-микробиологическом исследовании мяса и мясных продуктов.
- •Санитарная микробиология молока. Эндогенная и экзогенная контаминация молока микроорганизмами. Смена микробных фаз при хранении молока. Молоко как фактор передачи инфекционных заболеваний.
- •Санитарно-микробиологическое исследование консервов. Исследование полных консервов на промышленную стерильность. Микробиологические нормативы качества и безопасности консервов.
- •Пастеризация пищевых продуктов. Цели пастеризации, используемые температурные режимы. Ультрапастеризация. Механизм микробоцидного действия при проведении пастеризации.
- •Вирусы в объектах внешней среды. Механизмы, факторы и пути передачи. Сроки и условия сохранения вирусов в воде, почве, пищевых продуктах на поверхностях и др.
- •Бактериальные фаги. Характеристика. Санитарно-микробиологическое значение. Определение колифагов в объектах внешней среды.
-
Методы отбора проб воды для санитарно-микробиологического анализа (питьевая вода централизованного водоснабжения, открытые водоемы и др.).
Питьевая вода.
Используются различные категории питьевой воды: родниковая, колодезная, артезианская и водопроводная.
Колодезная вода собирается из неглубоких водоносных слоев и часто содержит много МО, в т.ч. патогенных, особенно при нарушении постройки и эксплуатации колодца.
Родниковая вода чище, но может загрязняться в месте выхода на поверхность земли.
Артезианская вода содержит мало МО, может загрязняться при неправильном оборудовании скважины и погрешностях ее эксплуатации.
Наиболее высокие требования предъявляют к водопроводной воде, т.к. ее получают большинство водопотребителей.
Чаще водопроводную воду получают из открытых водоемов и поэтому подвергают предварительной очистке:
-
Добавление коагулянтов – освобождение от взвешенных частиц и микроорганизмов.
-
Фильтрация через песчано-гравийные фильтры, на которых образуется биологическая пленка, задерживающая большинство МО,
-
Обеззараживание воды добавлением хлора, озонирование и др. методы.
Питьевая вода считается хорошего качества, если общее количество бактерий в 1 мл — не более 50 колониеобразующих единиц (КОЕ); сомнительной — свыше 50 КОЕ. Количество микроорганизмов в придонном слое ила озер и рек варьирует в пределах от 100 до 400 млн клеток на 1 г.
При санитарно-микробиологическом контроле качества воды в международной лабораторной практике при массовом скрининге используют косвенные методы, позволяющие качественно оценивать степень фекального загрязнения воды, указывающую на реальный риск возникновения заболеваний.
Безопасность воды в эпидемиологическом отношении определяется ее соответствием нормативам по следующим индикаторным показателям для:
-
питьевой воды централизованного водоснабжения — термотолерантным колиформным бактериям, общим колиформным бактериям, общему микробному числу, колифагам, спорам сульфитредуцирующих клостридий;
-
питьевой воды нецентрализованного водоснабжения — числу бактерий группы кишечных палочек;
-
воды объектов питьевого, хозяйственно-бытового и рекреационного водопользования — термотолерантным колиформным бактериям, общим колиформным бактериям, колифагам, отсутствию возбудителей кишечных инфекций;
-
воды источников централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения — общим колиформным бактериям, колифагам;
-
воды бассейнов — общим колиформным бактериям, колифагам, термотолерантным колиформным бактериям, синегнойной палочке, золотистому стафилококку, отсутствию возбудителей кишечных инфекций;
— сточных вод (хозяйственно-фекальных, промышленных, смешанных, талых и ливневых) — общим колиформным бактериям, термотолерантным колиформным бактериям, колифагам, фекальным стрептококкам, патогенным микроорганизмам.
Отбор проб воды для санитарно-бактериологических исследований
Цель исследования — определение состава и свойств воды по показателям, регламентированным в нормативных документах (НД); идентификация источников загрязнения водного объекта; установление программы исследований; принятие корректирующих мер.
1) метод мембранных фильтров, при котором определенные объемы воды фильтруются через мембранный фильтр, задерживающий бактерии на своей поверхности, и выращивают посевы на дифференциальной плотной питательной среде с последующей идентификацией бактерий по культуральным и биохимическим свойствам. Для мембранной фильтрации под вакуумом используются микрофильтрационные установки с диаметром фильтрующей поверхности 35 или 47 мм и вакуумным насосом для создания разрежения 0,5—1,0 атм.;
-
титрационный метод, основанный на накоплении бактерий после посева установленного объема воды в жидкую питательную среду с последующим пересевом на дифференциальную плотную питательную среду и идентификацией бактерий по культуральным и биохимическим свойствам;
-
метод прямого обнаружения — исследование нормируемого объема воды путем прямого посева на плотные питательные среды.
Для обеспечения сопоставимости результатов необходимо всегда использовать один и тот же выбранный метод. Арбитражным методом при оценке качества питьевой воды является метод мембранной фильтрации.
-
Методы санитарно-микробиологического исследования воды централизованного водоснабжения. (см. предыдущие вопросы)
-
Санитарная микробиология почвы. Аутохтонная и аллохтонная микрофлора почвы. Факторы, влияющие на количественный и качественный состав микрофлоры почвы. Санитарно-гигиеническое значение микробиологических процессов самоочищения почвы.
Почва – главный резервуар и естественная среда обитания микроорганизмов, принимающих участие в:
-
процессах формирования и самоочищения почвы,
-
в круговороте веществ в природе (азота, углерода, серы, железа и других соединений).
Помимо, неорганических пород почва состоит и из органических соединений, образующихся в результате гибели и разложения живых существ. Разнообразные микроорганизмы почвы обитают в водных и коллоидных плёнках, обволакивающих почвенные частицы.
Качественный состав микрофлоры почвы:
-
спорообразующие бактерии,
-
актиномицеты,
-
спирохеты,
-
археобактерии,
-
простейшие,
-
сине-зелёные водоросли,
-
микоплазмы,
-
грибы
-
вирусы.
Состав микрофлоры существенно меняется в зависимости от:
-
вида почвы,
-
способов её обработки,
-
содержания органических веществ,
-
влажности,
-
климатических условий и др. причин.
В песчаных почвах преобладают аэробные организмы; в глинистых доминируют анаэробы. Микроорганизмы почвы размножаются при 25-45 С, термофильные виды — при более высокой температуре.
Количество микроорганизмов в почве
-
несколько миллиардов в 1 г.
-
Больше всего их в унавоженной почве и почве, подвергающейся обработке (пахоте и аэрации), — до 4,8-5,2 млрд.
-
меньше — в лесной почве, в песках 1,2-0,9 млрд.
-
Живая масса микроорганизмов в почве на 1 гектаре в среднем составляет около 1000 кг.
Распределение микроорганизмов в почве
-
Микроорганизмы распределены в почве неравномерно. На поверхности и в верхних слоях (толщиной 1-2 мм) их относительно мало (микробоцидное действие солнечных лучей и высушивание).
-
Наиболее многообразна и многочисленна микрофлора на глубине 10-20 см, где протекают основные биохимические процессы превращения органических веществ, обусловленные жизнедеятельностью микроорганизмов.
-
В более глубоких почвенных слоях микрофлора становится скудной.
-
Наиболее многообразен микробный пейзаж в околокорневой зоне растений, где они образуют зону интенсивного размножения и повышенной активности (ризосферная зона) отличающуюся специфичностью для каждого вида растений.
-
В почве идёт борьба микроорганизмов за источники питания, кислород и т.д.
Группы почвенных микроорганизмов
1. Первая группа включает патогенные микроорганизмы, постоянно обитающие в почве, например Clostridium botulinum. Бактерии попадают в почву с испражнениями человека и животных, и их споры сохраняются в ней неопределённо долго.
2. Вторая группа включает спорообразующие патогенные микроорганизмы, для которых почва является вторичным резервуаром. Бактерии попадают в почву с фекалиями человека и животных, прочими выделениями, а также с трупами погибших животных. При благоприятных условиях они могут размножаться и сохраняться в виде спор длительное время.
3. Третья группа включает патогенные микроорганизмы, попадающие в почву с выделениями человека и животных и сохраняющиеся в течение нескольких недель или месяцев.
В неё входят различные споронеобразующие бактерии. Основными факторами, обусловливающими быструю гибель микроорганизмов, являются неспособность к спорообразованию и антагонистические свойства микрофлоры почвы.
-
Почва как фактор передачи возбудителей инфекционных заболеваний. Основные виды патогенных микроорганизмов, попадающие в почву или постоянно находящиеся в ней. Сапронозы. Факторы и сроки выживания патогенных микроорганизмов в почве.
Патогенные микроорганизмы, обнаруживаемые в почве
Микробы, для которых почва является природным биотопом |
Микробы, попадающие в почву с выделениями человека и животных |
|
сохраняющиеся длительно |
сохраняющиеся сравнительно недолго |
|
Clostridium botulinum, возбудители кожных микозов, виды Actinomyces, некоторые возбудители микотоксикозов |
Bacillus anthracis, Clostridium tetani, виды Clostridium, вызывающие анаэробные инфекции |
Виды Salmonella, Shigella, Vibrio, Brucella, Francisella, Mycobacterium, Leptospira, Pseudomonas, энтеровирусы, вирус ящура |
Почва как фактор распространения инфекционных болезней
-
1. Возбудители длительно сохраняются и/или размножаются в почве:
-
Столбняк,
-
Раневая анаэробная инфекция,
-
Ботулизм
-
Сибирская язва
-
-
2. Почва – фактор передачи:
-
Лептоспироз,
-
Бруцеллез,
-
Пищевые токсикоинфекции (сальмонеллы, эшерихии, B. cereus и др.)
-
-
3. При загрязнении фекалиями:
-
Брюшной тиф,
-
Холера,
-
Дизентерия,
-
Эшерихиозы,
-
Энтеровирусные инфекции,
-
Геогельминтозы
-
Сохранение в почве УПМ и ОПМ
-
представители нормальной микрофлоры тела человека и животных, патогенные микроорганизмы попав в почву длительно не выживают.
-
некоторые бактерии, входящие в состав нормальной микрофлоры человека, включаются в биоценоз почвы, а отдельные виды остаются постоянными обитателями.
Микрофлора почвы:
условно подразделяется на:
-
резидентную,
-
временно присутствующую.
Для выяснения роли почвы в передаче инфекционных болезней необходимо знать возможную продолжительность сохранения и размножения патогенных бактерий в почве.
На сроки выживания патогенных бактерий в почве оказывают влияние многие факторы:
-
состав и тип почвы,
-
температура,
-
влажность,
-
воздействие атмосферных осадков,
-
степень загрязнённости,
-
характер загрязнений (преимущественно органическое, микробное или химическое загрязнение).