15 Мл раствора а переносят в колбу для гидрирования

вместимостью 50 мл, прибавляют около 0,2 г палладиевого

катализатора, перемешивают и гидрируют в течение 15 мин в приборе,

изображенном на рис. 5. <*>

--------------------------------

<*> Рис. 5. Прибор для гидрирования.

а - газометр с водородом; б - бюретка, снабженная тройным

краном; в - колба для гидрирования; г - магнитная мешалка.

(Рисунок не приводится).

При проведении гидрирования водород из газометра а забирают в

бюретку б, снабженную тройным краном и заполненную водой. Сначала

тройной кран поворачивают так, чтобы провести забор водорода из

газометра, после чего кран газометра закрывают, а тройной кран

бюретки поворачивают так, чтобы водород из бюретки поступал в

колбу для гидрирования, снабженную небольшой вводной трубкой.

Перемешивание раствора при гидрировании проводят с помощью

магнитной мешалки.

Для вытеснения воздуха из колбы через всю систему 3 раза

пропускают водород. После заполнения системы водородом колбу

закрывают пробкой, включают магнитную мешалку и ведут гидрирование

при комнатной температуре. Расход водорода на гидрирование

наблюдают по уменьшению объема водорода в бюретке.

Примечание. Проба на полноту гидрирования: 1 мл фильтрата

помещают в фарфоровую чашку и удаляют растворитель упариванием на

закрытой водяной бане. Остаток растворяют в 1 мл хлороформа,

прибавляют 5 мл раствора сурьмы хлорида; не должно появляться

синего окрашивания. В случае появления окраски гидрирование

продолжают в течение более длительного времени, прибавляя

катализатор.

По окончании гидрирования в колбу прибавляют 0,3 г силикагеля

марки КСМ или ШСМ, перемешивают и фильтруют; 3 мл фильтрата

помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора

пропанолом - 2 до метки и перемешивают (раствор Б).

3 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл,

доводят объем раствора пропанолом - 2 до метки и перемешивают

(раствор В).

Измеряют оптическую плотность раствора В на спектрофотометре

при длинах волн 300, 310, 325, 334 нм в кювете с толщиной слоя 10

мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор Б.

Содержание витамина А в ME в одной таблетке или драже

вычисляют, как описано выше, введя в формулу расчета разведение в

пропаноле - 2.

Примечания. 1. При анализе таблеток, покрытых оболочкой,

средняя масса таблетки в формуле не учитывается.

2. При анализе препаратов, не содержащих аскорбиновую кислоту,

перед омылением прибавляют к испытуемой навеске 0,1 г аскорбиновой

кислоты.

3. 1 г 100% ретинола ацетата соответствует 2907000 ME. 1 г

100% ретинола пальмитата соответствует 1817000 ME.

4. Пропанол-2 (изопропиловый спирт) (х. ч.) при измерении

поглощения должен иметь величину оптической плотности, не

превышающую 0,01 в области от 320 до 350 нм и 0,05 - от 280 до 300

нм по сравнению с водой в кювете с толщиной слоя 10 мм.

5. Очистка азота: азот газообразный (ос. ч.) пропускают

последовательно через поглотители со щелочным раствором

пирогаллола А [5 г пирогаллола А (ч. д. а.) на 100 мл 20% раствора

едкого кали], концентрированной серной кислотой, стеклянной ватой

и плавленым кальция хлоридом.

6. Приготовление палладиевого катализатора: в трехгорлую колбу

вместимостью 1,5-2 л с мешалкой помещают 840 мл воды, 100 мл

концентрированного раствора аммиака и 210 г аммония карбоната

(х. ч. или ч. д. а.).

При непрерывном перемешивании реакционную массу нагревают до

температуры 50 град. С и в течение 30 мин прибавляют раствор,

полученный растворением 52,5 г кальция карбоната (ч. д. а.) в

смеси 130 мл концентрированной кислоты хлористоводородной с 130 мл

воды. Температуру реакционной массы поддерживают от 50 до 80 град.

С. Выделившийся белый осадок отфильтровывают и тщательно промывают

водой до исчезновения запаха аммиака. После этого осадок отжимают.

В колбу с суспензией свежеосажденного кальция карбоната в 400 мл

воды прибавляют при интенсивном перемешивании горячий раствор,

полученный растворением 5 г палладия хлорида (ч. д. а. или ч.) в

смеси 12 мл концентрированной хлористоводородной кислоты с 30 мл

воды. Смесь перемешивают 10 мин, затем нагревают от 80 до 85 град.

С и при этой температуре перемешивают в течение 15 мин. Горячую

смесь насыщают водородом (марки А) в течение 6 ч. Приготовленный

катализатор промывают водой до отсутствия ионов хлора. Получают

около 43 г палладированного кальция карбоната, который сушат при

температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Хранят в

банке оранжевого стекла при комнатной температуре. Годен в течение

3 мес.

2. Определение содержания витамина А

в жирах рыб и морских млекопитающих

Около 1,5 г жира (точная навеска) помещают в колбу

вместимостью 100 мл, прибавляют 0,1 г аскорбиновой кислоты, 30 мл

свежеприготовленного 10% спиртового раствора едкого кали и

нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30

мин при температуре кипения смеси. Содержимое колбы тотчас

охлаждают, прибавляют 50 мл воды, переносят в делительную воронку

вместимостью 250 мл и трижды извлекают эфиром для наркоза: первый

раз 50 мл, второй и третий раз по 30 мл. Объединенные эфирные

извлечения промывают сначала 30 мл воды, затем 50 мл 4% раствора

едкого кали и снова водой от 30 до 40 мл до исчезновения щелочной

реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные

извлечения медленно фильтруют через бумажный фильтр с 8 г

безводного натрия сульфата в колбу для отгона. Фильтр с натрия

сульфатом 3 раза промывают эфиром по 10 мл, который фильтруют в ту

же колбу. Эфир отгоняют в токе азота на водяной бане при

температуре не выше 40 град. С. Остаток растворяют в небольшом

объеме хлороформа для наркоза и разбавляют тем же хлороформом так,

чтобы в 1 мл раствора содержалось около 30 ME витамина А; 0,4 мл

полученного раствора переносят в кювету фотоэлектроколориметра с

толщиной слоя 10 мм и быстро прибавляют 4 мл хлороформного

раствора сурьмы хлорида, содержащего 2% уксусного ангидрида.

Измеряют оптическую плотность раствора на фотоэлектроколориметре

при длине волны около 620 нм. Показание прибора отмечают не

позднее чем через 5 с после прибавления в кювету хлороформного

раствора сурьмы хлорида.

По калибровочному графику находят содержание витамина А в

международных единицах в 1 мл испытуемого раствора.

Содержание витамина А в 1 г жира в международных единицах (МЕ)

(X) вычисляют по формуле:

CV

Х = ----,

а

где С - содержание витамина А в 1 мл раствора, найденное по

калибровочному графику, в международных единицах (МЕ); V -

разведение в миллилитрах; а - навеска в граммах.

Примечания. 1. Построение калибровочного графика: около 0,1 г

(точная навеска) раствора ретинола ацетата в масле активностью