38. Методы диагностики гельминтозов

Точный диагноз на любой гельминтоз ставится комплексно. Учитывают:

• Эпизоотологические данные: тип содержания и кормления животных; благополучие местности; сезонная динамика заражения; возвратная динамика заражения; агроклиматические условия местности (температура, влажность, тип почвы)

• Клинические признаки

  • Многие гельминтозы проявляются схоже, но есть болезни со специфическими симптомами (ценуроз овец - признаки вертячки)

• Патологоанатомическое вскрытие и патизменений

  • Полное и неполное гельминтологическое вскрытие по К. И. Скрябину

    • При полном исследуют все системы органов включая головной мозг

    • При неполном вскрывают определенные органы или орган

• Лабораторная диагностика

  • Для исследования отбирают только свежий кал либо из прямой кишки, либо берут верхний слой, который не соприкасается с почвой или подстилкой

  • Каждую пробу помещают в отдельную тару

  • От частного животного - пробу этикитируют (вид животного; кличка; возраст; дата и время отбора пробы; ФИО владельца)

  • Если сельхоз предприятие - отбирается проба от не менее, чем 10% у поголовья. Составляют опись в 2-х экземплярах: 1 остается в ветеринарной службе хозяйства, 2 с сопроводительной документацией отсылают в вет лабораторию

  • Пробы кала должны быть исследованы не позднее чем 3-4 часа с момента отбора. Если это невозможно сделать, то пробы помещают в холодильник при 4 градусах - хранятся до 24 часов. Более длительное хранение проб - заморозка либо пробы заливают жидкость Барбагала (однако личинки погибают)

Лабораторные методы диагностики:

• Гельминтоскопия - обнаружение самих гельминтов или их фрагментов

• Гельмтоовоскопия - обнаружение яиц гельминтов (от лат ovum - яйцо)

  • Метод нативного мазка

    • Малоэффективный при низкой интенсивности энвазии

    • Техника проведения:

      • Небольшое количество кала (объем с горошину) помещают на предметное стекло, добавляют несколько капель воды

      • Препаровальной иглой перемешивают

      • С помощью пинцета удаляют твердые, грубые частицы

      • Накрывают покровным стеклом

      • Исследуют под малым увеличением микроскопа (х10; х7-8)

  • Метод последовательных смывов (промываний)

    • Для диагностики трематодозов

    • Основан на разностях плотностей яиц трематод и воды (яйца тяжелые -> тонут в воде)

    • Техника проведения:

      • 5-10 гр фекалий, помещают в фарфоровую ступку, добавляют немного воды и с помощью фарфорового пестика растирают

      • Добавляют еще воды в 10-кратном объеме от объема фекалий

      • Перемешивают и процеживают в чистый лабораторный стакан через металическое сито

      • Оставляют на 10-15 минут. За это время формируется осадок и надосадочная жидкость (последнюю сливают)

      • К осадку добавляют чистую воду

      • Такую процедуру выполняют столько раз, пока надрсадочная жидкость не станет чистой

      • Для исследования отбирают пробу с помощью пипетки с острым носиком со дна лабораторного стакана

      • Переносят воду на предметное стекло

  • Методы флотации

    • Для их проведения необходимы флотационные растворы - насыщенные растворы солей

    • Применяются для диагностики трематодозов, цестадозов, нематодозов

    • Основаны на разностях плотностей флотационных растворов и яиц гельминтов (яйца более высокой плотности -> выталкиваются на поверхность образуя «пленку» из яиц гельминтов)

    • Флотационный метод с насыщенным раствором поваренной соли - Метод Фюллеборна

      • Рабочая плотность раствора 1,18-1,20 кг/м3

      • Для приготовления раствора необходимо 400 гр соли на 1 л воды

    • Флотационный метод с насыщенным раствором аммиачной селитры - Метод Котельникова-Хренова

      • Рабочая плотность раствора 1,30 кг/м3.

      • 1,5 кг соли на 1 л воды

    • Флотационный метод с нитратом натрия - Метод Калантаряна

      • Рабочая плотность раствора 1,38-1,40 кг/м3

      • 1 кг соли на 1 л воды

    • Техника проведения методов:

      • 5-10 гр фекалий, помещают в фарфоровую ступку, добавляют небольшое количество насыщенного раствора соли

      • Растираем

      • Добавляем 100-200 мл раствора

      • Перемешиваем

      • Процеживаем через металическое сито в лабораторный стакан

      • Оставляем на 10-15 минут. За это время яйца всплывают на поверхность

      • С помощью проволочной петельки снимают пленку с поверхности из 3-5 разных мест, переносим на предметное стекло и микроскопируем

• Гельминтоларвоскопия - обнаружение личинок гельминтов (от лат larva - личинка)

  • Метод Бермана-Орлова

    • Фекалии отбирают только из прямой кишки, чтобы не попали в пробу личинки свободно живущих нематод

    • Применяется для диагностики стронгилоидозов ЖКТ и органов дыхания

    • Для проведения метода необходима конструкция Бермана-Орлова: штатив на который крепится стеклянная воронка, к ней - резиновая трубка с зажимом и к трубке - пробирка

    • Техника проведения:

      • 5-10 гр фекалий, заворачивают их в марлевый мешок, погружают в воронку, заливают теплой водой (35-37 градусов)

      • Оставляют 10-12 часов (КРС и лошади); 5-6 часов (МРС и мелкие домашние). В течении этого времени под действием тепла и влаги личинки выходят из фекалий, скапливаются в резиновой трубке

      • Зажим ослабевают и содержимое стекает в пробирку

      • С помощью пипетки из пробирки берут пробы

  • Упрощенная модификация метода Бермана-Орлова (по Щербовичу и Шильникову)

    • Суть метода такая же, только мешочек с фекалиями либо подвешивают над лабораторным стаканом, либо погружают на дно, заливают теплой водой и оставляют на аналогичный период времени. После мешочек с фекалиями удаляют и с помощью пипетки набирают содержимое со дна стакана

  • Экспресс-метод - Метод Вайда

    • Применяется только для МРС и кроликов (фекалии оформлены в шарик)

    • Техника проведения:

      • 1-2 шарика кала помещают в центр часового стекла, добавляют теплой воды (35 градусов)

      • Оставляют на 30-40 минут. В течение этого времени фекалии переворачивают с 1 бока на другой (для облегчения выхода личинок)