Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Каминская _ БХ слюны

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
17.05.2026
Размер:
3.62 Mб
Скачать

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

са МСО, в составе которого гем-зависимый цит. р450. Но оксид углерода СО ингибирует активность цит. р450 и снижает активность МСО, детоксикация затруднена.

7.МСО сопровождается продукцией активных форм кислорода, которые совместно с аналогичными компонентами табачного дыма увеличивают риск ПОЛ фосфолипидов мембран клеток и пероксидации белков СОПР, тканей пародонта. Формируется оксидативный стресс.

8.Обезвреживание некоторых токсических соединений с участием цит. р450 носит характер «летального синтеза», поскольку после реакций окисления их токсичность значительно увеличивается. Это относится к усилению канцерогенного действия бенз(а)пирена и других полициклических соединений.

9.Табачный дым является основным источником поступления цианидов в организм человека, содержание цианидов в организме резко увеличивается при курении. Основное токсическое действие цианидов связано с блокированием функций всех же- лезо-, медьсодежащих белков.

Метаболизм и биохимические направления действия никотина

Метаболизм никотина in vivo

Никотин — алкалоид, маслянистая жидкость с горьким вкусом, смешивается с водой, содержится в растениях семейства паслёновых (Solanaceae). При курении до 80-90% никотина переходит в табачный дым. При курении происходит адсорбция никотина в полости рта, более 90% вдыхаемого никотина поглощается легкими. Обычно печень рассматривается основным органом метаболизма, но участвовать могут и другие органы с активной системой МСО — легкие, слюнные железы. Период полураспада никотина — около 40 минут, никотин превращается в организме человека несколькими путями: главные метаболиты — N-оксид никотина и котинин (название оставлено из слова «никотин»). Котинин обладает теми же основными токсическими свойствами, как никотин, но циркулирует в крови в течение нескольких дней. Уровень котинина в крови пропорционален количеству поступившего никотина в организме курильщика, поэтому его определение является индикатором воздействия табачного дыма на организм (в т.ч. при пассивном курении). Пред-

ложен способ определения котинина в слюне.

201

Монография

Эффекты действия никотина на слюнные железы

Никотин в слюнных железах стимулирует выделение большого объема жидкой слюны с повышенным содержанием электролитов. Секреторная функция слюнных и бронхиальных желез сначала повышена, затем следует фаза угнетения.

Биохимические направления действия никотина

Действие никотина осуществляется через центральные и периферические н-никотиночувствительные холинорецепторы; увеличивает выделение кортизола, серотонина, эндорфинов, ацетилхолина, АДГ; снижает выделение СТГ, гонадотропинов; активирует гликогенолиз, липолиз, адгезию тромбоцитов, окислительный стресс, кальций-зависимые каналы и выделение адреналина.

Биохимические показатели ротовой жидкости у курящих

Болезни полости рта и курение однозначно связаны между собой. Риск развития кариеса увеличивается более, чем в 2 раза; выкуривание полпачки сигарет в день увеличивает риск возникновения пародонтита в 3 раза, а больше пачки — чуть ли не в 6 раз. В этой ситуации важно знать, какие изменения биохимического состава ротовой жидкости у курильщиков табака являются типичными.

Показатели сиалометрии

Скорость нестимулированного слюноотделения у курильщиков со стажем изменена по сравнению с некурящими. Снижение общего объема выделяемой слюны является распространенным последствием курения. Средняя скорость слюноотделения (0,21 ± 0,01) мл/мин. ниже общепринятой нормы (Вавилова Т.П., 1991). В нашем обследовании двух групп по 10 человек — курящие (стаж 3 года, численность до 15 сигарет в день, полость рта санирована) и некурящие — показатели сиалометрии (мл/мин.) у курящих — 0,28 ± 0,06, у некурящих — 0,47 ± 0,08. Аналогичные закономерности получены М. Rad et al., 2010; S. Dyasanoor et al., 2014). С другой стороны, также выявлено повышение слюноотделения, которое еще более увеличивалось после курения табака. В группе курильщиков с 15-летним стажем средняя скорость секреции составляла 0,8 мл/мин., а после курения — 1,4 мл/мин. Противоречивые данные следует рассматривать в двух направлениях. Действие компонентов табачного дыма, несомненно,

202

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

снижает функционирование слюнных желез, но повышенная концентрация высокотоксичных соединений во всех отделах полости рта вызывает защитную реакцию и компенсаторное увеличение выделения слюны. Противоположные патогенетические ответы могут иметь различную долю по отношению к объему слюны. У пациентов с большим стажем курения при увеличении общего объема слюны скорость секреции малыми слюнными железами снижена по сравнению с некурящими. Эти изменения были расценены как характерные для прогрессирующего хронического атрофического сиалоаденита.

Буферные свойства

Основным изменением буферных свойств является сдвиг рН ротовой жидкости до курения и сразу после него в кислую сторону. В эксперименте при участии 20-летних студентов — 10 некурящих (контрольная группа) и 16 курящих добровольцев (стаж курения от 2 до 4 лет) — проведен сбор и измерение рН ротовой жидкости до и после выкуривания одной сигареты (в обычном для каждого режиме). Показатели подтверждают сложившееся мнение (табл. 18.2).

Биохимический состав ротовой жидкости курящих людей

Общий белок. Не обнаружено единой тенденции в изменении содержания общего белка в ротовой жидкости. Отмечено более низкое содержание белка в ротовой жидкости у курящих: 181,5 мг % (интервал 138-210) против некурящих 306 мг % (интервал 230-372).

Таблица 18.2 Значение рН ротовой жидкости до и после курения (Каминская Л.А.)

Показатель

Курение: условия эксперимента

 

 

 

 

 

 

 

 

контрольная

 

время сбора слюны

 

группа

 

 

 

 

 

до курения

 

5 мин. после

30 мин после

 

некурящие

 

 

 

 

 

 

 

рН

6,7 ± 0,09

*7,05 ± 0,08

 

*6,7 ± 0,05

7,2 ± 0,07

 

 

 

 

 

 

Примечание: * — р <0,05.

Изменение связывают с уменьшением уровня продукции белка слюнными железами или с усилением саливации под влиянием раздражающих агентов табачного дыма, которые активируют парасимпатическую регуляцию слюноотделения. По результатам других исследователей (табл. 18.3), содержание об-

203

Монография

щего белка в ротовой жидкости курящих увеличивается по сравнению с некурящими.

Таблица 18.3 Содержание общего белка (г/л) в ротовой жидкости курящих и некурящих

Норма

Содержание белка ( г/л)

 

Автор

1,4-6,4

 

 

 

 

Некурящие

Курящие

 

(г/л)

 

 

2,72 ± 0,02

6,14 ± 0,03

Цапок П.И.,

 

 

 

 

2012

 

 

 

 

 

 

3,70 ± 0,02

небольшой стаж

большой стаж

Грачева Н.П.,

 

 

3,85 ± 0,04

7,39 ± 1,04

2011

 

 

 

 

 

Белки защиты полости рта

Происходит увеличение белков защиты полости рта, компонентов врожденного мукозального иммунитета, изменение отдельных компонентов системы комплемента, достоверное повышение муцина, белков острой фазы воспаления лизоцима, лактоферрина, церулоплазмина (табл. 18.4).

Таблица 18.4 Содержание белков защиты полости рта в ротовой жидкости

у некурящих и курящих

Показатель

Курящие

Некурящие

 

 

 

 

1

лизоцим (мкг/мл)

1,42 ± 0,09

1,01 ±0,08

 

 

 

 

2

муцин ( мг %)

76 (40-138)

46 (24-88)

 

 

 

 

2

лактоферрин ( нг/мл)

8120 (7080-9880)

2860 (1560-4680)

 

 

 

 

3

церулоплазмин (мг/л)

110,5 ± 3,9

74,3 ± 4,1

 

 

 

 

Примечание: 1 — Аль Табиб Мухаммед М.А.Г.; 2014; 2 — Колесник М.А., 2006; 3 Цапок П.И., 2012.

Оксидативный стресс при курении

В опытах in vitro табачный дым увеличивает СРО. Зарегистрировано увеличение светосуммы ХЛ в 3 раза, усиление быстрой вспышки и спонтанного свечения — в 6 раз, что соответствует активации окисления липидов. При обследовании курящих пациентов может возникнуть различная ответная реакция: более высокий или более низкий уровень хемилюминесценции по сравнению с некурящими. В нескольких исследованиях обнаружены одинаковые закономерности: после курения, независимо от исходного уровня, происходит снижение величины ХЛ до нуля, через 10-15 мин. — повышение уровня свечения.

204

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Таблица 18.5 Изменение показателей СРО ротовой жидкости после курения

(Каминская Л.А.)

Исследуемый

Время измерения

 

 

показатель

 

 

 

 

 

 

 

 

до опыта

через 5 мин.

через 30 мин.

 

 

 

 

БХЛ, кванты света

609,7 ± 60,3

427,1 ± 40,9

565.6 ± 55,8

 

 

 

 

каталаза (усл. ед.)

5,2 ±0,15

4,9 ± 0,21

5,6 ± 0,22

 

 

 

 

Через 1-1,5 часа, когда полностью развивается токсическое воздействие продуктов табачного дыма, уровень увеличивается в 2,5-3 раза. Снижение биохемилюминесценции сначала сопровождается снижением активности каталазы, в течение последующих 30 мин. активность возрастает (табл. 18.5).

Сразу после курения в слюне подавляется генерация радикалов, обладающих микробицидными свойствами. Снижение или повышение уровня СРО в полости рта у курящих в сравнении с некурящими является одинаково неблагоприятным фактором для обеспечения защиты полости рта

Кортизол в слюне курильщиков

Негативное стрессовое воздействие курения проявляется в увеличении уровня кортизола (нг/мл) в слюне: у некуящих среднее значение — 60 (40-90), а у курящих — 170 (131-194) (Колесник М.А., 2009).

Ферменты ротовой жидкости у курящих

Изменение активности ферментов полости рта также имеет различное направление (табл. 18.6). Активность амилазы значительно снижается в случае большого стажа курения, отражая неблагоприятное воздействие курения на синтетическую функцию слюнных желез, особенно околоушной. Имеется незначительная тенденция в снижении активности ЩФ, но достоверно увеличивается активность КФ, и это изменение перекрывает стабильность показателя ЩФ, который находится на нижней границе нормы (Грачева Н.В., 2011). В ротовой жидкости наблюдается повышение уровня мочевины и активности аминотрансфераз, которое характерно для многих патологических состояний. Повышение уровня мочевины способствует увеличению активности микробной уреазы, продуцирующей аммиак. Аммиак участвует в снижении возникающей при курении кислотности в полости рта.

205

Монография

Таблица 18.6 Активность аминотрансфетаз в ротовой жидкости при курении

(Цапок П.И., 2012)

Показатель

Не курят

Курят

 

 

 

АСТ (мккат/л)

0,17 ± 0,03

0,36 ± 0,05

 

 

 

АЛТ( мккат/л)

0,11 ± 0,03

0,29 ± 0,04

 

 

 

Белки иммунной системы в ротовой жидкости

Основной интерес всегда представляет sIgA. По данным его определения (табл. 18.7), курение увеличивает или снижает синтез этого белка. Претерпевают увеличение содержание ИЛ-8, IgG и огромное увеличение ФНО-а, уровень которого у курящих превышал на три порядка значение показателя в слюне у некурящих.

Таблица 18.7 Содержание иммунных белков в слюне курящих и некурящих людей

Показатель

Курящие

Некурящие

 

 

 

¹ sIgA(г/л)

0,21 ±0,03

0,53 ±0,05

 

 

 

² slgA, (мкг/мл)

315,2 (268,8-373,2)

139,4 (117,6-178)

 

 

 

² ФНО (нг/мл)

6,05 ± 0,11

0,04 ± 0,02

 

 

 

² ИЛ-8 (нг/мл)

64,71± 1,77

40,81± 2,5

 

 

 

² IgG (мкг/мл)

1,31 (0,8-1,0)

0,6 (0,4-0,9)

 

 

 

Примечание: 1 — Аль Табиб Мухаммед М.А.Г.; 2014; 2 — Колесник М.А., 2006.

Пассивное курение

Проведенное нами исследование показало возможность выявления котинина вследствие «пассивного» курения в слюне некурящих. Информированные о целях исследования некурящие добровольцы старше 18 лет в течение дня не менее 5 раз по 10-15 мин. находились в зоне воздействия табачного дыма. Проверка слюны до опыта у добровольцев выявила отрицательную реакцию на котинин, во второй пробе — наличие котинина.

206

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Биохимические показатели слюны при воздействии на организм человека экотоксикантов

Оценка неблагоприятных факторов окружающей среды, профессиональных вредностей и степень их воздействия на организм человека. Исследование экзогенной и эндогенной интоксикации. Определение микроэлементов, субстратов, ферментов слюны

Кэкологически неблагополучным зонам относятся регионы

снефте- и углеперерабатывающими, химическими, металлургическими предприятиями. Обнаружена высокая корреляция

(r) между частотой анемий в различных возрастных группах с содержанием экотоксикантов: гексана С6Н14 (r = 0,93), тетрахлоруглерода СС14 (r = 0,97), бензола С6Н6 (r = 0,96), неорганической пыли (r = 0,99). Экотоксиканты, попадающие в организм, находятся в крови, в тканях, выводятся с потом, мочой, выделяются в слюну. Содержание в слюне влияет на биохимические свойства ротовой жидкости, причем изменения могут быть более выражены по сравнению с сывороткой крови.

Сиалометрия и определение физико-химических показателей в оценке действия экзотоксикантов

Скорость секреции слюны, физико-химические свойства: величина рН, буферная емкость. Сиалометрия у работников цеха, занятых производством антибиотиков, по прошествии одного года показала, что скорость секреции (мл/мин.) изменилась в течение года от 0,97 ± 0,07 до 0,77 ± 0,102, снижение составило 20%. Изменение рН ротовой жидкости может зависеть от природы токсических факторов. У рабочих производства минеральных удобрений зафиксировано в течение смены снижение величины рН от 7,49 ± 0.04 до 5.60 ± 0.01. Отмечено возрастание кислотности смешанной слюны у рабочих, занятых в производстве хлора, именно с этим фактором авторы связывают большую частоту некариозных поражений зубов у рабочих. При определении рН слюны рабочих в цехах резино-технической промышленности, где часть добавочных материалов обладает основными (щелочными) свойствами, в начале смены рН слюны рабочих составлял 7,04 ± 0,91, а в конце рабочего дня этот показатель был равен 7,63

± 0,30. В контрольной группе людей, не работающих в этом цехе, показатель остался без изменений.

207

Монография

Содержание белка и липидов в слюне

Проведение анализа крови и ротовой жидкости у клинически здоровых детей, проживающих в промышленных районах с химически агрессивной средой, выявило, что в слюне содержание триглицеридов снижено у 25% обследованных, содержание альбумина — у 51%, а в крови наблюдается только тенденция снижения триглицеридов.

Минеральный состав

В пыли цехов на заводах цветной металлургии присутствует значительное количество микроэлементов, которые выделяются

всоставе мочи и слюны, накапливаются в тканях, волосах. Микроэлементный состав слюны начинает соответствовать составу полиметаллической пыли в производственных помещениях. Медь, марганец, ртуть, хром, железо, которые концентрируются

ворганизме, по сравнению с окружающей средой представляют наибольшую опасность (табл. 18.8).

Таблица 18.8 Микроэлементный состав полиметаллической пыли (мкг/г)

и содержание в ротовой жидкости (Яппаров Р.Н., 2007)

Микроэлементы

Содержание микроэлементов( мкг/г)

 

 

 

 

пыль

слюна

 

 

 

медь Cu

1280 ± 48,0

1100 ± 84,0

 

 

 

 

марганец Mn

0,1±

0,01

1,5± 0,1

 

 

 

 

ртуть Hg

0,01±

0,001

4,3± 0,2

 

 

 

хром Cr

0,72±0,05

3,4±0,29

 

 

 

кобальт Co

0,33±0,003

0,14± 0,01

 

 

 

цинк Zn

42,9±1,6

34,9±0,7

 

 

 

железо Fe

430± 21,9

730± 30

 

 

 

 

Вышеуказанные элементы относятся к особым остеотропным, накапливаются в составе эмали и дентина, вызывая нарушение процессов минерализации, снижают активность ферментов слюны, увеличивают риск появления зубного камня. Экскреция в слюну — способ освобождения крови от экзотоксикантов, но с участием ротовой жидкости они могут вновь включаться в повторный круг обращения в системе:

кровь—слюна—желудочно-кишечныйтракт—кровь(лимфа)—ткани.

208

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Это подтверждают результаты обследования полости рта у неработающих (102 человека) и работников Качканарского гор- но-обогатительного комбината (90 человека), подвергающихся в производственной обстановке воздействию пыли сложного минерального состава. Интенсивность поражения зубов кариесом у горняков выше, чем в группе сравнения. У жителей города, не связанных с деятельностью комбината, в возрасте 20-25 лет значения индекса КПУз равно 13 ± 2,4, у рабочих комбината — 19 ±

3.1зубов соответственно (р < 0,05).

Показатели слюны в диагностике СРО и ПОЛ при действии экзотоксикантов

Изучение активности ферментов АОЗ и продуктов ПОЛ дает возможность обнаружить ранние функциональные сдвиги в организме, предпатологические состояния. Метаболизм ксенобиотиков связан с активацией процессов МСО при участии оксигеназ семейства цит. р-450, которые принимают также участие в образовании активных форм кислорода. Увеличение активных форм кислорода сопровождается активацией ферментов АОЗ. У рабочих, занятых в производстве, использующем фенол, в ротовой жидкости наблюдалось изменение активности ферментов (СОД, каталаза, пероксидаза). Содержание МДА и олигопептидов средней молекулярной массы в ротовой жидкости у рабочих производства хлорорганических пестицидов повышено соответственно в 4,0 и 2,2 раза, по сравнению с контролем, и зависит от характера контакта и продолжительности работы. В слюне рабочих нефтехимической промышленности выявлено повышение диеновых, триеновых конъюгатов, гидроперекисей, оснований Шиффа, МДА. Интенсивность спонтанного свечения слюны возрастает в 4 раза по сравнению с контролем. Активность ферментов АОЗ возрастает на 130-150%.

Изменение активности факторов защиты полости рта

В образцах слюны рабочих газоперерабатывающего завода проведен анализ (ИФА) содержания лактоферрина, который увеличивается пропорционально возрасту и стажу работы (контакту с вредностями) и выше, чем в контрольной группе (табл. 18.9).

209

Монография

Таблица 18.9 Содержание лактоферрина (мкг/мл) в слюне у рабочих

газоперерабатывающего завода (Бойко В.И., 2014)

Обследуемые

Содержание ЛФ

Обследуемые

Содержание ЛФ

 

 

 

 

рабочие, стаж 1

18,6±10,2

возраст 20-30 лет

18,2±9,8

год

 

 

 

 

 

 

 

рабочие, стаж >5

29,8±7,2

возраст 41-60 лет

28,9±10,9

лет

 

 

 

 

 

 

 

контрольная группа 10,0±4,1

Снижение лизоцима способствует колонизации грамположительной флорой и поддержанию воспалительных изменений в слизистой полости рта. Повышение белка острой фазы воспаления ЛФ, снижение лизоцима, иммуноглобулинов в слюне у людей, имеющих дело с высокой профессиональной вредностью, свидетельствует об увеличении активности факторов разрушения полости рта. Пациенты, связанные с профессиональными вредностями, требуют пристального внимания стоматолога и проведения лабораторных обследований слюны, крови.

Обратите внимание! Изменяются все без исключения показатели слюны.

Рекомендуемая панель клинических исследований для оценки биохимических изменений слюны при действии экзотоксикантов

Биохимические клинико-лабораторные исследования ротовой жидкости для определения состояния полости рта при экотоксических воздействиях.

физико-химические

сиалометрия, рН, буферная емкость,

 

 

низкомолекулярные вещества

глюкоза, холестерин, молекулы средней

 

массы, диеновые конъюгаты, МДА,

 

 

электролиты

кальций, магний, фосфат, цинк, хлориды,

 

 

белки

общий белок, глутатион, церулоплазмин,

 

 

ферменты

амилаза, КФ, ЩФ, фосфолипаза А2, СОД,

 

каталаза и других ферменты АОЗ,

 

 

Иммунологические показатели:

интерлейкины, белки системы комплемента

 

 

210