Каминская _ БХ слюны

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Аминокислоты замедляют процесс кристаллизации, возможно, за счет адгезии на поверхности растущего кристалла и комплексообразования. Белок может действовать как стабилизатор мицеллы («белковая защита») и снижает скорость образования кристалла с участием «защищенных» ионов.

Скорость реминерализации эмали

Для оценки используют значения КОСРЭ-теста (Рединова Т.Л., Леонтьев В.К., Овруцкий Г.Д., 1982). Общий подход к выбору состава зубных паст различного назначения проанализирован в таблице 11.7.

Таблица 11.7 Состав лечебно-профилактических паст различного назначения

Для выбора целенаправленного применения зубных паст, оценки клинического эффекта действия можно рекомендовать комплекс стандартных биохимических исследований (табл. 11.8).

121

Монография

Таблица 11.8 Диагностические биохимические лабораторные панели

для изучения действия зубных паст

122

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Глава 12. Биохимические исследования слюны

при заболеваниях пародонта

В учении важно быть сосредоточенным… Хун Цзычен (XVI-XVII век)

1.Факторы в этиологии и патогенезе заболеваний пародонта.

2.Механизмы биохимических изменений в тканях пародонта и слюне.

3.Изменение биохимических процессов в костной ткани пародонта.

4.Определение при пародонтите в биологических жидкостях организма метаболитов и продуктов обмена соединительной ткани.

5.Маркеры ремоделирования костной ткани пародонта в слюне.

6.Особенности биохимических процессов в соединительной ткани при пародонтите.

Факторы в этиологии и патогенезе заболеваний пародонта

Пародонт (древне-греч. παρα- — около, ὀδούς — зуб) — сложный морфофункциональный комплекс тканей, окружающих и удерживающих зуб в альвеоле. Объединяет анатомо-морфоло- гические структуры, имеющие генетическую и функциональную общность: десна с надкостницей, периодонт, кость альвеолы и ткани зуба. Функции пародонта: опорно-удерживающая, амортизирующая, трофическая, пластическая, барьерная, рефлекторная регуляция. Воспалительное заболевание тканей пародонта, характеризующееся прогрессирующим разрушением нормальной структуры альвеолярного отростка челюсти, носит название «пародонтит». Выделяют множество факторов развития пародонтита, которые в значительной степени усиливают действие друг друга. Бактериальная агрессия является одним из инициирующих факторов в развитии заболеваний пародонта, вызывает различные формы поражения пародонтального комплекса (Гаража H.H., 2006). Предложены два основных механизма развития патологических процессов в пародонте: а) влияние микробиоты

123

Монография

биотопа полости рта и ее продуктов; б) влияние медиаторов воспаления. Одновременно выделяют роль генетических, средовых факторов и наличие полиморбидной патологии.

Механизмы биохимических изменений в тканях пародонта и слюне (ротовой жидкости)

При пародонтите соединительная ткань десны содержит значительное количество лимфоплазмоцеллюлярного инфильтрата, что свидетельствует об иммунологической перестройке тканей. Наблюдается накопление в строме десны комплексов анти- ген—антитело, увеличение эозинофилов, числа тучных клеток. Активная дегрануляция указывает на изменения уровня метаболизма в тканях пародонта. Развивается воспаление-типовой общепатологический процесс, начинается как ответная реакция на местное повреждение (схема 14).

Воспаление

выделение цитокинов

ИЛ-8 ИЛ-6 ФНО-а

неакт проММП активная ММП

гидролиз белков матрикса соединительной ткани

Схема 14. Выделение цитокинов и изменение активности ферментов при развитии воспаления в тканях пародонта

Особая роль в развитии патохимических изменений принадлежит процессам СРО (схема 15). Накопление продуктов ПОЛ в клетках и структурах соединительной ткани вызывает серьезные изменения метаболизма. Развиваются патохимические процессы, приводящие к разрушению пародонта (схема 14.3).

активация анаэробных процессов увеличение СРО

нарастание кислотности среды

124

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

увеличение активности протеолитических ферментов группы ММП

увеличение продуктов ПОЛ

ингибирование синтеза коллагена в тканях пародонта

Схема 15. Изменения метаболизма в тканях пародонта в процесс СРО

(источник: http://meduniver.com/Medical/stomatologia/588.html MedUniver)

Клетки и межклеточный матрикс соединительной ткани отличаются низким содержанием ферментов АОЗ, водорастворимых и липидных антиоксидантов, вследствие этого возникает низкая устойчивость к избытку продуктов ПОЛ. Присутствует высокая степень готовности к СРО уже при развитии ХГП легкой степени тяжести: показатели максимума вспышки и площади хемилюминесценции возрастают на 36-40%; при тяжелом течении достигают 180-200% от значений контрольной группы (Севостьянов И.А., 2017). При ХГП в начальный период увеличивается активность ферментного звена АОС смешанной слюны. Наиболее выраженный рост активности отмечался для ГР на 24%, при дальнейшем прогрессировании заболевания снижаются активности каталазы, СОД, ГПО на 37-53% (Виниченко Е.Л., 2017). Последовательность развития патохимических процессов в тканях пародонта при активации СРО и ПОЛ представлена на схеме 16.

Внешние и внутренние факторы активация СРО и ПОЛ в тканях пародонта

увеличение продуктов ПОЛ ингибирование синтеза коллагена снижение антиагрегационной способности тканей пародонта образование лейкоцитарно-тромбоцитарных агрегатов

125

Монография

блокирование микроциркуляторного русла гипоксия тканей развитие отека

развитие местного ацидоза блокирование остеобластов активация остеокластов

разрушение пародонта протеолиз матрикса, остеолиз

Схема 16. Последовательность развития патохимических процессов в тканях пародонта при активации СРО и ПОЛ

Костная ткань

Резорбция костной ткани происходит с участием остеокластов и мононуклеарных клеток типа макрофагов. Изменяется направление процесса ремоделирования костной ткани: функция остеобластов снижается, остеокластов активируется, они выделяют ферменты гидролиза органической части костного матрикса. Активируются КФ, карбоангидраза, ЛДГ, которые создают локальное повышение кислотности, способствующее растворению минерального компонента костной ткани. Из костной ткани межзубных перегородок вымывается кальций, нарушается структура коллагена — основного белка матрикса соединительной ткани. С возрастом всё это приводит к неполноценной костной составляющей пародонта и редукции челюстных костей.

Изменение биохимических процессов в тканях пародонта

Биохимические изменения в соединительной ткани пародонта при пародонтите. Изменение активности протеолитических ферментов, разрушающих белки соединительной ткани

Одновременно с резорбцией минеральной части пародонта происходит разрушение матрикса — белков и протеогликанов. Деструкция соединительной ткани пародонта начинается с деградации ПГ, которые характеризуются высокой метаболической активностью и присутствуют в составе межклеточного вещества многослойного плоского эпителия десны, предотвращают проникновение инфекции и токсинов в подлежащую ткань. Акти-

126

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

вируются коллагеназа, матриксные металлопротеиназы (ММП), трипсиноподобные и другие протеолитические ферменты. Доказательством деструкции в тканях пародонта является увеличение в несколько раз в крови и слюне уровня сиаловых кислот, источником которых являются деполимеризованные гликопротеины межклеточного матрикса. Гидролиз коллагена происходит под влиянием фермента коллагеназы. У пациентов с интактным пародонтом коллагеназная активность в десневой жидкости отсутствует, но по мере развития заболевания пародонта (гингивит → пародонтит) происходит увеличение активности этого фермента (табл. 12.1). При пародонтитах выявлено наличие прямой корреляционной связи между активностью эластазы и содержанием ГАГ в ротовой жидкости.

Таблица 12.1 Коллагеназная активность в смешанной слюне взрослых здоровых

и больных с воспалением тканей пародонта (Езикин Т.И., 1991)

Исследование биохимического состава ротовой жидкости для оценки тяжести заболеваний пародонта

Биохимические исследования ротовой жидкости при пародонтите проводят во многих направлениях, охватывающих оценку метаболических процессов в тканях пародонта, состояние внеклеточного матрикса (белки, минеральные вещества, протеогликаны).

Определение метаболитов и продуктов обмена соединительной ткани

Аминокислоты белков соединительной ткани

В первую очередь, касается определения оксипролина (гидроксипролина). Только для белков соединительной ткани, особенно коллагена, специфично присутствие гидроксипролина, который

127

Биохимические исследования слюны в клинической стоматологии

Маркеры воспаления в слюне при пародонтите

Диагностическим биохимическим тестом, указывающим на тяжесть пародонтита, может быть определение уровня цитокинов. Большинство клеток пародонта, фибробластов тканей десны секретируют простагландины, ИЛ-1-альфа, ИЛ-1-бета, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а, гамма-интерферон. Увеличение цитокинов воспаления у людей с тяжелой формой пародонтита достоверное. Низкое значение соотношения ИЛ-1β / ИЛ-4, равное величине 8,44 ± 0,12, свидетельствует о том, что система цитокинов находится в равновесии.

В таблице 12.2 представлен цитокиновый профиль лиц с интактным пародонтом.

Таблица 12.2 Цитокиновый профиль десневой жидкости у взрослых с интактным

пародонтом в различных регионах (Патрушева М.С., 2013)

Предложен алгоритм определения цитокинов при пародонтите (Вавилова Т.П., 2014). Установлена тесная связь между тяжестью заболевания пародонта и содержанием С-реактивного белка в ротовой жидкости и в сыворотке крови. При воспалении возникают ответные реакции со стороны организма: формируется трипсинемия, которая является универсальной реакцией организма на экстремальные воздействия. Одно из ведущих направлений в развитии воспалительного процесса заключается в активации металлопротеиназ.

Матриксные металлопротеиназы (ММП)

Эти ферменты способны разрушать различные компоненты соединительной ткани суставного хряща или базальных мембран. ММП секретируются в виде неактивного профермента. Тканевые ингибиторы ММП (ТИММП) связывают в активном

129

Монография

центре ион цинка. Многие патологические состояния сопровождаются разрушением соединительной ткани, которое происходит из-за высокой активности ММП или нарушения соотношения между ТИМП и ММП. При пародонтите обнаружено достоверное увеличение количества ТИМ в смешанной слюне (табл. 12.3).

Таблица 12.3 Содержание про-ММП 1 и ТИМП-1 в смешанной слюне

при пародонтите (Шишкин С.В., 2010)

Изменение содержания низкомолекулярных компонентов и физико-химических показателей ротовой жидкости при пародонтите

Заболевания пародонта сопровождаются изменением биохимического состава ротовой жидкости: величины рН, содержания глюкозы, мочевины, белков, электролитов. Закономерности прослеживаются в зависимости от степени тяжести заболевания.

Показатель рН. Большинство авторов считают, что нарушение КОС выражается в смещении значения рН в щелочную сторону.

Глюкоза. Уровень глюкозы повышается в зависимости от тяжести состояния; возможно, это связано с повышением проницаемости ГСБ.

Белок. Увеличивается содержание общего белка в ротовой жидкости, в том числе альбумина, его увеличение связано с повышением проницаемости ГСБ, что является значительным патогенетическим звеном воспалительного процесса в тканях пародонта. Среднее значение альбумина увеличивается в два раза до (0,74 ± 0,05) г/л.

Мочевина. При ХГП уровень мочевины в ротовой жидкости повышается до (7,33 ± 1,02) ммоль/л. Это может свидетельствовать также о повышении проницаемости ГСБ и об усилении процессов катаболизма аминокислот.

Холестерин. В норме холестерин определяется в ротовой жидкости не у всех обследуемых пациентов. Повышение уровня

130