79. Охарактеризуйте 2 вида клеточного адаптивного иммунитета: т-клеточная цитотоксичность, Th1-индуцированное воспаление. Приведите схему.

Т-клеточная цитотоксичность развивается в качестве реакции на внутриклеточные птогены, локализованные в цитозоле: бактерии, вирусы, микоплазмы. Эффекторами цитотоксического иммунного ответа являются ЦТЛ, распознающие антигенные пептиды в комплексе молекул МНС1 класса.

Стадии развития цитотоксического иммунного ответа:

1.Индуктивная

ДК после взаимодействия с патогенном под влиянием хемокинов мигрирует в лимфу. Одновременно происходит процессинг антигена и экспрессия комплекса антигенный пептид-МНС-1 на мембране ДК. Далее ДК попадают в Т-зависимые зоны региональных лимфатических узлов, где происходит их созревание. В лимфатическом узле происходит взаимодействие дендритных клеток как с наивными Т-киллерами( с комплексом антиген-МНС1 класса взаимодействует TCR и корецепторная молекула CD8 на Т-лимфоците) так и с наивными Тh0-лимфоцитами(Т-клеточный рецепторный комплекс взаимодействует с АГ, встроенным в молекулу МНС2 класса на поверхности ДК). Между ДК и Т-лимфоцитом формируется иммунологический синапс.

2.Эффекторная фаза

Цитотоксическое действие CD8+

• Перфорин-гранзимовый( некроз клеток мишеней)

• Индукция апоптоза клетки мишени

• Цитокиновый механизм

Механизм цитотоксичности Т-лимфоцитов

• Секретированный T-киллером перфорин в течение нескольких секунд полимеризуется в мембране клетки мишени с образованием поры

• Индукция апоптоза: гранзимыактивация каспаз клетки мишениактивация эндонуклеазкариорексис(фрагментация ДНК) выпочковывание апоптозных телец, окруженных мембраной распад клетки без воспалительной реакции

• Связывание FAS-рецептора с FAS-лигандом запускает процесс активации каспаз.

Th1-индуцированное воспаление

Механизмы Th1 опосредованного ответа

- презентация ДК антигена Т-лимфоцитам активация Т-лимфоцитов

- развитие Th1 в региональных лимфотических узлах

- взаимодействие Th1 с макрофагами, презентирующими АГ и активация Th1 и макрофагов синтез цитокинов

- активация макрофагов- выделение бактерицидных факторов( оксид азота, активные формы кислорода, провоспалительные цитокины) уничтожение внутриклеточного патогена.

80. Каковы механизмы эффекторной фазы клеточного иммунного ответа (цитолиз, апоптоз клетки-мишени)

Эффекторная фаза, в которой наблюдается разрушение, элимина­ция (выведение) антигена либо гуморальным, либо клеточным путем при участии активированных лимфоцитов, их продуктов, а также других клеток и механизмов неспецифической защиты, вовлекаемых лимфоцитами в специ­фический иммунный ответ: фагоцитов, системы комплемента.

Клеточный иммунитет зависит от действия цитотоксических гумо­ральных факторов, выделяемых Т-и В-киллерами. После того, как клетка-киллер получил информацию о наличии АГ, он совершает цитотоксическое действие, например, цитолиз клетки-трансплантанта или клетки-опухоли. Цитолиз может происходить как при непосредственном контакте киллера с клеткой-мишенью, так и через среду (на расстоянии). В любом случае лим­фоцит выпускает из своей цитоплазмы либо продукты активации кислорода, либо лимфотоксин, либо специфические гранулы, совершая укол клетки-мишени, причем неоднократно. В результате повреждается мембрана клетки-мишени, что приводит к осмотическому шоку и гибели. Кроме того, лимфо­циты-киллеры могут оказывать цитотоксическое действие и через секрецию лимфокинов, которые повышают чувствительность макрофагов к конкретной клетке-мишени и фагоцитируют ее.

Клеточный механизм иммунитета обеспечивает отторжение транс­плантанта, его реакцию против "хозяина", реакции против некоторых бакте­рий, вирусов, грибов, а также против опухолевых клеток.

81. Механизмы цитотоксического действия СВ8+ Т-цитотоксических лимфоцитов.

После реализации СD8+Т-лимфоцитами одной из своих важнейших функций — распознавания опухолевых антигенов, они приобретают способность осуществлять центральную эффекторную функцию — лизис клеток-мишеней. Такая способность СD8+Т-лимфоцитов впервые была описана в 1960 г. A. Govaers в опытах с гомотрансплантацией почек. Рассмотрим цитотоксическую реакцию на примере разрушения вирусинфицированных клеток . При появлении в организме вирусинфицированных клеток, CD8+ Т-лимфоциты (киллеры) распознают вирусный антиген, который представляется им совместно с молекулой ГКГ класса I на поверхности этой клетки. В свою очередь CD4+ Т-лимфоцит (хелпер) распознает вирусный антиген, который представляется ему с молекулой ГКГ класса II антигенпредставляющей клетки (АПК), например макрофага. Одновременно макрофаг продуцирует ИЛ-1, что запускает интерлейкиновый каскад. Хелперный Т-лимфоцит секретирует ИЛ-2, который позволяет предшественнику CD8+ цитотоксической Т-клетки пролиферировать, что приводит к обра¬зованию клона вирусоспецифических клеток-киллеров. В последующем эти цитотоксические Т-клетки разрушают вирусинфицированные клетки. Одновременно с клеточным ответом на вирус развивается и гуморальный ответ, заканчивающийся продукцией специфических антител. Здесь также очень важна роль CD4+ клеток (хелперов). Более подробно об этом будет сказано ниже.

Механизм цитолитического действия Т-лимфоцитов-киллеров в настоящее время представляется следующим образом: на первом этапе (программирования лизиса) между клеткой-эффектором

(киллером) и клеткой-мишенью устанавливается специфический контакт; на втором этапе (летального удара) клетки-киллеры оказывают литическое действие на клетки-мишени; на третьем (заключительном) этапе осуществляется непосредственное повреждение клеток-мишеней. В цитотоксической реакции разрушаются только клетки-мишени: киллерные клетки после летального удара отделяются от клеток-мишеней. Таким образом, если быть точным, Т-киллеры только запускают цитолитическую реакцию, но не участвуют в непосредственном разрушении клеток-мишеней. Сама киллерная клетка может участвовать в последовательном разрушении нескольких клеток-мишеней, оставаясь при этом неповрежденной и функционально активной.Убитые вирусные вакцины не активируют CD8+ Т-клетки (киллеры) потому, что в этом слу-чае вирус не реплицируется в пораженной клетке, и, следовательно, вирусные эпитопы (пепти-ды) не презентируются в ассоциации с молекулами ГКГ класса I и не распознаются CD8+ клетками.

82. Каковы механизмы 2-го вида клеточного иммунитета: Th1-воспаление. T-хелперы CD4+ в зависмости от локализации антигена ( макрофаги , В-клетки и др.) трансформируются в две субпопуляции: ТН1 и ТН2. Если наивная Т-клетка распознает антиген, презентирующийсямакрофагом , то она трансформируется в ТН1-клетки воспаления . Функция таких клеток - усиление активности макрофагов, направленной на уничтожение захваченного антигена, или приведение его в иммуногенную форму. ТH1 вырабатывают гамма-ИФН, IL-2, IL-3 и ГМ-КСФ но не BSF-1, стимулируют пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов и активируют макрофаги. Полагают, что в реакции гиперчувствительности замедленного типа вовлечены TH1, но не TH2 хелперы.

Цитокины, выделяемые TH1, подавляют активность TH2, и наоборот.

83. Дайте характеристику строения и функций MHC I класса Молекулы MHC класса I (аллельные варианты HLA : HLA-A , HLA-B , HLA-С ) экспрессируются на клеточной поверхности и представляют собой гетеродимер, состоящий из одной тяжелой альфа-цепи (45 кДа), нековалентно связанной с однодоменным бета2-микроглобулином (12 кДа), который встречается также в свободной форме в сыворотке крови их называют классическимитрансплатационными антигенами .

Методами рентгеноструктурного анализа выяснена пространственная организация молекул MHC (рис. 3.6 ). Тяжелая цепь состоит из внеклеточной части (образующей три домена : альфа1-, альфа2- и альфа3-домены), трансмембранного сегмента и цитоплазматического хвостового домена. Каждый внеклеточный домен содержит примерно 90 аминокислотных остатков, и все их вместе можно отделить от клеточной поверхности путем обработки папаином.

В альфа2- и альфа3-доменах имеется по одной внутрицепочечной дисульфидной связи, замыкающей в петлю 63 и 68 аминокислотных остатков, соответственно. Домен альфа3 гомологичен по аминокислотной последовательности C-доменам иммуноглобулинов, и конформация альфа3-домена напоминает складчатую структуру доменов иммуноглобулинов . Бета2-микроглобулин (бета2-m) необходим для экспрессии всех молекул MHC класса I и имеет неизменную последовательность, но у мыши встречается в двух формах,

различающихся заменой одной аминокислоты в позиции 85. По структуре этот белок соответствует C-домену иммуноглобулинов . Бета2-микроглобулин способен также нековалентно взаимодействовать снеклассическими молекулами класса I , например, с продуктами генов CD1 . В зависимости от вида и гаплотипа внеклеточная часть тяжелых цепей MHC класса I в разной степени гликозилирована.

Трансмембранный сегмент MHC I класса состоит из 25 преимущественно гидрофобных аминокислотных остатков и пронизывает липидный бислой, вероятнее всего, в альфа-спиральной конформации.

Основное свойство молекул I класса - связывание пептидов (антигенов) и представление их в иммуногенной форме для Т-клеток - зависит от доменов альфа1 и альфа2. Эти домены имеют значительные альфа- спиральные участки, которые при взаимодействии между собой образуют удлиненную полость (щель), служащую местом связывания процессированного антигена . Образовавшийся комплекс антигена с альфа1- и альфа2-доменами и определяет егоиммуногенность и возможность взаимодействовать с антигенраспознающими рецепторами Т-клеток . К классу I относятся антигены A , антигены AB и антигены AC . Антигены класса I присутствуют на поверхности всех ядросодержащих клеток и тромбоцитов .