10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1

некоторых пар, однако, (получен значительно меньший выход

даже при наличии как комплементации, так и рекомбинации,

что, по-видимому, обусловлено взаимной интерференцией му

тантов при неразрешающей температуре. j

Важной характерной особенностью комплементации,. в противоположность рекомбинации, является то, что большая часть потомственного вируса, продуцируемого при неразрешающей температуре, все еще сохраняет исходное ts-свойство (см. табл. 23). Вместе с (Комплементацией при неразрешающей температуре имеет место я рекомбинация, но .когда 1во взаимодействие вовлекаются мутанты, дефектные в ранней стадии репликации вируса, -комплементация является необходимым условием для образования рекомби-нантов.

Комплементацию между штаммами вируса, существующими в природе, интенсивно не исследовали. Выделение неней-ротротгаого штамма Mel из мозга мыши, зараженной смесью штаммов NWS и Mel, могло бы представлять собой пример •комплементации (Fraser, 1959c).

V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис

Фенотилическое смешение происходит при любой комбинации вирусов гриппа независимо от их генетической совместимости, например между вирусами гриппа А и В (Gotlieb, Hirst, 1954) и даже между вирусами гриппа и парамяксо-вирусом (Granoff, Hirst, 1954). Во всех случаях, в которых было показано фенотипическое смешение, этот феномен наблюдался для НА*, но нет причин сомневаться в возможности фенотнпнчеакого смешения NA*. Лишь небольшое число новых данных или новая их интерпретация были добавлены к тому, что описано в разделе I. Сделаем лишь (Краткие замечания по методическим проблемам, относящимся к фенотипиче-скому смешению. Почти все потомство вируса, производимого' смешанно инфицированной клеткой, является фенотилически смешанным или испытывает двойную нейтрализацию при скрещивании, включающем два антигенно ОТЛИЧНЫХ штамма вируса. Соответственно /использование антисыворотки для целей селекции определенного серотипа убирает основную массу рекомбинантов. Желательно, чтобы добавление анти-сьгворотки было задержано до тех пор, пока все фенотипиче-ски смешанные вирусные частицы не проникнут в «летки при следующем пассаже, 'особенно когда хотят получить интенсивное выделение рекомбинантов или когда рекомбинацию изучают количественно.

Несмотря на важное значение, придававшееся в раннем перио'де исследований по генетике гетерозиготам как источникам! рекомбинантов (Hirst, Gotlieb, 1955) (раздел IA, 2с), убедительные данные об их существовании отсутствуют. Сейчас понятно, что «гетерозиготы», выявлявшиеся в то время, в большинстве случаев были смешанными агрегатами, содержащими вирусные частицы двух различных генотипов. Во-первых, 'большинство гетерозигот было, вероятно, диллоида-ми, так как они являлись 'гетерозиготными по нескольким признакам (Hirst, Gotlieb, 1955). Во-вторых, существенная часть частиц в вирусном препарате находится в виде агрегатов (Hirst, 1973; Hirst, Pons, 1973). Если гетерозигота и существует в виде, не представляющем собой смешанного агрегата, то в настоящее время этого нельзя доказать, так как нет метода, приемлемого для экспериментального разделения двух форм: одной, содержащей два различных внутренних генома, и другой, состоящей из двух внешне раздельных,, но тесно связанных между собой частиц. Либо гетерозиготы,, либо смешанные агрегаты могут быть основным источником рекомбинации при определенных экспериментальных условиях, но они, по-видимому, не ответственны за генерацию ре-комбинантов в обычных смешанных инфекциях, и доля их в смешанном урожае вируса невелика. Исследование отдельных клонов, выделенных из смешанного урожая после заражения вирусами NWS и Гонконг, о котором уже упоминалось в разделе VA, 1 (Tobita, 1971, 1972), показало, что только 3 клона из 194 давали рост двух различных генотипов при следующем пассаже. Поскольку все эти клоны непосредственно исследовали на серотил НА* и NA* методом бляшек без промежуточных пассажей, присутствие вирусов двойственного типа легко могло быть определено.