- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
1. Внутриклеточная локализация вкРнк
Было показано, что РНК, комплементарная вРНК, ассоциирована в инфицированных клетках с полисомами (Pons, 1972). Установлено (см. раздел Va, 1), что 10% внутриклеточ-
ной вирусспецифичеокой РНК, изолируемой в виде РНП, представляет собой вкРНК. Однако после фракционирования клеток было обнаружено, что большая часть вирусспецифи-ческой РНК, ассоциированной с лолиоомами, была представлена вкРНК (Pons, 1972). Недавно Etkind и Krug (1974) сообщили, что вся полиеомная РНК представляет собой вкРНК. Этот вывод не согласуется с нашими данными, поскольку в нашей работе мы вынуждены были использовать коррекцию для учета вклада РНК клетки-хозяина. Etkind м Krug (1974) провели тщательное удаление всех контамини-рующих РНК клетки. По-видимому, вирус гриппа .подобен другим вирусам, содержащим в составе своих вирионов РНК-зависимую PiHK-лолимеразу (например, вирус везикулярного стоматита), и в связи с этим способен к синтезу функциональной информационной РНК через короткое время после начала инфекционного процесса.
Другого рода экспериментальный подход позволил полу
чить данные, интерпретация (Которых может привести к за
ключению о том, что природа информационной РНК отлична
от той, о которой говорилось ранее. Эти данные крайне про
тиворечивы н в настоящее время могут рассматриваться
лишь как предварительные. Siegert и соавт. (1973) сообщили
о синтезе полипептида NP в Е. coli бесклеточной белоксинте-
зирующей системе при использовании в качестве информа
ционной РНК 'вРНК. Kingsbury и Webster (1973) получили
прямо противоположные результаты, обнаружив, что вРНК
не может выступать в качестве информационной в бесклеточ
ной системе ретикулоцитов кролика. (В то же время, по их
данным, РНК, изолированная из инфицированных клеток
(смесь вРНК и вкРНК), выступала как иРНК, и ее присутст
вие в системе приводило к синтезу М-белка. На основе этих
прямо противоположных результатов трудно выработать (ком
промиссную точку зрения, однако, учитывая предварительный
характер сообщений, до появления результатов, подтвержда
ющих тот или иной результат, можно с осторожностью пред
положить, что один из фрагментов вРНК -может выступать
в качестве информационной РНК. Данные по самогибриди
зации, полученные Etkind и Krug (1974), а также Pons
(1972), исключают наличие 'больше чем одного фрагмента
вРНК, служащего матрицей как в транскрипции, так и в
трансляции.
2. Кинетика синтеза вкРнк
Работы по изучению синтеза РНП и днРНК, описанные
ранее, показали, что синтез вкРНК начинается очень скоро
*после начала инфекции. Более объективное изучение синтеза
именно этого типа РНК может быть проведено путем иссле-
давания появления вкРНК на полисомах. Клеши метят в течение короткого интервала пульсовой меткой [3Н]-уридином в различные моменты после начала инфекции, и полисомы выделяют и анализируют .после экстракции с помощью смеси фенолхлороформ— SDS. Полученные результаты показали, что после начального периода угнетения формирования полисом клеток-хозяев синтез вкРНК непрерывно растет. Основное количество вкРНК синтезируется через 2'/г—3 ч после начала инфекции, после чего скорость ее синтеза снижается (Pons, в печати). Аналогичные данные привели Krug и Et-kind (1973), изучавшие синтез РНК :в цитоплазме и ядрах инфицированных клеток. Эти авторы показали, что синтез вкРНК заканчивается через 4 ч после начала инфекции. Таким образом, приведенные данные указывают на то, что синтез вкРНК начинается сразу же после начала инфекции и заканчивается через 4 ч. Спустя это время вновь синтезированные вирусные частицы обнаруживаются вне клетки. Природа такого «отсекающего» механизма в настоящее время неизвестна.