- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
1. Модификация вирусных гликопротеидов
Гликолротеиды НА и NA частично определяются клеткой, которая поставляет ферменты, необходимые для синтеза углеводов и для гликозилирования полипептидов, кодируемых вирусом. Следовательно, гликопротеиды вирусов из различных клеток могут различаться по электрофоретической подвижности при анализе а полиакриламидном геле и по стабильности при разных диссоциирующих условиях (Haslarh et al., 1970; Schulze, 1970). Более того, общее количество гли Еопротеидов, содержащихся в вирионах, может изменяться в зависимости от клетки-хозяина (Lazarowitz et al., 1973). Высакоочищенный .вирус, выращенныйIB аллантоисной полости, содержит антиген, присутствующий в нормальной аллантоисной жидкости (Knight, 1944). Как было показано, этот антиген клетки-хозяина является высокомолекулярным углеводом, ковалентно прикрепленным к белку, вероятно, к НА* (Harboe, 1963a, b; Haukenes et al., 1965; Laver, Webster, 1966). Недавнее сообщение предполагает присутствие хозяйского антигена клетки-хозяина также и .в NA:|: (Haheim, Hau-kenes, 1973).
2. Модификация вирусной оболочки
Поскольку оболочка .вируса гриппа и 'близких ему вирусов образуется из плазматической мембраны клетки в процессе отпочковывания, химический состав липидов и гликолипидов оболочки (а следовательно, и вирусных частиц) имеет очень близкое сходство с составом плазматической мембраны (Frommhagen et al., 1959; Klenk, Choppin, 1969, 1970). Вариации в чувствительности вирусной инфекции к фосфолипазе С основаны, по-видимому, на различиях в составе липидов. Вирус, выращенный в аллантоисной полости, -был резистентен к фосфолипазе С, тогда как вирус того же самого штамма, выращенный в культуре клеток куриного эмбриона, — высокочувствительным к ней (Simpson, Hauser, 1966). Антиген груяпы крови и антиген Форсмана, .присутствующие в вирусе, являются гликолипидами, полученными от клетки-хозяина (Rott et al., 1966; Klenk et al., 1972; Haheim, Haukenes, 1973).
3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
Степень, до которой полипептид НА расщепляется перед включением в вирионы на HAi и НА2, часто определяется клеткой-хозяином. Штаммы WSN и RI/5 при выращивании в аллантоисной полости содержат НА, расщепившийся в значительно большей степени, чем при выращивании в первичных клетках почек обезьян (Lazarowitz et al., 1973; см. гл. 3). В случае вируса Сендай расщепление одного гликопептида 'протеолитическими ферментами клетки является, по-видимому, стадией, существенной для приобретения гемолитической активности, способности вызывать слияние клеток и инфек-ционности (Homma, Ohuchi, 1973; Scheid, Choppin, 1974). Для вируса гриппа подобный 'механизм неизвестен. Но в свете того, что добавление протеолитических ферментов в культуры, зараженные вирусом гриппа, значительно способствует многоцикловому росту некоторых штаммов вируса (Came et al., 1968; Tobita, Kilbourne, 1974; Appleyard, Maber, 1974), можно предположить аналогичную ситуацию также и для вируса гриппа.
IV. ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ
Поскольку проведено большое число исследований по генетике вируса гриппа, было описано и много 'Маркеров. Некоторые являются полезными и до сих пор, но многие из них, по-видимому, будут иметь небольшую практическую ценность в (будущих исследованиях. Независимо от их полезности маркеры, часто употреблявшиеся в прошлом, будут раосмот-
рены здесь с целью выяснения, насколько это возможно, -генетической обоснованности их, исходя из сегодняшних знаний.
А. МАРКЕРЫ, ОБУСЛОВЛЕННЫЕ ФЕНОТИПОМ ВИРУСА
1. Фенотипы, относящиеся к гемагглютинину
а) Серотип. Серотип НА* является наиболее хорошо оха
рактеризованным маркером НА*. Он может быть идентифи
цирован различными иммунологическими методами: тормо
жение гемагглютинации, нейтрализация, подавление бляшек
(Jahiel, Kilbourne, 1966) или иммунодиффузия с учетом того,
что антитела к NA иногда вызывают торможение гемагглю-
тинации или нейтрализацию (см. гл. 10). Антигенные гибри
ды внутри самого НА обнаружены не были. Описанные до
сих пор антигенные гибриды, содержащие в неравных пропор
циях оба родительских антигена и выявляемые по подавле
нию гемагглютинации или то реакции нейтрализации (Apple-
. by, 1952; Hirst, Gotlieb, 1953b), были, вероятно, гибридами, которые получили НА* от одного из родительских вирусов, .a NA* — от другого.
б) Термостабильность гемагглютинирующей активности.
При рекомбинации между штаммами WSE и Mel различие
з термостабильноети было приписано НА*, поскольку она бы
ла связана с серотилом НА* (см. раздел IA, 1в). У некоторых
ts-мутантов, обладающих дефектным НА*, гемагглютинирую-
щая активность являлась весьма термолабильной (Ueda, To-
bita, Sugiura, неопубликованные данные). Однако имелись
другие случаи, когда термоетабильность отделялась от серо-
тнпа НА* в процессе рекомбинации (Simpson, Hirst, 1961;
Tumova, Pereira, 1965; McCahon, Schild, 1971), давая основа
ние предположить, что термостабильность гемагглютинирую
щей активности может определяться и некоторыми другими
вирусспецифическими структурными компонентами.
в) Стабильность гемагглютинирующей активности по от
ношению к химическим веществам или ферментам. Стабиль
ность по отношению к додецилсульфату натрия (Simpson,