Клиническое руководство по черепно-мозговой травме

36 Генная терапия

ПРИ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ПЕРСПЕКТИВЫ

Е.Г.Педаченко, В.В.Белошицкий, Н.Я.Гридина

Генная терапия — новая стратегия лечения с ис­пользованием методик переноса генетического ма­териала в клетки с лечебной целью, Генная тера­пия предполагает использование различных спо­собов доставки фрагментов нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), кодирующих определенный по­липептид, с целью экспрессии последнего в клет­ках организма — реципиента.

Протеин, запуск или усиление синтеза которо­го является целью применения генной терапии, может быть энзимом, структурным белком или выполнять другую функцию. Трансгенные протеи­ны могут быть гормонами, нейротрансмиттерами, частями цитоскелета, формировать ионные кана­лы, рецепторы. Энзимы участвуют в синтезе других белков и прочих биологически активных веществ, которые могут оставаться в клетке или секретиро-ваться экстрацеллюлярно, действовать аутокрин-ным, паракринным или эндокринным способом [5].

В 1997 году B.V. Zlocovic и M.L.J. Apuzzo [49] вы­деляли 4 основных цели применения генной тера­пии при неврологических заболеваниях: 1) Транс­гены могут быть использованы для лечения нейро-дегенеративных заболеваний, обусловленных фер­ментной недостаточностью вследствие дефекта еди­ничного гена. Генная терапия может применяться для замещения ^функционирующего гена при ре­цессивных болезнях. При мутации доминантного гена использование метода может быть направлено на выработку антител к патологическому белку либо его рецептору, а также может включать примене­ние некоторых других методик; 2) Генная терапия может способствовать восполнению функции ут­раченных нейронов при нейродегенеративных за­болеваниях, ликвидируя дефицит нейротрансмит-

теров, способствуя секреции нейротрофических факторов, рецепторов клеточной стенки, экспре-сии антиапоптозных генов; 3) Генная терапия при­меняется при лечении опухолей головного мозга. Примером может быть использование гена тими-динкиназы вируса простого герпеса (HSV-tk), ко­торый будучи интегрированным в клеточный ге­ном делает клетку чувствительной к противовирус­ному препарату ганцикловиру. Последующее назна­чение ганцикловира приводит к гибели клеток, подвергшихся трансфекции HSV-tk; 4) Изучаются различные методики применения генной терапии при цереброваскулярной патологии.

Последние несколько лет характеризуются по­вышенным интересом к исследованию возможно­стей применения генной терапии при черепно-моз­говых повреждениях, увеличением числа экспери­ментальных работ в этой области, однако К. Yang и соавторы [48] отмечают, что проблема остается далеко не изученной.

36.1. Классификация способов генной терапии

На основании данных, приведенных в литера­турных обзорах К. Yang и соавторы [47] и С. Weil и соавторы [46], выделяют следующие виды генной терапии. Прежде всего, генная терапия может быть:1) фетальной (germ line gene therapy), кото­рая предполагает перенос генов в зиготу с целью замещения генетического дефекта в последующих поколениях. Возможное клиническое применение этого метода сопряжено с целым рядом этических проблем; 2) соматической, предполагающей транс-фекцию зрелых клеток или тканей.

600

Генная терапия при черепно-мозговой травме

Основываясь на различиях клеток-мишеней, воз­можны такие разновидности метода: 1) генная те­рапия ex vivo, включающая перенос генов в клетку in vitro с последующей имплантацией в живой орга­низм модифицированных клеток, содержащих не­обходимый ген. Трансфекции в данном случае мо­гут подвергаться либо собственные клетки реци­пиента, либо чужеродные; 2) генная терапия in vivo, предполагающая введение генного материала в ткани живого организма in situ.

В зависимости от особенностей применяемого вектора (переносчика генного материала) мето­ды трансфекции делятся на две главные катего­рии: 1) с использованием вирусных векторов; 2) с использованием невирусных векторов.