Бактериологические краски

В микробиологической практике для окрашивания мазков используют ани- линовые краски. Различают основные и кислые красители.

У основных красителей ионом,придающим бактериальной клетке окраску, служит катион, у кислых - анион. Клеточные структуры бактерий, взаимодейст- вующие с красителем, заряжены преимущественно отрицательно и поэтому лучше воспринимают основные красители, к которым относятся:

• фиолетовые (генцианвиолет; кристаллический фиолетовый);

• красные (основной фуксин, сафранин);

• синие (метиленовая синь);

• зелёные (малахитовый зеленый).

Все краски представляют собой аморфные порошки или кристаллы. Анилиновые краски плохо растворяются в воде, поэтому вначале готовят на-

сыщенные спиртовые растворы красок (1:10),из которых затем получают рабочие водные растворы.

В бактериологической практике чаще применяют следующие краски:

• щелочная метиленовая синь (синька Леффлера) - применяется для простого метода окрашивания, она всегда должна находиться на столе у бактериолога;

-карболовый основной фуксин Циля - концентрированная краска, хранится долгое время; применяется при окрашивании трудно прокрашивающихся бакте- рий, таких как возбудитель туберкулеза, споры бактерий;

• разведенный фуксин (фуксин Пфейффера) –это фуксин Циля, разведенный дистиллированной водой 1:10; применяется для простого метода окрашивания или как один из компонентов окраски по Граму, краску готовят перед применением и используют в течение одного рабочего дня;

• карболовый генцианвиолет используют как основной краситель при окраске по Граму, в модификации по Синеву чаще применяют в виде кусочков фильтро- вальной бумаги, пропитанных краской и высушенных;

• раствор малахитовой зелени (1 % водный), применяемый при окраске бру- целл по Козловскому, при окраске спор.

Из насыщенных спиртовых растворов готовят спиртоводные растворы. Вод- ные растворы готовят непосредственноперед применением,т.к. они разлагаются на свету. Для усиления действия красителя к нему добавляют протравляющее веще- ство.Это либо добавление в растворы красок фенола или едкого калия,либо обра- ботка препарата перед окрашиванием слабыми растворами соляной, серной или хромовой кислот, либо прогревание препарата с нанесенной на него краской над пламенем горелки в течение нескольких секунд.

Приготовление раствора фуксина Циля (карболовый фуксин). Кристаллы основного фук- сина 5-10 г растворяют в 100 мл 96 ° этилового спирта. 10-20 мл готового насыщенного раствора соединяют со 100 мл дистиллированной воды для получения спирто-водного раствора. Добав- ляют 5 % фенола в качестве протравы.

Приготовление раствора фуксина Пфейффера. 10 мл фуксина Циля соединяют со 100 мл дистиллированной воды.

Приготовление генцианвиолета. 1 г сухого генцианвиолета растворяют в 10 мл спирта, до- бавляют дистиллированную воду. Берут листки фильтровальной бумаги 1х1 см и пропитывают ее получившимся раствором, высушивают на воздухе. При окраске его накладывают на мазок, наливают несколько капель воды и выдерживают 2-3 мин.

Приготовление раствора метиленовой синьки (синька Леффлера). 3 г краски настаивают 3-4 мес. в 100 мл 96  этилового спирта, затем 30 мл насыщенного раствора разбавляют в 100 мл дистиллированной воды, содержащей 1 мл 1 % раствора едкого калия (протрава), фильтруют.