Контрольные вопросы:

1. Зоны обсемененности воды микробами. Состав микробоценозов.

2. Патогенные микробы воды.

3. Микробное число, его определение.

4. Определение коли-титра и коли-индекса.

Тема 1.12.Санитарно-бактериологическое исследование воздуха и почвы.

Цель занятия: ознакомить студентов с правилами исследования воздуха; с правилами отбора проб почвы; изучение методов определения общего микробного числа в 1м воздуха.

Содержание:

1. Общее микробное число воздуха.

2. Седиментационный метод Коха.

3. Аспирационный метод Кротова.

4. Коли-титр почвы.

5. Перфрингенс-титр почвы.

Микробная загрязненность воздуха имеет непостоянный характер и зависит от многих факторов. Воздух помещений загрязняется во время сухой уборки, чи- хания и кашля. Скорость оседания капель зависит от диаметра аэрозоля.

Бактериальные аэрозоли делят на три фазы:

1. Крупнокапельная фаза с диаметром частиц аэрозоля более 0,1 мм; дли- тельность пребывания таких частиц в воздухе несколько секунд, капли оседают быстро.

2. Капельно-ядерная фаза, имеющая диаметр частиц 0,1 мм и менее. Частицы находятся в воздухе длительное время и рассеиваются на большие расстояния с потоками воздуха, вместе с которыми распространяются различные микроорга- низмы, в том числе и болезнетворные.

3. Фаза бактериальной пыли имеет частицы разного диаметра от 1 до 0,01 мм. Эта фаза имеет наибольшее эпизоотологическое и эпидемиологическое значе- ние, т.к. она глубоко проникает в дыхательные пути.

Выживаемость патогенных микроорганизмов, находящихся во взвешенном состоянии, зависит от биологических свойств возбудителя, а также температуры и влажности воздуха.

Микробиологическое исследование воздуха проводят для определения ко- личества МАФАнМ (общего микробного числа) и количества СПМ. Количество МАФАнМ в воздухе определяют посевом на поверхность МПА; количество СПМ

определяют посевом на кровяной агар, желточно-солевой агар. Для определения наличия спор плесеней и дрожжей используют сусло-агар или среду Сабуро, Ча- пека. Существует много методов бактериологического исследования воздуха, са- мыми доступными являются методы Коха и Кротова.

Седиментационный метод Коха(лат. sedimentum - осадок) - осаждение микробных частиц и капель аэрозоля на поверхность плотной питательной среды под действием силы тяжести.

Чашки Петри с МПА, средой Сабуро оставляют открытыми на 5-20 мин в исследуемом помещении (классе, в цехах молокозавода, мясокомбината и т.д.). Затем чашки закрывают и помещают в термостат при температуре 30 °С, если это МПА или кровяной агар, после чего культивируют в течение 48 ч; если это среда Сабуро - культивируют при температуре 25 °С в течение 4-7 суток. Затем прово- дят подсчет выросших колоний во всей чашке. После подсчета выросших колоний в чашке Петри определяют количество микроорганизмов в 1 м ³ воздуха по фор- муле Омелянского, согласно которой в чашки с питательной средой площадью 100 см² в течение 5 мин оседает столько микробных клеток, сколько их содержит- ся в 10 л воздуха:

где X - количество микробов в 1 м ³ (1000 л) воздуха; а - количество вырос- ших колоний в чашках; b - площадь чашки (80 см ²); 5 - время экспозиции по пра- вилу Омелянского; Т - время, в течение которого чашка была открыта; 10 - 10 л воздуха по правилу Омелянского; 1000 - 1 м³ воздуха; 100 - 100 см² питательной

среды.

Аспирационный метод Кротова является более точным, т.к. прибор снаб- жен микроманометром, показывающим количество(объем)литров посеянного воздуха. Аппарат Кротова (рисунок 68) - это цилиндрический прибор, внутри кото- рого имеется электромотор с центробеж- ным вентилятором. При вращении венти- лятора из исследуемого помещения воздух засасывается через узкую клиновидную щель в крышке прибора, под которой на- ходится вращающаяся платформа с чаш- кой Петри, струя воздуха ударяется о

влажную поверхность питательной среды, микроорганизмы из воздуха оседают.

Рисунок 68 - Аппарат Кротова.

Чашки с посевами помещают в термостат на 24-48 ч при температуре 30 °С. Под- счет колоний производят так же, как и при седиментационном методе. В даль- нейшем число микробов в 1 м³ воздуха определяют по формуле

где X - число микробов в 1 м ³ воздуха; а - число выросших колоний; 1000 л

- 1 м³ воздуха; b- количество посеянного воздуха.

В каждой бактериологической лаборатории имеется бокс для проведения посевов и пересевов, воздух в боксе следует проверять на бактериальную загряз- ненность не менее двух раз в неделю, к качеству воздуха в боксе предъявляются особые требования. Для проведения исследования чашки Петри с МПА и средой Сабуро оставляют открытыми в боксе на 15 мин, затем чашки со средой МПА вы- держивают в термостате 48 ч при температуре 37 °С, чашки со средой Сабуро - 96 ч при температуре 25-27 °С. Допускается наличие 5 колоний плесени в чашках.

Микробиологические нормативы санитарного состояния воздуха производственных помещений

Метод исследования	МАФАнМ, КОЕ, не более	Плесневые грибы, КОЕ, не более
Метод Коха	200 колоний за 20 мин	20 колоний за 20 мин
Метод Кротова	150 колоний в 100 л	15 колоний в 100 л

продолжение таблицы

Воздух	Количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха
	Общее Зел	енящего и гемолитического стрептококков
Летний режимы
Чистый	1500	16
Загрязненный	2500	36
Зимний режимы
Чистый	4500	36
Загрязненный	7000	124

По количеству зеленящего и гемолитического стрептококков, находящихся в 1 м³ воздуха жилых помещений, судят о степени обсеменения его носоглоточной микрофлорой человека и животных и, следовательно, косвенно о возможном на- личии в воздухе патогенных микробов.На прямое обнаружение патогенных мик- робов воздух исследуют только при специальных показаниях.