9. Дифференциально-диагностические среды, их примеры.

Дифференциал-диагностич среды — это спец смеси питат в-в, примен для опред вид принадлежности микробов и изучения их св-в. При росте бак на дифф-диаг средах протекают хим процессы, обусловленные наличием у микробной кл различных ферментов. 1 из них способны расщеплять белки, др — углеводы, 3и — вызывать р-ции окисл и восстановл. Благодаря д-вию ферментов в дифференц-диагностич среде происходят соответств изменения. Дифференц-диагностич среды можно разделить на 4 основ гр. 1. Среды, содержащие белок и выявл способность микробов расщеплять белки (протеолитич Св-ва): мясо-пептонная желатина «столбиком», свернутая лошад\бычья сыворотка, молоко, кров агар. При посеве бак проколом в мясо-пептонную желатину, «столбиком» в случае расщепления белка наблюдают разжижение среды. При посеве на среду со свернутой сывороткой расщепление белка опред по разжижению среды и образованию углублений на ее поверхн. Расщепление микробом молока выявл просветлением или растворением первоначально свернувш молока. Наличие гемолитич активности исслед культуры проверяют посевом ее в чашку Петри на специал кровяной агар. В результате разруш эритроцитов вокруг колоний (н, гемолитич стрепток или стафилоко) образуются зоны просветления. 2. Среды для выявл способн микробов расщеплять углеводы и высокоатомные спирты (Эндо с, Левина с, Расселла с, Дригальского — Конради с, Рапопорт — Вайнтрауба с, Шустовой с). Для выявл этих св-в микроорг примен также «пестрый» ряд, т. е. серию пробирок, содерж пит среды, вкл различные углеводы, многоатомные спирты и индикатор. В кач-ве индикаторов пользуются лакмусовой настойкой или бромтимоловым синим. Разложение какого-либо из углеводов с образованием к-ты выявляют по изменению цвета индикатора, образование газа— по заполнению газом и всплыванию спец стеклянного поплавка в жид среде. Или примен полужид Гисса среды с 0,5% агара с соответ сахарами и индикатором Андраде. После посева микроба на эти среды образование к-ты выявл покраснением среды, а образование газа — по появл его пузырьков в агаре или по разрыву и сдвигу вверх агарового столбика. К дифференц-диагностич средам 2ой гр относят также крахмал агар, служащий для опред способности микробов расщеплять крахмал, среду Кларка. 3. Среды, на кот выявл способность микробов обесцвечивать красители, добавл к бульону: метилен синий, тионин, лакмус, индигокармин, нейтрал красный (с Ротбергера, с Омелянского). К 3ей гр относят также среды с нитратами, служащие для опред способности микробов восст соли азотной к-ты (нитраты) в соли азотистой к-ты (нитриты) и далее в аммиак или свободный азот. 4. Среды, выявл способность микробов усваивать в-ва, кот не усваиваются др микробами, н среда с лимоннокислым натрием (цитратный агар Симонса) для отличия киш палочки, кот лишена способности ассимилировать эту среду, от др бак киш гр или среда с олеиновокислым натрием для дифференциации дифтерийной палочки от ложнодифтерийной и дифтероидов (агар Энжеринга). К дифференциально-диагностич средам относят также среды для дифференциации анаэробов, теллуритовые среды для дифференциации дифтерийных бак, среды с мочевиной, щелочные среды (Дьедонне агар) для культивирования холерного вибриона и др. Среда Эндо состоит из МПА, 1 % лактозы, фуксина и сульфита натрия, кот его обесцвечивает, исходная среда имеет светло-розовый цвет. Среда Левина состоит из МПА, лактозы, эозина, метиленовой сини и фосфорнокислого натрия, исходная среда имеет красно-фиолет цвет. Среда Плоскирева состоит из МПА, лактозы, бриллиантового зеленого, йода, нейтрал красного, солей желчных к-т, минерал солей. Эта среда также явл элективной, т к подавляет рост многих микробов (киш палочки) и способствует лучшему росту некот болезнетворных бак (возбуд брюш тифа, паратифов).Среды Гисса служат для изучения сахаролитич св-ва микробов. содержат лактозу, глюкозу, мальтозу, сахарозу и маннит и различные индикаторы. Если бак расщепляют углевод до образования кислых продуктов, наблюдается изменение цвета среды, а если до к-ты и газа – наблюдают появл газообразных продуктов. Жид среды Гисса состоят из пептонной воды, 1 % углевода и индикатора Андреде (кислый фуксин, обесцвечен щелочью). В среду опускается поплавок, кот при стерилизации заполн средой. Исход цвет среды – соломенножелтый. При расщеплении углевода цвет среды становится ярко-розовым (красным). Если образуется газ, он накапливается в поплавке. Если углевод не расщепляется, цвет среды не изменяется. Полужид среды Гисса состоят из 0,2-0,5 % мясо-пептонного агара (МПА), 1 % углевода и индикатора ВР (водно-голубая краска и розоловая к-та). Исход цвет среды - розовато-серый. При расщеплении углевода цвет среды становится голубым, а если образуется газ, наблюдаются разрывы в среде. Опред вид бак ферментирует не все, а только некот углеводы в 1их пробирках цвет изменяется, а в др – нет получается "пестрый ряд". Каждый вид бак характеризуется своим "пестрым рядом".