45. Применение генетических методов в диагностике инфекционных заболеваний.

Для диаг инфекц заб генетич методами маркером возбуд явл его геном. Методы индикации нуклеин к-т применяют для диаг вирус инф, для идентификации бак (особенно таких, кот трудно выделить) и для опред точного таксономич положения микроорг. Методы позволяют обнаружить микроорг в исслед материале (воде, продуктах, материале от больного) по наличию ДНК без его выделения в чистую культуру. Метод молекулярной гибридизации основан на способности ДНК и РНК специфически соед (гибридизироваться) с комплементарными олигонуклеотидными фрагментами, искусственно синтезированными и меченными ферментом, флюорохромом или изотопом. Эти фрагменты назыв зондами Полимеразная цепная р-ция (ПЦР) основана на многократном увелич числа копий (амплификации) опред участка ДНК, катализируемое ферментом ДНК-полимеразой. ПЦР – это очень чувствит метод, теоретически для получения результата достаточно наличие в материале одной молекулы ДНК.

46. Достижения генетической инженерии и биотехнологии.

Генетич инжене́рия (ген инженерия) — совокупн приёмов, методов и технологий получения рекомбинантных РНК и ДНК, выделения генов из орг (кл), осущ манипуляций с генами, введения их в др орг и выращивания искусств орг после удаления выбранных генов из ДНК. Методы генной инженерии основаны на получении фрагментов исходной ДНК и их модификации. Для получения исходных фрагментов ДНК разных орг испол неск способов: – Получение фрагментов ДНК из природ материала путем разрезания исходной ДНК с помощью специфич нуклеаз (рестриктаз). – Прямой химич синтез ДНК, н, для создания зондов – Синтез комплементарной ДНК (кДНК) на матрице мРНК с испол фермента обратной транскриптазы (ревертазы). Выделенные участки ДНК встраивают в векторы переноса ДНК. Векторы ДНК – это небольшие молекулы ДНК, способные проникать в др кл и реплицироваться в них. – Созданы банки генов, или клонотеки, предст собой коллекции клонов бак. Каждый из этих клонов содержит фрагменты ДНК опред орг (дрозофилы, чела). – На основе трансформированных штаммов вирусов, бак и дрожжей осущ промыш производство инсулина, интерферона, гормональн препаратов. На стадии испытаний находится производство белков, позволяющих сохр свертываемость крови при гемофилии, и др лп. – Созданы трансгенные высшие орг (многие раст, некот рыбы и млекопит) в кл кот успешно функционируют гены совершенно др орг. Широко известны генетически защищенные генно-модифицирован раст (ГМР), устойчивые к высоких дозам опред гербицидов, а также Bt-модифицирован раст, устойчивые к вредителям.

47. Геномная инженерия: методы, достижения.

Пересадка генов чела, обеспечивающих синтез какого-либо фермента или гормона, в кл микроорг (н: гена, ответственного за выработку инсулина, - в генотип киш палочки); Получен ф-р свертывания крови для людей, больных гемофилией; Проведена пересадка гена фиксации азота атмосферного воздуха из кл бак в злаки; Испол переноса генов при выведении новых декоративных раст (в генотип петунии был перенесен ген, нарушающий образование пигмента в лепестках – была создана петуния с белыми цветками.

48. Значение изменчивости микроорганизмов для практической медицины.

Направленная изменчивость, описанная у всех живых орг, от бак до чела. Н, способность бак синтезировать спец фермент в ответ на появл в среде субстрата для этого фермента- в ответ на появл в среде сахара лактозы у бак появл фермент — галактозидаза, расщепляющая этот сахар. Направлен изменчивость результат эволюцион процесса. Способность к ней-приспособление, возникающее на протяжении многих поколений. Поэтому она не м б док-вом правоты ламаркизма, а подтверждает его несостоятельность. Бак имеют в ДНК ген галактозидазы, приобретен в эволюции, так же как и механизм, обеспеч вкл именно этого гена при появл в среде лактозы. В кл кожи чела также уже имеются ферменты синтеза черного пигмента — меланина, и лучи солнца лишь активируют этот процесс. Направлен изменчивость микробов может привести к образ новых видов или к переходу их в неклет состояние. Практич задача генетики - направленное получение микроорг с полезными для чела св-вами. Значение наглядно на примере создания микробов высокопродуктивных культур, образующих антибиотич, физиологич активные в-ва, дефицитные аминок-ты. Лучшим методом для этого явл селекция мутантов, полученных при возд-вии различных мутаген ф-ров на исходные (дикие) штаммы. Процесс выведения высокопродуктивных штаммов состоит из многих ступенчатых этапов, состоящих из возд-вия на культуру мутаген ф-ров с послед отбором наиб продуктивного штамма. Этот мутантный штамм может еще подвергаться возд-вию мутагенов с послед отбором наиб продуктивных мутантов. получен советский штамм пенициллина "Новый гибрид 369", при выведении кот применялись гибридизация, уф лучи, этиленимин и отбор. Этот штамм примен на пенициллиновых заводах многих стран. П: берут у В-кл ген, ответственный за синтез инсулина, встраивают в геном бактериал кл-псевдомонады и она начинает продуцировать необход гормоны.