Методика экспертного исследования определении опиатов при химико-токсикологическом исследовании трупного материала

использованы методики, описанные разными авторами.

Морфин, как в свободном, так и связанном виде (М-6-Г, М-3-Г), является основным метаболитом героина. Обнаружение 6–МАМ в биообъектах является доказательством употребления героина. Наибольшие концентрации свободного морфина отмечены в крови, головном мозге, селезенке, мышечной ткани сердца, почках, В печени, легких и моче морфин находится в коньюгированном виде.

Для доказательства употребления опиатов на химико-токсикологическое (судебно-химическое) исследование направляют: от живых лиц - кровь, мочу, слюну;

от трупов - кровь,, мочу, почки, печень, легкие, желчь, желудок, кишечник, головной мозг, селезенку, мочевой пузырь.

Выбор объектов исследования во многом зависит от способа и дозы введения наркотика, а также времени от момента приема до наступления отравления.

При внутривенном и интраназальном способах введения и курении опиатов со смертельным исходом на судебно-химический анализ следует направлять в обязательном порядке кровь, мочу, легкие, головной мозг, почки, печень с желчным пузырем, селезенку, стенку мочевого пузыря (в отсутствии мочи).

Кроме того, для установления факта употребления опиатов в качестве объектов исследования могут быть использованы слюна от живых лиц. При этом необходимо иметь в виду, что героин в слюне сохраняется дольше, чем в крови, и он может быть обнаружен в течение одного часа после курения и внутривенного ведения.

Морфин быстро метаболизируется печенью и выводится с мочой в виде глюкуронидов. При острых отравлениях основная масса морфина в органах трупа находится в виде глюкуронидов. Поэтому для выделения морфина из органов, мочи и желчи предварительно необходимо проводить гидролиз глюкуронидов соляной кислотой при повышенном давлении. Другие способы гидролиза глюкуронидов морфина (с помощью глюкуронидазы, нагреванием с концентрированной соляной кислотой при атмосферном давлении, в том числе и в присутствии оксидантов) не обеспечивают полного выделения морфина или приводят к его разложению.

Методика определения морфина основана на оптимальном способе гидролиза глюкуронидов морфина.

По результатам количественного определения морфина в этих жидкостях производят судебно-медицинскую оценку. Если концентрация морфина в желчи больше, чем в моче, то это указывает на острое отравление морфином. Если содержание морфина в моче больше, чем в желчи, то смерть наступила в результате хронического отравления. Если для анализа недоступны моча и желчь, то могут быть исследованы печень и почки.

1. Методы изолирования алкалоидов группы опия.

1.1. Изолирование опиатов из мочи (трупный материал)

В колбу Эрленмейера с притёртой пробкой помещают 25 мл мочи, добавляют 2,5 мл концентрированной соляной кислоты, колбу закрывают пробкой, фиксируют резиновым кольцом и помещают в автоклав. Время автоклавирования 30-45 мин при давлении 1,1 атм. По окончании автоклавирования содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через фильтровальную бумагу в делительную воронку и экстрагируют 50 мл хлороформа для очистки от лекарственных веществ и пигментов. После сильного встряхивания смеси в течение 3 мин после отстаивания или центрифугирования при 3000 об/мин в течение 10 мин органическую фазу отделяют.

Водную фазу осторожно подщелачивают порошком карбоната натрия до рН 8,7 (измеренном на рН-метре), добавляя небольшими количествами при тщательном перемешивании во избежание сильного вспенивания. В случае превышения значения рН 8,7-8,8 добавляют 1-2 капли 80% фосфорной кислоты и необходимое значение рН доводят карбонатом натрия.

Раствор с рН 8,7 экстрагируют двумя порциями по 100 мл смеси хлороформ : изопропанол (8:2) при встряхивании в течение 3 минут. Объединённые извлечения отделяют, при необходимости центрифугируют, фильтруют через безводный сульфат натрия и полученный фильтрат дважды реэкстрагируют 10 мл порциями 0,1 Н соляной кислоты. Солянокислые реэкстракты помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объём до метки тем же раствором кислоты.

Если солянокислый реэкстракт имеет жёлтую окраску, его встряхивают с 10 мл изоамилового спирта и органическую фазу отбрасывают.

Солянокислый реэкстракт можно оставить на 12-18 часов. Щелочные водные растворы извлечений следует немедленно экстрагировать хлороформно-изопропанольной смесью, а выпаренные хлороформные остатки исследовать методом ТСХ.