Методы обнаружения антраценпроизводных в лрс

I. Качественные реакции

1. Наиболее характерными реакциями на антрахиноны являются реакции с раствором аммиака или с растворами едких щелочей, в результате которых феноляты окрашиваются в различные цвета в зависимости от положения гидроксильных групп:

феноляты 1-8 дигидроксиантрохинонов имеют вишнево-красное окрашивание;

феноляты 1-4 дигидроксиантрохинонов - пурпурное окрашивание;

феноляты 1-2 дигидроксиантрохинонов - фиолетовое окрашивание.

Реакцию можно провести, смачивая внутреннюю поверхность коры крушины 10% раствором гидроксида натрия или известковой водой. Появляется кроваво-красное окрашивание.

Восстановленные формы со щелочами дают желтое окрашивание, но после окисления кислородом воздуха или перекисью водорода (или другими окислителями) - красное окрашивание.

2. Для обнаружения антрахинонов, имеющих хотя бы одну ОН-группу в -положении, можно использовать реакцию с 1% метанольным раствором ацетата магния, дающую различное окрашивание по аналогии.

3. Широко используют реакцию Борнтрегера (схема 11). Готовится щелочное извлечение из ЛРС (10% раствор гидроксида натрия) при нагревании. При этом происходит:

1) гидролиз антрагликозидов с образованием свободных

агликонов;

2) окисление восстановленных форм до антрахинона;

3) образование фенолятов.

После подкисления гидролизата агликоны извлекают органическим растворителем (диэтиловым эфиром). При встряхивании эфирного слоя с раствором аммиака образующиеся феноляты переходят в аммиачный слой и окрашивают его в вишнево-красный или фиолетовый цвета (эмодины). В случае хризофанола органический слой остается окрашенным в желтый цвет.

Эта реакция лежит в основе количественного определения АП.

4. Реакция сублимации. Сырье нагревают в сухой пробирке, при этом происходит окисление восстановленных форм до антрахинонов, которые возгоняются. Сублимат конденсируется на стенках пробирки в виде желтых капель или кристаллов. От капли щелочи они окрашиваются в красный цвет.

II. Хроматография

При анализе ЛРС, содержащего АП, используется бумажная и тонкослойная хроматография.

Для хроматографии на бумаге используют системы растворителей:

Н-БУТАНОЛ - УКСУСНАЯ КИСЛОТА - ВОДА (4:1:5),

МЕТАНОЛ - ЭТИЛАЦЕТАТ - МУРАВЬИНАЯ КИСЛОТА (50:5:5) и др.

Для хроматографии в тонких слоях:

БЕНЗОЛ - МЕТАНОЛ (8:2);

ХЛОРОФОРМ - ЭТАНОЛ - ВОДА (60:30:20) и др.

Спиртовое извлечение из ЛРС наносят на пластинку с тонким слоем силикагеля, хроматографируют в системе ЭТИЛАЦЕТАТ - МЕТАНОЛ - ВОДА (100:17:13), затем высушивают. Зоны сорбции АП обнаруживают по окраске в видимом и УФ-свете до и после проявления 5% спиртовым раствором щелочи. Наблюдают различно окрашенные пятна от желтой до огненно-, кирпично-красной и даже фиолетовой окраски.

Количественное определение

Для количественного определения АП в ЛРС используют оптические методы: колориметрические и спектрофотометрические.

Схема 11

Схема реакции Борнтрегера

Щелочное извлечение

Фильтрация

(отработанное сырье на выброс)

Подкисление гидролизата

Агликоны извлекают диэтиловым эфиром

Эфирный слой желтого цвета

Обработка эфирного слоя аммиаком

Образующиеся феноляты переходят в

аммиачный слой, окрашивая его в

вишнево-красный цвет - эмодины

Эфирный слой остается окрашенным в

желтый цвет (хризофанол)

1. Колориметрический метод основан на реакции Борнтрегера, которая заключается в том, что окисленные формы антраценпроизводных при растворении в щелочах образуют красную окраску, а восстановленные - желтую. Реакция является положительной для антрахинонов хризацинового ряда. Антроны, антранолы, диантроны и их гликозиды дают красное окрашивание после гидролиза и окисления.

Существует множество модификаций этого метода, но чаще используют метод, принятый ГФ ХI (вып. 2, ст. 2) для определения АП в коре крушины (схема 12).

При определении необходимо учитывать, что производные антрацена могут быть представлены С-гликозидами, как у алоэ и сенны. В этих соединениях углеводные компоненты не отщепляются ни при кислотном, ни при щелочном гидролизе. Таким образом, этот метод не позволяет с достаточной точностью определять сумму антраценпроизводных или содержание отдельных антрахинонов.