Лабораторная работа №6
Тема: Белки
Цель: Сформировать умение проводить характерные реакции по выявлению свойства белков
Опыт 1. Цветные реакции белков
Реактивы и материалы: белки, свежеприготовленные водные растворы: натрий-гидроксида 2н раствор, натрий-гидроксида концентрированный, азотной кислоты (ρ = 1,4 г/см3), медь(ΙΙ)-сульфата 0,2н раствор.
Выполнение опыта:
1. Биуретовая реакция: В пробирку поместить 2 капли раствора белка, 1 каплю натрий-гидроксида, 1 каплю медь(ΙΙ)-сульфата. Раствор в пробирке приобретает фиолетовый цвет, который виден даже в водной вытяжке мяса. Биуретовая реакция связана с наличием в белке пептидных группировок -СО-Н- , которые обуславливают возникновение окраски при взаимодействии с солями меди.
2. Ксантопротеиновая реакция: В пробирку вводят 3 капли водного раствора белка и 1 каплю азотной кислоты. Выпадает белый осадок. При нагревании реакционной смеси раствор и осадок окрашивается в ярко-желтый цвет. Смесь охлаждают и добавляют 1-2 капли натрий-гидроксида. При этом желтая окраска переходит в ярко-оранжевую. Ксантопротеиновая реакция обусловлена наличием в белке ароматических аминокислот. Желтое окрашивание появляется как результат нитрования ароматических ядер. Появление оранжевой окраски определяется образованием более интенсивно окрашенных анионов.
Опыт 2. Обратимое осаждение белков.
Реактивы и материалы: белки, водные растворы; сульфат аммония, насыщенный водный раствор.
Выполнение опыта: В пробирку помещают 2 капли раствора белка, 2 капли насыщенного раствора сульфата аммония и слегка взбалтывают. Появляется муть выпадающего в осадок белка (глобулина). 1 каплю мутного раствора приливают в другую пробирку с 3 каплями воды и встряхивают. Осадок растворяется. Объясните наблюдаемые явления и сделайте вывод об обратимости процесса осаждения белков.
Опыт 3. Свертывание белков при нагревании.
Реактивы и материалы: белки, водные растворы; сульфат аммония 2н раствор.
Выполнение опыта: В пробирку наливают 4 капли раствора белка и нагревают в пламени горелки до кипения. Белок при этом выпадает в виде мути или хлопьев. Содержимое пробирки слегка охлаждают, добавляют каплю раствора сульфата аммония и нагревают до начала кипения. Количество свернувшегося белка при этом увеличивается. Объясните наблюдаемые явления и сделайте вывод об обратимости процесса свертывания белков.
Опыт 4. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами.
Реактивы и материалы: белки, водные растворы; азотная кислота (d = 1,41 г/см3); соляная кислота (d = 1,19 г/см3).
Выполнение опыта: В пробирку наливают 2 капли концентрированной азотной кислоты и осторожно, наклонив пробирку, по стенке добавляют 2 капли раствора белка. Через несколько секунд на границе раздела белка и кислоты образуется кольцо свернувшегося белка. При встряхивании количество свернувшегося белка увеличивается. Такой же опыт повторяют с соляной кислотой. Концентрированные минеральные кислоты образуют с белками солеобразные соединения и одновременно вызывают свертывание белков.
Контрольные вопросы:
1. Объясните, какие органические вещества называются белками?
2. Объясните, что понимают под первичной структурой белка?
3. Объясните, что понимают под вторичной и третичной структурой белка?
4. Объясните, какие факторы вызывают денатурацию белка?
5. Объясните, какие реагенты вызывают осаждение белков?
6. Объясните, какие цветные реакции на белки вы знаете и в чем они заключаются?
Литература:
1.Аверина, А. В. Лабораторный практикум по органической химии / А.В. Аверина. А.Я Снегирева. – М.: Химия, 1983. - 218с.
2.Гурецкая, В. Л. Органическая химия / В. Л. Гурецкая. - М.: Высшая школа, 1983. – 320с.
3.Потапов, В. М. Органическая химия / В. М. Потапов. С. Н. Татаринчик. – М.: Химия,1989. - 448с.