Занятие № 4 Тема: Бактериологический метод диагностики.

Вопросы для подготовки:

1. Бактериологический метод диагностики, его этапы, цель.

2. Морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические свойства бактерий.

3. Принципы идентификации микроорганизмов.

Задания для самостоятельной работы студентов

Задание №1 --Бактериологический метод исследования.

Выделить из смеси бактерий чистую культуру бактерий и провести их идентификацию.

Изучаемый объект – смесь бактерий. По готовым демонстрациям провести бактериологическое исследование по дням. Полученные данные занести в таблицу:

День исследования.	Исследуемый материал.	Ход исследования	Результат

1 день исследования --- изучить мазок приготовленный из смеси бактерий и окрашенный по Граму. При микроскопии мазка установить, какие морфологические виды микробов присутствуют в мазке, определить их тинкториальные свойства. Произвести условный посев смеси штрихом на МПА для получения изолированных колоний.

2 день исследования----В посевах на чашках Петри изучить культуральные свойства бактерий - макроскопические и микроскопические особенности каждой колонии ( см. справочные материалы).

Изучить мазок, приготовленный из части изучаемых колоний. Убедиться, что в колонии содержатся одинаковые по морфологии бактерии. Мазки окрашены по Граму.

Из оставшейся части колоний делают посев на скошенный агар для накопления чистой культуры.

3 день исследования ----Изучить характер роста бактерий на скошенном агаре. Проверить чистоту культур. Сделать высев с агара на пестрый ряд и в МПБ с целью изучения биохимический свойств бактерий.

4 день исследования ----1. Учесть результаты посевов на средах Гиса и на МПБ:

а) На средах с углеводами отметить наличие кислых продуктов расщепления углеводов и газообразование

б) На МПБ обратить внимание на характер роста, отметить наличие продуктов гидролиза белка ( сероводорода и индола)

2. Провести идентификацию чистых культур бактерий: проанализировать все полученные свойства микробов ( морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические) и установить видовую принадлежность выделенных бактерий.

Справочный материал

Макроскопические признаки колоний:

В проходящем свете:

1.-- величина колоний ( мелкие, средние, крупные)

2.—форма колоний ( круглая, неправильная)

3.---прозрачность ( прозрачная, просвечивающая, непрозрачная)

В отраженном свете:

1.---высота колонии ( плоская, плосковыпуклая, куполообразная)

2.---поверхность колоний ( гладкая, блестящая, шероховатая, матовая)

3----цвет колоний ( бесцветная, пигментная, цвет пигмента)

Микроскопические признаки колоний

Изучаются под микроскопом с увеличением объектива х 8, со слегка опущенным конденсором. Эмульгируемость колоний в физиологическом растворе ( хорошо или плохо эмульгируется) проверяется при приготовлении из колоний мазков с целью микроскопии их.

1.---край колонии ( правильно закругленный, волнистый, фестончатый, зубчатый, бахромчатый, петлеобразный)

2.---структура колоний ( гомогенная, негомогенная, аморфная, зернистая)

3.---консистенция колоний ( мягкая, слизистая, хрупкая).