Занятие №15. Тема: Микробный антагонизм. Антибиотики. Принципы рациональной антибиотикотерапии. Вопросы для подготовки

1. Микробный антагонизм, его эволюционная значимость. Практическое использование микробного антагонизма.

2 .Понятие «антибиотик», основные источники получения антибиотиков. Природные, полусинтетические и синтетические антибиотики.

3. Требования предъявляемые к антибиотикам, классификация антибиотиков по происхождению, химическому составу, спектру действия, типу антимикробного действия.

4.Механизмы действия антибиотиков на микроорганизмы.

5. Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам ( метод индикаторных дисков, метод серийных разведений).

6. Резистентность и зависимость микробов к антибиотикам, условия формирования, методы выявления.

7. Рациональные пути профилактики формирования резистентных штаммов и преодоления сформировавшейся микробной устойчивости.

8. Осложнения антибиотикотерапии.

Задания к практической работе студентов

Задание №1. Изучить демонстрационный набор препаратов антибиотиков и распределить их в зависимости от происхождения.

Задание №2. Изучить микробный антагонизм в опыте микробная «ловушка» по Перетцу.

В середине чашки Петри с МПА делается посев петлей вульгарного протея, после чего полукругом вокруг посева засевается культура антракоида. Чашки инкубируют в термостате сутки.

Определить наличие антагонизма между протеем и антракоидом по характеру роста протея на питательной среде. Учитывая культуральные особенности этого микроба.

Задание №3. Определить по демонстрационным посевам чувствительность микробов к антибиотикам методом бумажных дисков.

Для этого на плотных питательных средах сплошным газоном произведен посев изучаемой культуры, на поверхность которой наложены диски с антибиотиками. Результаты оцениваются после суточной инкубации в термостате. При наличии антибиотикозависимости вокруг диска отмечается усиленный рост культуры. При антибиотикочувствительности вокруг диска есть зона задержки роста не менее 15 мм в диаметре.

Отметить антибиотикограмму изучаемых культур в протоколе.

Задание №4.Определить чувствительность эпидермального стафилококка к ампициллину методом серийных разведений.

Были приготовлены серийные разведения антибиотика в пробирках с МПБ. В каждую пробирку внесено определенное количество стафилококка. После суточной инкубации в термостате определять наличие или отсутствие роста бактерий по степени прозрачности бульона. Определить минимально подавляющую концентрацию (МПК) и рассчитать терапевтическую дозу. Данные внести в таблицу:

Концентрация антибиотика ЕД/мл	0,4	0,2	0,1	0,05	0,025	Контроль
Рост бактерий

«+» - рост бактерий, «--« - отсутствие роста

МПК—наименьшая концентрация антибиотика, в присутствии которого угнетается видимый рост микробов. Терапевтическая доза в 2-4 раза выше МПК.

Задание №5. Определение содержания антибиотика в сыворотке крови больного.

Методика: Берется два ряда пробирок. В первом ряду разводится исследуемая сыворотка, к которой добавляют среду с глюкозой и индикатором феноловым красным и стандартизованную взвесь стафилококка в концентрации 1000 м.к./ мл. для определения наибольшего разведения сыворотки, задерживающее рост тест-микроба. Во втором ряду готовят разведения стандарта антибиотика ( ампициллина ), к которому добавляют те же ингредиенты , что и в первый ряд с целью определения наименьшей концентрации антибиотика, дающего отсутствие роста стафилококка.

Для установления концентрации антибиотика в сыворотке больного необходимо умножить полученную МПК ампициллина на наибольшее разведение сыворотки, задерживающее рост тест-микроба.

Задание №6. Учесть чувствительность микроорганизмов к антибиотикам экспресс-методом.

Методика основана на качественной реакции на нитриты. Патологический материал от больного, содержащий возбудителя, выдерживается 1-2 часа в МПБ с добавлением нитрата калия (0,1%), затем он разливается в лунки , в каждую из которых кладут диски с антибиотиками. При росте микробов увеличивается количество дегидраз, образуется нитратредуктаза, которая восстанавливает нитрат калия в нитрит. В лунки добавляют иодистый калий, 5% серную кислоту, 1% р-р крахмала по 0,1 мл каждого компонента. При этом нитраты в присутствии серной кислоты выделяют из иодистого калия йод, который, воздействуя на крахмал, дает синее окрашивание.