Аудиторная работа.

Лабораторная работа. Количественное определение креатина в моче.

Ход работы: В три пробирки внести по 0,2 мл 37% раствора соляной кислоты, в 1-ю и 2-ю пробирки добавить по 0,2 мл исследуемой мочи, разбавленной в 5 раз дистиллированной водой. Смесь в пробирке 2-й нагреть 3 мин на кипящей водяной бане, затем охладить. Во все три пробирки внести по 0,6 мл насыщенного р-ра пикриновой кислоты и по 1мл 12,5% раствора едкого натрия. Инкубировать 10 мин при комнатной температуре, добавить по 6 мл воды.

Растворы колориметрировать против контроля (пробирка 3-я) в кювете с рабочим слоем 10 мм (фильтр зеленый). Ниже в таблице приведены данные для построения калибровочной кривой, полученные в опытах со стандартным раствором креатинина.

Концентрация стандартных растворов креатинина, мг\мл	Оптическая плотность, экстинция
0,08	0,05
1,0	0,10
1,2	0,20
1,4	0,30
1,6	0,40
1,8	0,50
2,0	0,60

На основании этих данных построить график зависимости оптической плотности от концентрации растворов креатинина и с помощью графика определите содержание креатинина в исследуемой пробе:

Пробирка 1-ая – содержание креатинина;

Пробирка 2-ая – содержание креатинина + креатина.

По разнице между пробами 1-й и 2-й можно рассчитать содержание креатина.

Полученные результаты сравните с нормальными показателями. Может ли служить показателем патологии мышц изменение содержания креатина, креатинина в моче? Ответ аргументировать.

Самостоятельно выполните следующие задания:

1. В постабсорбтивный период уровень глюкозы в крови снижается. Какова роль печени в поддержании нормогликемии в этой ситуации? Ответ проиллюстрируйте схематичным изображением конкретного молекулярного механизма.

2.В период длительного голодания для поддержания нормогликемии в печени интенсивно протекает глюконеогенез. Чем обьяснить в этой ситуации увеличение скорости мочевинообразования в печени?

3. Какова роль печени в желчеобразовании? Назовите субстрат и фермент образования желчных кислот.

4. В абсорбтивный период (рост уровня инсулина) в печени активно идет синтез холестерина. Назовите основные соединения, которые снижают активность регуляторного фермента синтеза холестерина (гидроксиметилглютарил-КоА-редуктазы).

Какова роль печени в выведении холестерина из организма?

5. Назовите процессы в печени, которые могут нарушаться при дефиците липотропных факторов. Назовите патологический процесс, который является следствием этих нарушений.

6. При длительном углеводном голодании возможно истощение буферных оснований крови. Какова роль печени в развитии этого эффекта? Опишите молекулярный механизм.

7. Печень часто называют – «орган-альтруист», т.к. в печени образуются жизненнонеобходимые соединения, которые печень синтезирует на экспорт. Назовите эти вещества и вспомните их значение.

8. Используя таблицу №24 «Клинико-биохимическая характеристика желтух» ( кН.:«Биохимия для врача» стр. 259), проверьте свои знания по биохимическим показателям крови, мочи кала в норме при желтухе.

9. Изменится ли активность аланинаминотрансферазы сыворотки крови при остром инфекционном поражении печени. Вспомните место этого фермента в метаболизме. С какой целью определяют активность АСТ и АЛТ в биохимических лабораториях лечебных учреждений?

10. Определите понятие «диспротеинемия». Какова возможная причина этого состояния? С помощью какова теста можно обнаружить диспротеинемию?

11. Поверьте свои знания: При продолжительной мышечной работе:

а. Повышается уровень инсулина в крови; б. Ускоряется глюконеогенез из лактата в печени; в. Ускоряется глюконеогенез из глицерина в печени; г. В мышцах происходит распад гликогена; д. В печени происходит распад гликогена.

12. В клетках скелетных мышц при выполнении срочной физической работы происходит:

а. Повышение проницаемости мембран клеток для глюкозы под влиянием инсулина;

б. Распад цАМФ, катализируемый фосфодиэстеразой;

в. Активация гликогенфосфорилазы путем ее фофсфорилирования;

г. Переход гликогенфосфорилазы в неактивную форму путем фосфорилирования;

д. Активация аденилатциклазы в клетке.

13. Потребность мышцы в АТФ при сокращении может возрасти примерно в 1000 раз (запаса АТФ в клетке хватит на 0,5 с работы). В этом случае потребление кислорода отстает от потребности в АТФ и ее поставщиком становится гликолиз. Какой продукт является аллостерическим активатором гликолиза, через какой фермент реализуется его действие?

13. Почему при гипоксии возникает регидность мышц

Занятие 33. Функциональная биохимия крови. Гемостаз.

Значение темы: Кровь – жидкая внутренняя среда организма. Общий объем крови взрослого человека составляет 5-6 литров. Кровь состоит из жидкой части – плазмы и форменных элементов – эритроциты, лейкоциты и тромбоциты; каждый из компонентов выполнят свои специфические функции. Кровь - главная транспортная система, циркулирующая, благодаря работе сердца, по замкнутой системе кровеносных сосудов транспортирует множество соединений, растворенных в ней. Растворимые вещества плазмы составляют около 10% массы крови. Химический состав растворенных в плазме соединений у здорового человека относительно постоянен. Диапозон концентраций разных веществ плазмы крови у здорового человека представлен в специальных биохимических справочниках и является важнейшим материалом для медицинской биохимии. Кровь связана со всеми тканями организма, поэтому возникновение патологических процессов в каком- либо органе привод к изменению биохимических показателей крови. Эта информация может быть ценной при постановке диагноза и контроля эффективности лечебных мероприятий.

Цель занятия: Изучить основные функции крови и механизмы их обусловливающие. Знать основные биохимические показатели крови и уметь их интерпретировать.

Студент должен знать:

1. Основные функции крови и механизмы, с помощью которых они реализуются.

2. Основные компоненты крови

3. Белковый состав крови.

4. Гемостаз. Компоненты гемостаза.

5. Свертывающая система крови и противосвертывающая.

6. Фибринолитическая система.

7. Основные биохимические показатели крови и их интерпретация.

Студент должен уметь:

1. Уметь из крови получить сыворотку и плазму.

2. Прогнозировать изменение биохимических процессов в организме, используя основные показатели крови.

3. Объяснить принцип метода электрофоретического разделения белков плазмы крови.

4. Выполнить основные тесты коагулограммы. Оценить результаты.

Студент должен получить представление:

О ДВС-синдроме;

О наиболее часто встречающихся патологических состояниях, сопровождающихся изменением содержания белка в плазме крови и протеинограммы плазмы.

О возможности прогнозирования активации тромбинообразования и возможных последствиях.

Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:

1. Анатомия и физиология кровеносной системы.

2. Буферные системы крови.

Задания для самоподготовки:

Изучите материал темы в соответствии с целевыми вопросами («студент должен знать») и письменно выполните следующие задания:

1. Перечислите все функции, выполняемые кровью, и соответственно механизмы их обуславливающие.

2. Назовите продукты белкового, липидного и углеводного обмена, циркулирующие в крови. Запомните основные биохимические показатели крови в норме. Проверьте свои знания: Установите соответствие

Метаболиты: Обмен:

1. мочевина; 2. креатинин; А. углеводов;

3. кетоновые тела; 4. лактат; Б. липидов;

5. холестерин; 6. липопротеины; В. Белков;

7. пируват 8.мочевая кис-та Г. нуклеотидов

3. Активность каких клеточные ферментов (органоспецифичные ферменты) чаще других определяют в биохимических лабораториях для суждения о функциональном состоянии и патологии органов.

Проверьте свои знания:

При патологии каких органов в крови повышается активность перечисленных ниже ферментов:

А. печень 1. Амилаза

Б. почки 2. Креатинкиназа

В. поджелудочная железа 3.Аланинаминотрансфераза

4. Охарактеризуйте свойства и функции основных белков плазмы крови. Обозначьте реактанты острой фазы.

5. Вспомните основное значение эритроцитов крови, особенности строения.

Основной механизм энергообеспечения (пояснить – как это связано со строением клетки).

Вспомните, что на начальных стадиях дифференциации эритроцитов способствуют цитокины (белок образующийся в костном мозге). В дальнейшем этому способствует гормон почек - эритропоэтин, скорость образования которого зависит от парциального давления кислорода (возрастает при недостатке кислорода).

6. Объясните причины высокой скорости перекисного окисления липидов в эритроцитах. Вспомните основные механизмы антиоксидантной системы.

Значение пентозофосфатного пути.

7. В процессе жизнедеятельности в кровь поступают вещества кислого и щелочного характера, Каков механизм поддержания рН крови в норме (кислотно-основное состояние - КОС)?

8. Назовите буферные системы крови, механизм их действия.

9. Объясните понятие «ацидоз» и «алкалоз» Причины их возникновения.

Виды ацидоза. Приведите примеры возникновения ацидоза.

Проверьте свои знания:

В компенсации ацидоза главную роль выполняют:

10. Определите понятия «гемостаз», «первичный гемостаз – сосудисто-тромбоцитарный», «вторичный гемостаз –коагуляционный» Перечислите компоненты гемостаза и механизмы их действия в гемостазе. Почему сосудистый и тромбоцитарный компоненты предпочтительнее объединить как первичный гемостаз.

Что объединяет тромбоксан и простациклин?

11. Определите понятие «плазмокоагуляция». Изучите компоненты этой системы, их названия и обозначения.

12. Изучите последовательность превращений факторов плазмокоагуляции.

Изобразите процесс в виде схемы. Вспомните роль ферментов протеаз. Умейте объяснить механизм активации прокоагулянтов (активация факторов свертывания).

13. Умейте объяснить роль витамина К в синтезе ряда ферментов коагуляции.

14. Изучите значение фибринолитической системы и ее основные компоненты.

Аудиторная работа

Лабораторная работа:

1. Получение из цельной крови плазмы и сыворотки. Располагая набором реактивов и оборудования: цельная кровь, физиологический раствор, 0,025 М р-р хлорида кальция, 3,8% р-р цитрата натрия, центрифуга, центрифужные пробирки, получить плазму и сыворотку из пробы крови. Составить план работы.

2. Определение активированного времени рекальцификации (АВР).

Ход работы: Внести в пробирку Видаля, установленную в водяном термостате ( 37о ), 0,1 мл плазмы, 0,1 мл 0,14 н р-ра хлорида натрия, 0,1 мл взвеси каолина (активатор контактной фазы), затем 0,1 мл 0,025М р-ра хлорида кальция. В момент внесения кальция включить секундометр. Вращая пробирку вдоль продольной оси, отметить появление сгустка и тотчас выключить секундометр.

Какие фазы плазмокоагуляции характеризует этот показатель?