Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методическое пособие по биохимиидля стоматол..doc
Скачиваний:
5
Добавлен:
10.11.2019
Размер:
613.38 Кб
Скачать

Аудиторная работа:

Лабораторная работа: 1. Обнаружение кетоновых тел.

Проба Ланге. В пробирку налить 2-3 мл мочи (сыворотки), 1 мл ледяной уксусной кислоты и 0,5 мл 5% раствора нитропруссида натрия, затем осторожно наслоить 2 мл раствора аммиака. Появление фиолетового кольца указывает на наличие кетоновых тел.

Обнаружение ацетоуксусной кислоты в моче. К 5 мл мочи прибавить по каплям 5% раствор хлорного железа – выпадает осадок. При наличии ацетоуксусной кислоты дальнейшее добавление хлорного железа ведет к появлению винно-красного окрашивания, постепенно бледнеющего при стоянии вследствие самопроизвольного декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты.

В протоколе указать следующее: какие вещества относят к кетоновым телам; что является субстратом их образования; какой продукт образуется при декарбоксилировании ацетоуксусной кислоты; назвать состояния, которые могут сопровождаться кетонемией и кетонурией; объяснить механизмы возникновения.

Лабораторная работа 2. Количественное определение ЛПНП.

1. Количественное определение липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови имеет клинико-диагностическое значение, так как количество ЛПНП крови связано с гиперхолестеринемией, поскольку холестерол входит главным образом в состав этой фракции. Увеличение содержания ЛПНП (гиперлипопротеинемия IIа, IIб и III типов) наблюдается при атеросклеротическом поражении сосудов. Нормальное содержание ЛПНП в сыворотке крови: 3,5 –5,8 г/л

Принцип метода: в присутствии хлорида кальция гепарин избирательно осаждает ЛПНП. Интенсивность образующегося помутнения пропорциональна их содержанию.

Ход работы: в пробирке №1 (опыт) смешивают 2 мл 0,277 % раствора СаСl2, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл 1% раствора гепарина.

В пробирке №2 (контроль) смешивают 2 мл 0,277% раствора СаСl2, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл дистиллированной воды. Тщательно смешивают и через 4 минуты измеряют оптическую плотность помутневшей опытной и контрольной проб на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной оптического слоя 5 мм при красном светофильтре против воды. Расчет осуществляется по формуле А = (Ео - Ек ) х 10, где

А – концентрация ЛПНП, г/л;

Ео - экстинция опытной пробы;

Ек - экстинкция контрольной пробы;

10 – коэффициент пересчета.

Оформите результаты в виде протокола. Сравните с нормой. Выскажите предположения о состоянии липидного обмена.

Используя учебник и лекции, выполните следующее:

1.Составить схему, иллюстрирующую связь метаболизма углеводов и липидов в тканях. В схеме покажите метаболические пути углеводов: основной, и пентозофосфатный, пути мобилизации гликогена; метаболические пути липидов - тканевой липолиз, превращение глицерина и ВЖК. Стрелками укажите взаимосвязи через общие метаболиты. Укажите также регуляторные ферменты и их эффекторы.

2.Заблокирована реакция окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты. Как изменится интенсивность ß-окисления ВЖК и почему; какие продукты и почему появятся в крови? Ответ аргументировать.

4. Рассчитать энергетический эффект полного окисления следующего соединения:

сн2-о-со-сн3

|

сн –о-со-сн3

|

сн2-о-со-сн3

5. В крови и моче резко повысилось содержание ß-гидроксибутирата и ацетоуксусной кислоты. Какие данные необходимы для уточнения причин их появления?

7. Сравните свойства липаз, участвующих в обмене жиров в организме человека и установите соответствие:

а. Расщепляет экзогенные жиры;

б. Расщепляет жиры в составе ХМ и ЛОНП;

в. Активируется адреналином и глюкагоном;

г. Активность зависит от присутствия желчи;

д. Локализованы в эндотелии кровеносных сосудов;

е. Локализовано в адипоцитах

А. Панкреатическая липаза; Б. Тканевая липаза; В. Липопротеидлипаза; Г.Свойственно всем типам липаз; Д. Не свойственно ни одному типу

8. Какие из перечисленных ниже процессов активируются при длительном голодании: а. липолиз в жировой ткани; б. бета- окисление в печени;

в. синтез кетоновых тел в печени; г. окисление кетоновых тел в нервной ткани;

­ д. окисление кетоновых тел в мышцах; е.глюконеогенез; ж. окисление

углеводов; з. синтез фосфолипидов

9. Сравните действие инсулина и глюкагона на жировой обмен и установите соответствие:

а. Вырабатывается при повышении концентрации глюкозы в крови;

б. Вырабатывается при снижении концентрации глюкозы в крови;

в. Повышает скорость депонирования жира;

г. Повышает скорость мобилизации жира;

д. Активирует липопротеидлипазу;

е. Активирует триацилглицеридлипазу жировой ткани;

ж. Действует посредством аденилатциклазной системы.