3.5. Хроматография. Хроматографические методы.

• Хроматография – физико-химический метод разделения и анализа смесей веществ, основанный на процессах сорбции и десорбции разделяемых веществ между подвижной и неподвижной фазами, что приводит к различию в скорости движения этих веществ относительно неподвижной фазы.

• Эффективность хроматографического процесса зависит от:

• физико-химических свойств неподвижной и подвижной фаз;

• условий хроматографирования (температуры, времени разделения, скорости движения подвижной фазы);

• сродства разделяемых веществ к контактирующим фазам.

• Различают следующие виды хроматографии:

По цели проведения:

• аналитическая хроматография используется для качественного и количественного анализа смеси веществ;

• препаративная хроматография предназначена для выделения из смеси чистых компонентов или для очистки вещества от примесей.

По агрегатному состоянию подвижной фазы:

• газовая хроматография, где подвижной фазой является газ, а неподвижной фазой твердый адсорбент;

• жидкостная хроматография, когда подвижной фазой является, как чистая жидкость, так и смесь разных жидкостей.

• По технике эксперимента:

• плоскостная (тонкослойная или бумажная) хроматография, когда в качестве твердой фазы используются силикагель, оксид алюминия, нанесенные тонким слоем на пластину. В бумажной хроматограмме неподвижной фазой является вода, входящая в состав бумаги;

• объемная (колоночная) хроматография. В этом случае в верхнюю часть колонки с сорбентом вносят анализируемую смесь и медленно пропускают подвижную фазу.

• По механизму разделения веществ:

• адсорбционная хроматография, когда вещества разделяются благодаря различию их констант адсорбции в системах «газ - твердое тело» или «раствор - твердое тело».

• распределительная хроматография при которой разделение веществ происходит вследствие различия констант распределения при адсорбции веществ из газовой или жидкой подвижной фазы жидкой неподвижной фазой, нанесенной на твердый носитель.

• молекулярно-ситовая (гель-фильтрация) хроматография, когда разделение смеси веществ происходит благодаря различному размеру их частиц. Неподвижной фазой служат вещества, имеющие поры строго определенного размера (цеолиты, или агарозы, полиакриламидные гели и др.).

• биоспецифическая хроматография основана на способности биологических субстратов избирательно взаимодействовать с веществами, например, фермента с субстратом, антигена с антителом, гормона с рецептором.

Хроматография широко применяется в медицине, биологии, фармации для:

• качественного и количественного анализа лекарственных веществ;

• идентификации продуктов деструкции образующихся при длительном хранении лекарственных веществ;

• обнаружения примесей, оценки чистоты лекарственных веществ;

• качественного и количественного анализа биологических жидкостей (кровь, моча) на присутствие в ней алкоголя, наркотиков, допинга.

• качественного и количественного соотношения жирных кислот в физиологических средах для диагностики заболеваний желчного пузыря, печени, сахарного диабета, гипертонической болезни и др.;

• контроля окружающей среды, в гигиене и санитарии.