- •1.Предмет та методи біотехнології рослин як науки
- •2.Отримання гаплоїдів на базі клітин чоловічого гаметофіту.
- •3. Біотехнологічні методи, які дозволяють зберегти зникаючі породи сільськогосподарських тварин.
- •4. Система формування селекційного матеріалу птахофабрик в Україні.
- •5 . Задачі біотехнології в галузі рослинництва.
- •6. Технологія отримання гаплоїдних рослин та гомозиготних ліній на базі гаплоїдів та подвоєних гаплоїдів в культурі пильників.
- •7.Оценка спермы.
- •10. Скорочення селекційного процесу у рослин з використанням гаплоїдів та подвоених гаплоїдів.
- •11. Використання сучасних селекційних методів при виробництві продукції тваринництва.
- •12. Біологічне значення копацитації і акросомної реакції сперматозоїда на результати запліднення vitro I in vivo.
- •13. Організація лабораторії біотехнології рослин. Перелік обов’язкових приміщень та обладнання.
- •14. Типи та основні етапи мікроклонального розмноження рослин. Практичне значення методу мікроклонального розмноження рослин.
- •15. Організація штучного запліднення сільськосподарських тварин в Україні
- •19. Відкриття в області біології які привели до створення днк технології
- •20. Пептидні вакцини. Принципи їх створення. Обмеження застосування
- •21. Фітогормони, що використовуються в біотехнології рослин.
- •22.Одержання вторинних метаболітів в культурі клітин та тканин рослин.
- •23. Методы генной иммунизации
- •25. Макро- та мікро солі в живильних середовищах для культивування рослин in vitro.
- •26. Виробництво рекомбінантних фармацевтичних білків транс генними рослинами.
- •27. Використання біотехнологічних методів при розв’язанні кормових проблем - дефіциту білка.
- •28. Вимоги до середовищ для зберігання сперми
- •29. Калусогенез в культурі клітин та тканин рослин. Типи калусів.
- •30. Суспензійні культури рослин
- •32.Аттенуированная вакцина
- •33. Регенерация в культуре тканей и растений
- •34.Клеточная селекция
- •35. Вимоги до розріджувача сперми, що використовується при штучному заплідненні.
- •36. Векторні вакцини та принципи їх створення.
- •37. Типи морфогенезу в культурі клітин та тканин рослин.
- •39. Трансплантація ембріонів. Метод та значення.
- •41. Соматический эмбриогенез и органогенез как типы морфогенеза в культуре клеток и тканей растений
- •42. Типы соматических гибридов у растений и их хар-ка. Практическое применение.
- •43. Методы извлечения эмбрионов из коров доноров.
- •44. Штучне запліднення тварин та його значення
- •45. Типи регенерації рослин в культурі in vitro
- •46. Заходи боротьби з повторним зараженням безвірусного садивного рослинного матеріалу, отриманого біотехнологічним шляхом.
- •50. Умови, необхідні для злиття протопластів рослин.
- •51. Кріоконсервування ембріонів тварин.
- •52. Трансгенні тварини та їх одержання.
- •53. Методи стерилізації в біотехнології рослин.
- •54. Селекційні та біотехнологічні шляхи отримання гаплоїдів та подвоєно-гаплоїдних рослин.
- •55. Біотехнологічні методи, які дозволяють регулювати стать тварини при народженні.
- •56. Теоретичні основи „роздільної” селекції в тваринництві.
- •57. Культура пыльников растений in vitro.
- •58.Органические примеси, которые используются в питательных средах в биотехнологии растений.
- •59. Методы извлечения эмбрионов из коров доноров.
- •60. Використання методів біотехнології при виробництві вакцин
59. Методы извлечения эмбрионов из коров доноров.
Оплодотворенные яйцеклетки от суперовулированных коров-доноров могут быть извлечены тремя способами: после убоя коровы-донора; хирургическим; нехирургическим.
Извлечение эмбриона после убоя коровы-донора. Самым простым и надежным способом извлечения эмбрионов является убой коровы-донора. Этот способ практиковался только на первых этапах освоения метода трансплантации. В настоящее время из-за потери генетически ценной коровы-донора он не используется.
Извлечение эмбриона хирургическим способом. Важным моментом, обеспечивающим эффективность извлечения эмбрионов, является определение стадии их развития и места положения в поовых путях коровы-донора. Для трансплантации рекомендуется использовать бластоцисты, поэтому эмбрионы извлекают между 7-8-ми сутками после первого искусственного осеменения. Хирургический способ извлечения эмбрионов является трудоемким, дорогостоящим и, что особенно важно, им нельзя пользоваться многократно. В настоящее время хирургический способ извлечения применяется в редких случаях, главным образом в научных целях.
Извлечение эмбрионов нехирургическим способом. Основное преимущество нехирургического способа извлечения эмбрионов заключается в простоте манипуляций. Для этого не требуется специального операционного помещения. Эмбрионы можно извлекать непосредственно в производственных условиях. С селекционной точки зрения, при правильном применении нехирургического способа воспроизводительная способность доноров не нарушается, что позволяет многократно использовать генетически ценных коров-доноров для получения от них большого числа потомков. В общем виде извлечение эмбрионов нехирургическим методом происходит по следующей схеме. Коров-доноров обследуют на наличие желтых тел, чистят и моют, ограничивают рацион и кратность кормления, а за сутки прекращают кормление и поение. Перед самым извлечением эмбрионов дезинфицируют наружные половые органы коров-доноров. Извлекают эмбрионы под местной анестезией. Вымывание повторяют 5-8 раз. Основную часть эмбрионов извлекают в первых трех-четырех смывах. После вымывания эмбрионов в матку вводят раствор антибиотика с целью антисептики. Во многих странах разработаны различные устройства для нехирургического извлечения эмбрионов. В среднем из вымытых яйцеклеток до 25% оказываются неоплодотворенными или дезинтегрированными.
60. Використання методів біотехнології при виробництві вакцин
Наиболее просты в изготовлении живые вакцины, так как технология в основном сводится к выращиванию аттенуированного вакцинного штамма с соблюдением условий, обеспечивающих получение чистых культур штамма, исключение возможностей загрязнения другими микроорганизмами (микоплазы, онковирусы) с последующей стабилизацией и стандартизацией конечного препарата. Вакцинные штаммы бактерий выращивают на жидких питательных средах (гидролизаты казеина или другие белково-углеводные среды) в аппаратах - ферментаторах емкостью от 0,1 м3 до 1-2 м3. Полученная чистая культура вакцинного штамма подвергается лиофильному высушиванию с добавлением протекторов.
Вирусные и риккетсиозные живые вакцины получают выращиванием вакцинного штамма в эмбрионах кур или перепелов, свободных от вирусов лейкоза, либо в культурах клеток, лишенных микоплазм. Используют или первично-трипсинизированные клетки животных или перевиваемые диплоидные клетки человека. Живые аттенуированные штаммы бактерий и вирусов, применяемые для приготовления живых вакцин, получены, как правило, из природных штаммов путем их селекции или пассажей через биологические системы (организм животных, эмбрионы кур, культуры клеток, питательные среды).
В связи с успехами генетики и генетической инженерии появились возможности целенаправленного конструирования вакцинных штаммов. Получены рекомбинантные штаммы вируса гриппа, а также штаммы вируса вакцины со встроенными генами протективных антигенов вируса гепатита В.
Инактивированные корпускулярные бактериальные вакцины или цельновирионные инактивированные вакцины получают соответственно из культур бактерий и вирусов, выращенных на тех же средах накопления, что и в случаях получения живых вакцин, и затем подвергнутых инактивации нагреванием (гретые вакцины), формалином (формолвакцины), ультрафиолетовым излучением (УФ-вакцины), ионизирующим излучением (радиовакцины), спиртом (спиртовые вакцины). Инактивированные вакцины ввиду недостаточно высокой иммуногенности и повышенной реактогенности не нашли широкого применения.
Производство молекулярных вакцин - более сложный технологический процесс, т. к. требует извлечения из выращенной микробной массы протективных антигенов или антигенных комплексов, очистки и концентрирования антигенов, введения в препараты адъювантов. Выделение и очистка антигенов с помощью традиционных методов (экстракции трихлоруксусной кислотой, кислотного или щелочного гидролиза, ферментативного гидролиза, высаливания нейтральными солями, осаждения спиртом или ацетоном) сочетаются с применением современных методов (скоростного ультрацентрифугирования, мембранной ультрафильтрации, хроматографического разделения, аффинной хроматографии, в т.ч. на моноклональных антителах). С помощью этих приемов удается получать антигены высокой степени очистки и концентрирования.
Препараты, в которых антиген находится в сорбированном состоянии, называют сорбированными или адсорбированными (дифтерийный, столбнячный, ботулинический сорбированные анатоксины). Сорбент играет роль носителя и адъюванта. В качестве носителя в синтетических вакцинах предложены всевозможные полимеры.
Интенсивно разрабатывается генно-инженерный способ получения протективных белковых антигенов бактерий и вирусов. В качестве продуцентов используют обычно эшерихии, дрожжи, псевдомонады со встроенными в них генами протективных антигенов. Получены рекомбинантные штаммы бактерий, продуцирующие антигены возбудителей гриппа, коклюша, кори, герпеса, гепатита В, бешенства, ящура, ВИЧ-инфекции и др.
Получение протективных антигенов генно-инженерным способом целесообразно в том случае, когда выращивание микробов связано с большими трудностями или опасностями, или когда трудно извлекать антиген из микробной клетки. Принцип и технология получения вакцин на основе генно-инженерного способа сводятся к выращиванию рекомбинантного штамма, выделению и очистке протективного антигена, конструированию конечного препарата.
Препараты вакцин, предназначенные для иммунизации людей, проверяют на безвредность, реактогенность и иммуногенность.