- •1.Предмет та методи біотехнології рослин як науки
- •2.Отримання гаплоїдів на базі клітин чоловічого гаметофіту.
- •3. Біотехнологічні методи, які дозволяють зберегти зникаючі породи сільськогосподарських тварин.
- •4. Система формування селекційного матеріалу птахофабрик в Україні.
- •5 . Задачі біотехнології в галузі рослинництва.
- •6. Технологія отримання гаплоїдних рослин та гомозиготних ліній на базі гаплоїдів та подвоєних гаплоїдів в культурі пильників.
- •7.Оценка спермы.
- •10. Скорочення селекційного процесу у рослин з використанням гаплоїдів та подвоених гаплоїдів.
- •11. Використання сучасних селекційних методів при виробництві продукції тваринництва.
- •12. Біологічне значення копацитації і акросомної реакції сперматозоїда на результати запліднення vitro I in vivo.
- •13. Організація лабораторії біотехнології рослин. Перелік обов’язкових приміщень та обладнання.
- •14. Типи та основні етапи мікроклонального розмноження рослин. Практичне значення методу мікроклонального розмноження рослин.
- •15. Організація штучного запліднення сільськосподарських тварин в Україні
- •19. Відкриття в області біології які привели до створення днк технології
- •20. Пептидні вакцини. Принципи їх створення. Обмеження застосування
- •21. Фітогормони, що використовуються в біотехнології рослин.
- •22.Одержання вторинних метаболітів в культурі клітин та тканин рослин.
- •23. Методы генной иммунизации
- •25. Макро- та мікро солі в живильних середовищах для культивування рослин in vitro.
- •26. Виробництво рекомбінантних фармацевтичних білків транс генними рослинами.
- •27. Використання біотехнологічних методів при розв’язанні кормових проблем - дефіциту білка.
- •28. Вимоги до середовищ для зберігання сперми
- •29. Калусогенез в культурі клітин та тканин рослин. Типи калусів.
- •30. Суспензійні культури рослин
- •32.Аттенуированная вакцина
- •33. Регенерация в культуре тканей и растений
- •34.Клеточная селекция
- •35. Вимоги до розріджувача сперми, що використовується при штучному заплідненні.
- •36. Векторні вакцини та принципи їх створення.
- •37. Типи морфогенезу в культурі клітин та тканин рослин.
- •39. Трансплантація ембріонів. Метод та значення.
- •41. Соматический эмбриогенез и органогенез как типы морфогенеза в культуре клеток и тканей растений
- •42. Типы соматических гибридов у растений и их хар-ка. Практическое применение.
- •43. Методы извлечения эмбрионов из коров доноров.
- •44. Штучне запліднення тварин та його значення
- •45. Типи регенерації рослин в культурі in vitro
- •46. Заходи боротьби з повторним зараженням безвірусного садивного рослинного матеріалу, отриманого біотехнологічним шляхом.
- •50. Умови, необхідні для злиття протопластів рослин.
- •51. Кріоконсервування ембріонів тварин.
- •52. Трансгенні тварини та їх одержання.
- •53. Методи стерилізації в біотехнології рослин.
- •54. Селекційні та біотехнологічні шляхи отримання гаплоїдів та подвоєно-гаплоїдних рослин.
- •55. Біотехнологічні методи, які дозволяють регулювати стать тварини при народженні.
- •56. Теоретичні основи „роздільної” селекції в тваринництві.
- •57. Культура пыльников растений in vitro.
- •58.Органические примеси, которые используются в питательных средах в биотехнологии растений.
- •59. Методы извлечения эмбрионов из коров доноров.
- •60. Використання методів біотехнології при виробництві вакцин
21. Фітогормони, що використовуються в біотехнології рослин.
Важным фактором, регулирующим дифференциацию и морфогенез изолированных тканей, является наличие в питательной среде регуляторов роста — ауксинов, цитокининов, гиббереллинов. Подбирая соотношение и концентрацию этих веществ, можно направленно регулировать их органогенное действие. Для каждого вида, а иногда и сорта растения экспериментально должен быть установлен соответствующий уровень фитогормонов в среде.
Чаще всего применяются следующие ауксины: а-нафтилуксус-ная кислота (НУК) в концентрациях 0,1—2 мг/л, р-индолилуксус-ная кислота (ИУК) в концентрациях 1-30 мг/л, 2,4-дихлорфенок-снуксусная кислота (2,4-Д) в концентрациях 1-10 мг/л.
Для индукции образования каллуса обычно используют 2,4-Д, которая более активна, чем ИУК и НУК. Для тканей однодольных используют довольно высокие концентрации 2,4-Д — 2-10 мг/л, для получения каллусных культур двудольных вводят в среду ИУК—1-10 мг/л. Во многих случаях низкие уровни ауксинов способствуют морфогенезу корней, образованию луковичек, стимулируют эмбриогенез.
Обязательным компонентом питательных сред являются вещества группы цитокининов: кинетин (6-фурфуриламинопурин), бен-зиламинопурин (БАП), зеатип (природный цитокипин), N-изопен-тиленаминонурин (2П).
Цитокинины снимают апикальное доминирование и индуцируют развитие пазушных почек в культуре апексов, стимулируют рост покоящихся органов. Для реализации морфогенетических реакций изолированным тканям необходимы экзогенные цитокинины, под действием которых происходит дефференциаиия в каллусных культурах, образование стеблевых почек и побегов. Цитокинины регулируют рост соматических зародышей и формирование растений, замедляют старение органов и повышают их устойчивость к неблагоприятным условиям внешней среды.
Гиббереллины усиливают рост стебля, листьев, индуцируют прорастание семян, снимают состояние покоя. При микроразмножении используют в основном гиббереллин А3 (гибберелловая кислота) в концентрациях 0,1—0,5 мг/л, это способствует ускорению роста сформировавшихся почек и получению растений с хорошо развитой надземной частью. Гиббереллины стимулируют развитие органов, но обычно подавляют процессы их заложения.
Совместное внесение в среду веществ разных групп действует синергически или антагонистически. Например, кинетин усиливает каллусогенное действие ауксинов, но снижает их корнеобразующее влияние. Ауксины в низких концентрациях повышают действие цитокининов, направленное на образование адвентивных почек, а цитокинины в низких концентрациях усиливают корнеобразующее действие ауксинов.
22.Одержання вторинних метаболітів в культурі клітин та тканин рослин.
Вторичными метаболитами является антибиотики, микотоксини, пигменты, фенольные соединения, гликозиды, алкалоиды, каучук и резина, эфирные масла, гидроароматические соединения. Много из этих веществ не берут активную участь в клеточном метаболизме, а некоторые из них являются жизненно необходимыми для нормального функционирования и развития организма.
Во время производства вторичных биопродуктов часто возникает нестабильность. Поэтому для промышленного производства нужно использовать клеточные культуры, которые имеют высокую производительную стабильность.
Получение клеточных культур для производства биологически активных веществ возможно из любой ткани или органа целого растения, выращенного в открытой или закрытой почве. Часто для этого используют стерильные проростки, полученные из семян в условиях in vitro.
Выращивание клеточных культур в ферментере в больших масштабах для получения биологически активных веществ подобное культивированию микроорганизмов. Клетки растений можно культивировать в контролируемых условиях на питательной среде определенного состава, в отличие от выращивания растений в открытой почве, где они часто испытывают неконтролированное влияние биотичних и абиотичних факторов окружающей среды.
Калюси растений и культуры клеток культивируют в стерильных условиях на специальных агаризованих или жидких питательных средах в сурово контролируемых условиях.
Для получения вторичных продуктов используют суспензионные культуры. Суспензионные культуры обладаю большой морфологической, биохимической, генетической свойствами и ускорением роста. Синтез вторичных продуктов пов’язан с дифференцированием клеток.
Для повышения производительности культивируемых клеток широко и во многих случаях успешно применяют:
Клеточную селекцию, которая основывается как на спонтанной, так и на индуктируемой разными мутагенами изменчивости культивируемых клеток;
Оптимизацию условий выращивания и составов ростовых и продукционных питательных сред;
Культивирование дифференцированных культур, клеток, или индукцию дифференцирования; использование елиситорив.
Чаще всего используют методы генетической инженерии. Наибольших результатов получила трансформация клеток с помощью бактерий Agrobacterium rhizogenes и получения так называемых бородатых корней, производительность которых значительно более высока, чем обычных недифференцированных культур. Повышают синтез вторичных метаболитив путем усиления активности соответствующего фермента.