Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БИОТЕХНОЛОГИЯММА им.doc
Скачиваний:
23
Добавлен:
06.08.2019
Размер:
1.01 Mб
Скачать

Задача 42

Получение антител. Отвечая на этот вопрос, надо знать что такое иммунный ответ. Иммунный ответ это сложный процесс межклеточного взаимодействия различных типов лимфоидных клеток с участием специальных гормонов, в результате чего так называемые В-клетки активно синтезируют специфические антитела против данного антигена.

Моноклональные антитела с успехом применяются для дифференциальной диагностики многих инфекционных и неинфекционных заболеваний, а также для стандартизации определения групп крови путем иммунохимического анализа. Именно с помощью моноклональных антител были идентифицированы индивидуальные маркеры многих возбудителей инфекционных заболеваний как вирусной, так и бактериальной природы, клеток крови, опухолей, гормонов и т.д. Изучение генетических механизмов многих заболеваний стало возможным благодаря уникальной специфичности моноклональных антител. Так методом иммуносцинтиграфии опухолей можно идентифицировать локализацию опухоли с ее метастазами размером 0,5-1,0 см.

Самыми важными областями использования иммунохимического анализа являются:

  • контроль банков крови и продуктов из донорской крови;

  • обнаружение возбудителей в объектах внешней среды;

  • диагностика инфекционных заболеваний;

  • диагностика диабета.

Иммунодиагностические тест-системы с использованием поликлональных антител созданы практически для всех лекарственных препаратов, но в настоящее время имеется тенденция на использование моноклональных антител, так как они являются практически чистыми реагентами, обладают стабильными характеристиками и доступны в неограниченных количествах, что помогает совершенствовать иммуноанализ в целом.

Сегодня количество проводимых иммунохимических анализов в мире растет настолько стремительно, что производство иммунодиагностикумов совместно с приборами и вспомогательными материалами можно рассматривать уже как отдельную, самостоятельную область биотехнологической промышленности. Моноклональные тела диагностического назначения представлены сегодня на фармацевтическом рынке в мире широким ассортиментом наборов.

Схема получения моноклональных тел заключается в следующем. Синтетическим коньюгированным антигеном иммунизируют мышей. Лимфоциты из селезенки мыши сливают с помощью полиэтиленгликоля с клетками стабильной миеломной линии. Из полученных гибридных клеток отбирают только те, которые унаследовали от клеток селезенки способность продуцировать антитела к лекарственному средству, а от миеломных клеток - способность неограниченно расти в культуре. После соответствующего культивирования получают клон клеток, продуцирующих антитела к лекарственному препарату. Этот клон клеток можно выращивать на мышах в виде асцитных опухолей и из асцитной жидкости выделяют антитела.

С большим успехом в гинекологическую практику вошел экспресс-метод определения беременности по уровню хориогонического гонадотропина в моче. Такие типы тестов могут быть использованы не только в специальных лабораториях, но и в домашних условиях

О ТВЕТЫ К СИТУАЦИОННЫМ ЗАДАЧАМ 1 ►

БИОТЕХНОЛОГИЯ ММА им. И.М. Сеченова

В начало | Меню | Программа | Литература | Возврат к предыдущему документу | -4 2

самостоятельно. В качестве практического примера использования твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA- enzyme linked immunosorbentassay) можно рассмотреть метод определения хорионического гонадотропина. В этом методе на полистерольные шарики сорбируются моноклональные антитела к хорионическому гонадотропину (АГ, определяемое вещество). К сенсибилизированным шарикам добавляют исследуемую пробу (мочу) и коньюгат из маркера и моноклональных антител (AT- меченные пероксидазой), к другой детерминанте гормон).

В результате иммунологической реакции хорионический гонадотропин связывается одной детерминантой с моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности шариков, а другой - с моноклональными антителами коньюгата с маркером (фермент-пероксидаза). Затем шарики отмывают от всех не связавшихся компонентов мочи и определяют активность фермента в составе иммунных комплексов с помощью субстратхромогенной смеси. Степень окраски раствора будет прямо пропорциональна количеству хорионического гонадотропина в образце мочи.

О ТВЕТЫ К СИТУАЦИОННЫМ ЗАДАЧАМ < 2

БИОТЕХНОЛОГИЯ ММА им. И.М. Сеченова

В начало | Меню | Программа | Литература | Возврат к предыдущему документу | 1