- •2) История развития микробиологии.
- •3)Положение микробов среди живых существ.
- •4)Основные формы бактерий.
- •5)Структура бактериальной клетки. Постоянные и непостоянные структуры, их биологическая роль, способ выявления.
- •6) Cпорообразования у бактерий.
- •7) Морфология микроскопических грибов. Основные представители.
- •8) Морфология спирохет. Основные представители.
- •9) Морфология простейших. Основные представители.
- •10) Морфология и физиология риккетсий.
- •11) Методы приготовления препаратов для изучения морфологии микробов в живом и в окрашенном состоянии. Этапы приготовления мазка.
- •12) Простые и сложные методы окраски микробов.
- •13) Химический состав бактериальной клетки и отдельных её структур. Биологическая роль химических компонентов бактерий, их локализация в клетке.
- •14) Питание бактерий.
- •15) Питательные среды. Классификация питательных сред.
- •17) Биологическое окисление (дыхание) у микроорганизмов.
- •18) Рост и размножение микроорганизмов.
- •19) Питательные среды (простые, специальные, элективные, дифференциально-диагностические).
- •20) Методы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий.
- •21) Вирусы (история открытия, характеристика).
- •22) Культивирование вирусов. Методы.
- •23) Бактериофагия.
- •24) Влияние температуры на рост и размножение бактерий.
- •25) Определение понятий: асептика, антисептика, дезинфекция, стерилизация.
- •26) Стерилизация высокой температурой. Назвать методы и дать их характеристику: аппарат, режим, материалы.
- •27) Методы стерилизации и консервации.
- •28) Действие низких температур на микроорганизмы. Влияние высушивания.
- •29) Антибиотики (определение, характеристика, классификация, механизм действия).
- •30) Явление симбиоза и антагонизма в мире микробов.
- •31) Антибиотики (активность, спектр действия).
- •32) Типы и механизмы действия природных антибиотиков.
- •33) Побочные явления при антибиотикотерапии (сущность, примеры).
- •36) Микробиологический контроль в аптеках.
- •37) Исследование дистиллированной воды, использованной для приготовления инъекционных растворов и глазных капель.
- •38) Исследование дистиллированной воды, использованной для приготовления лекарственных форм (кроме инъекционных растворов и глазных капель).
- •39) Микробиологический контроль лекарственных средств, стерилизуемых в процессе производства.
- •40) Микробиологический контроль лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства.
- •41) Явление сожительства микроорганизмов с высшими организмами. Нормальная микрофлора организма человека.
- •42) Инфекционный процесс. Определение понятия. Условия возникновения и развития.
- •43) Вирулентность микробов. Факторы вирулентности.
- •44) Бактериальные экзо- и эндотоксины.
- •45) Пирогены бактериального происхождения.
- •46) Формы инфекционного процесса.
- •47) Инфекционное заболевание.
- •48) Фитопатогенные микроорганизмы.
- •49) Основные понятия эпидемиологии.
- •50) Иммунитет (определение, виды).
- •51) Врождённый видовой иммунитет.
- •52) Фагоцитоз. Фагоцитарная теория и.И.Мечникова.
- •53) Антигены.
- •54) Антигенная структура бактериальной клетки.
- •55) Иммунная система организма.
- •56)Гуморальный иммунный ответ.
- •57) Антитела.
- •58) Иммуннофармакологические средства.
- •59) Реакция агглютинации.
- •60) Реакция преципитации.
- •61) Реакция связывания комплемента.
- •62) Реакция иммунофлюоресценции.
- •63) Иммуноферментный анализ.
- •64) Вакцины (определение, виды).
- •65) Живые вакцины.
- •66) Инактивированные вакцины.
- •67) Анатоксины, химические и ассоциированные вакцины.
- •68) Антитоксические сыворотки.
- •69) Иммуноглобулины.
- •70) Интерфероны.
- •71) Гиперчувствительность немедленного типа.
- •72) Гиперчувствительность замедленного типа.
- •73) Общая характеристика группы гноеродные кокки.
- •74) Стафилококки.
- •75) Стрептококки.
- •76) Менингококки.
- •77) Гонококки.
- •78) Возбудитель чумы.
- •79) Возбудитель сибирской язвы.
- •80) Общая характеристика энтеробактерий.
- •81) Возбудитель брюшного тифа и паратифов.
- •82) Бактерионосительство при брюшном тифе.
- •83) Сальмонеллы – возбудители острых гастроэнтеритов.
- •84) Возбудители дизентерии.
- •85)Патогенные кишечные палочки.
- •86) Холерные вибрионы.
- •87) Возбудители кампилобактериозов.
- •88) Общие свойства патогенных клостридий.
- •89) Возбудитель анаэробной газовой инфекции.
- •90) Возбудитель столбняка.
- •91) Возбудитель ботулизма.
- •92) Возбудитель дифтерии.
- •93) Иммунитет при дифтерии.
- •94) Возбудители коклюша и паракоклюша.
- •95) Возбудитель туберкулёза.
- •96) Патогенные грибы.
- •97) Возбудитель сифилиса.
- •98) Возбудитель возвратных тифов.
- •99) Возбудитель малярии.
- •100) Возбудитель амёбиаза.
- •101) Возбудитель лейшманиозов.
- •102) Возбудитель токсоплазмоза.
- •103) Возбудитель эпидемического сыпного тифа.
- •104) Возбудитель бешенства.
- •105) Возбудитель полиомиелита.
- •106) Возбудитель гриппа.
- •107) Возбудитель кори.
- •108) Возбудитель вирусного гепатита в.
- •109) Возбудитель вируса иммунодефицита человека (вич).
- •110) Возбудитель герпес – инфекции.
23) Бактериофагия.
Явление бактериофагии открыл и изучил французский микробиолог д'Эррель. В 1917 г. он наблюдал лизис культуры бактерий дизентерии после внесения в нее фильтрата испражнений больного, выздоравливающего от дизентерии. При многократных пассажах, то есть переносе из одной культуры в другую, фильтраты сохраняли свою лизирующую активность и даже усиливали ее. Ученый сделал из этого правильный вывод о том, что лизирующий агент - живой и при пассажах размножается в бактериях. Д'Эррель назвал этот агент бактериофагом (лат. phagos -пожирающий), а само явление лизиса - бактериофагией.
Позже было подтверждено, что бактериофаг - живой. Это вирус бактерий, он размножается в бактериях, вызывая их лизис. Добавление бактериофага в культуру бактерий на жидкой питательной среде вызывает просветление среды. На плотных питательных средах при посеве смеси бактерий и бактериофага на фоне сплошного роста бактерий появляются стерильные пятна или негативные колонии фагов.
Бактериофаг и специфичны, то есть лизируют определенные виды бактерий. Отсюда их названия: дизентерийный бактериофаг, стафилококковый бактериофаг. Обнаружены фаги не только бактерий, но и актиномицетов.
В практической медицине бактериофаги нашли применение как лечебные и профилактические средства.
Важное значение имеет то, что на примере бактериофагии были открыты и изучены многие проблемы общей вирусологиии и молекулярной генетики.
Структура бактериофагов
Размеры бактериофагов колеблются от 20 нм до 200 нм. Как все вирусы, содержат ДНК, или РНК, и белковый капсид. Чаще всего встречаются и лучше изучены бактериофаги, имеющие форму сперматозоида или головастика. Состоят они из головки, хвостового отростка, батальной пластинки с короткими шинами и хвостовыми нитями. Внутри головки располагается спирально скрученная пить ДНК, покрытая белковым капсидом. Хвостовой отросток - что полый цилиндрический стержень, окруженный сократительным чехлом. Базальная пластинка и нити осуществляют процесс адсорбции бактериофага на бактериальной клетке. Существуют бактериофаги,имеющие другое строение: с короткими отростком, с отростком без сократительного чехла, без отростка, нитевидной формы.
24) Влияние температуры на рост и размножение бактерий.
Температура. Следует различать 1) температурные условия, при которых микроорганизмы растут и размножаются и 2) температурные границы, при которых микроорганизмы остаются живыми. Понятно, что во втором случае диапазон температур шире.
1) В зависимости от температурных условий, которые требуют микроорганизмы для своего роста и размножения, различают три группы: психрофилы, растущие при низкой температуре, мезофилы - при средней, и термофилы - при высокой температуре
Для психрофилов оптимальная температура для роста 10-15°С. минимальная 0-5°С, максимальная 25-30°С. Большинство из них свободноживущие и паразиты холоднокровных животных, по есть и патогенные для человека, например, иерсинии, псевдомонады. Они размножаются при температуре бытового холодильника и более вирулентны при низких температурах.
Мезофилы размножаются преимущественно в организме теплокровных животных и человека. Оптимальная температура для их роста 30-37°С, максимальная 43-45°С, минимальная 15-20°С. Большинство патогенных микроорганизмов относятся к мезофилам. В окружающей среде они обычно не размножаются, но могут сохраняться живыми.
Для термофилов оптимальная температура для роста 50-60°С, минимальная равна 45°С максимальная 90°С. Термофильные бактерии живут в юрячей воде гейзеров. Они не размножаются в организме человека.
2) Температурные зоны гибели микроорганизмов шире, чем температуры, при которых они могут расти.
Микроорганизмы более чувствительны к высоким температурам, при которых наступает их гибель вследствие свертывания белков и повреждения ферментов. Вегетативные формы бактерии погибают при 60-80°С в течение часа, при 100°С - через 1 минуту. Споры бактерий устойчивы к 100°С, например, споры палочек столбняка и ботулизма выдерживают кипячение в течение нескольких часов. Для того, чтобы убить споры, создают температуру сухого жара 160-170°С, пара под давлением 120-134°С. Высокие температуры применяют при стерилизации - обеспложивании различных материалов.
К низким температурам микроорганизмы более устойчивы. Многие из них переносят замораживание. Холерный вибрион, сальмонеллы, кишечная палочка могут сохраняться во льду. Особенно устойчивы к низким температурам споры бактерий и вирусы. В то же время есть виды микробов, не переносящих температуры ниже 20°С: менингококки, гонококки, возбудители коклюша, сифилиса.
Жизнедеятельность бактерий характеризуется ростом —формированием структурно-функциональных компонентов клетки и увеличением самой бактериальной клетки, а также размножением — самовоспроизведением, приводящим к увеличению количества бактериальных клеток в популяции.
Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам,реже путем почкования. Актиномицеты, как и грибы, могут размножаться спорами. Актиномицеты, являясь ветвящимися бактериями, размножаются путем фрагментации нитевидных клеток.
Грамположительные бактерии делятся путем врастания синтезирующихся перегородок деления внутрь клетки, а грамотрицательные — путем перетяжки, в результате образования гантелевидных фигур, из которых образуются две одинаковые клетки.
Размножение бактерий в жидкой питательной среде. Бактерии,засеянные в определенный, не изменяющийся объем питательной среды, размножаясь, потребляют питательные элементы, что приводит в дальнейшем к истощению питательной среды и прекращению роста бактерий. Культивирование бактерий в такой системе называют периодическим культивированием, а культуру —периодической. Если же условия культивирования поддерживаются путем непрерывной подачи свежей питательной среды и оттока такого же объема культуральной жидкости, то такое культивирование называется непрерывным, а культура — непрерывной.
При выращивании бактерий на жидкой питательной среде наблюдается придонный, диффузный или поверхностный (в виде пленки) рост культуры. Рост периодической культуры бактерий, выращиваемых на жидкой питательной среде, подразделяют на несколько фаз, или периодов:
лаг-фаза;
фаза логарифмического роста;
фаза стационарного роста, или максимальной концентрации бактерий;
фаза гибели бактерий.
Эти фазы можно изобразить графически в виде отрезков кривой размножения бактерий, отражающей зависимость логарифма числа живых клеток от времени их культивирования.
Лаг-фаза (от англ. lag — запаздывание) — период между посевом бактерий и началом размножения. Продолжительность лаг-фазы в среднем 4—5 ч. Бактерии при этом увеличиваются в размерах и готовятся к делению; нарастает количество нуклеиновых кислот, белка и других компонентов.
Фаза логарифмического (экспоненциального) роста является периодом интенсивного деления бактерий. Продолжительность ее около 5-6 ч. При оптимальных условиях роста бактерии могут делиться каждые 20—40 мин. Во время этой фазы бактерии наиболее ранимы, что объясняется высокой чувствительностью компонентов метаболизма интенсивно растущей клетки к ингибиторам синтеза белка, нуклеиновых кислот и др. Затем наступает фаза стационарного роста, при которой количество жизнеспособных клеток остается без изменений, составляя максимальный уровень (М-концентрация). Ее продолжительность выражается в часах и колеблется в зависимости от вида бактерий,их особенностей и культивирования. Завершает процесс роста бактерий фаза гибели, характеризующаяся отмиранием бактерий в условиях истощения источников питательной среды и накопления в ней продуктов метаболизма бактерий.
Продолжительность ее колеблется от 10 ч до нескольких недель.
Интенсивность роста и размножения бактерий зависит от многих факторов, в том числе оптимального состава питательной среды, окислительно-восстановительного потенциала, рН, температуры и др.
Размножение бактерий на плотной питательной среде. Бактерии,растущие на плотных питательных средах, образуют изолированные колонии округлой формы с ровными или неровными краями (S- и R-формы; см. главу 5), различной консистенции и цвета, зависящего от пигмента бактерий.
Пигменты, растворимые в воде, диффундируют в питательную среду и окрашивают ее, например синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa) окрашивает среду в синий цвет.
Другая группа пигментов нерастворима в воде, но растворима в органических растворителях. Так, колонии «чудесной палочки» имеют кроваво-красный пигмент, растворимый в спирте. И, наконец, существуют пигменты, не растворимые ни в воде, ни в органических соединениях.
Наиболее распространены среди микроорганизмов такие пигменты, как каротины, ксантофиллы и меланины. Меланины являются нерастворимыми пигментами черного, коричневого или красного цвета, синтезирующимися из фенольных соединений.
Меланины наряду с каталазой, супероксидцисмутазой и пероксидазами защищают микроорганизмы от воздействия токсичных перекисных радикалов кислорода.Многие пигменты обладают антимикробным, антибиотикоподобным действием.
Вид, форма, цвет и другие особенности колоний на плотной питательной среде могут учитываться при идентификации бактерий, а также отборе колоний для получения чистых культур.
В промышленных условиях при получении биомассы микроорганизмов с целью приготовления антибиотиков, вакцин, диагностических препаратов, эубиотиков культивирование бактерий и грибов осуществляют в ферментерах при строгом соблюдении оптимальных параметров для роста и размножения культур.