1. Теоретическая часть:

1. Повторение теоретического материала по теме «Химия углеводов».

2. Вводное слово преподавателя.

Качественные реакции на углеводы позволяют определить их присутствие в различных биологических жидкостях и провести дифференциацию моно-, ди- и полисахаридов. В клинической лабораторной практике этими реакциями пользуются для обнаружения в моче моно- и дисахаридов.

2. Указания к занятию:

1. Внимательно изучите инструкцию.

2. Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторных работ.

3. Соблюдайте меры безопасности при работе с нагреванием на спиртовке, при работе с кислотами и щелочами.

4. При работе с пипетками пользуйтесь резиновой грушей с переходником.

3. Практическая часть.

1. Лабораторные работы. Качественные реакции на моносахариды (реакции Троммера, Ниландера, Биаля).

Лабораторная работа № 1: Реакция Троммера.

Принцип метода: Глюкоза в щелочной среде восстанавливает оксид меди (II) в оксид меди (I), при этом сама окисляется до глюконовой кислоты.

СuSО₄ + 2NаОН → Сu(ОН)₂ + Nа₂SО₄

голубой цвет

О О СuО₂

СН₂ОН-(СНОН)-С + 2Сu(ОН)₂ → СН₂ОН-(СНОН)₄-С + Н₂О + 2СuОН

Н ОН Н₂О

СuО₂ – кирпично-красный цвет.

Реактивы: 1% раствор глюкоз; 10% раствор NаОН; 5% раствор СuSО₄, моча

Ход работы:

1. В пробирку вносят 10 капель 1% раствора глюкозы, добавляют 10 капель 1% раствора гидроксида натрия и 2 капли 5% сульфата меди. Смесь нагревают до кипения. В пробирке выпадает осадок оксида меди (I) кирпично-красного цвета.

2. В пробирку вносят 10 капель мочи, добавляют 10 капель 10% раствора гидроксида натрия и 2 капли 5% раствора сульфата меди. Смесь нагревают до кипения. Отмечают результат:

а) при положительной реакции появляется кирпично-красное окрашивание;

б) в моче здорового человека глюкоза не обнаруживается.

3. В пробирку вносят 10 капель мочи, 10 капель 1% раствора глюкозы, добавляют 10 капель 10% раствора гидроксида натрия и 2-3 капли 5% раствора сульфата меди. Смесь нагревают до кипения. Отмечают результат.

Лабораторная работа № 2: Реакция Ниландера.

Принцип метода: Глюкоза, окисляясь, восстанавливает оксид висмута (III) до гидрата или свободного состояния.

Реактивы: 1% раствор глюкозы, реактив Ниландера; моча.

Ход работы:

1. В пробирку вносят 10 капель 1% раствора глюкозы, добавляют 10 капель реактива Ниландера и осторожно кипятят около 2 минут. В пробирке появляется темно-коричневое или черное окрашивание.

2. В пробирку вносят 10 капель мочи, добавляют 10 капель реактива Ниландера, осторожно кипятят около 2 минут. Отмечают результат:

а) при положительной реакции появляется темно-коричневое окрашивание;

б) в моче здорового человека глюкоза не обнаруживается.

3. В пробирку вносят 10 капель мочи, 10 капель 1% раствора глюкозы, добавляют 10 капель реактива Ниландера, осторожно кипятят около 2 минут. Отмечают результат.

Лабораторная работа № 3: Обнаружение пентоз (Проба Биаля).

Принцип метода: Пентозы с орцином и хлоридом железа (III) в кислой среде образуют при нагревании соединения желто-зеленого цвета.

Реактивы: орцин; конц. НС1; 10% FеС1₃ · 6Н₂О; реактив Биаля; 1% раствор ксилозы; моча.

Ход работы.

1. 5 мл реактива Биаля смешивают с 1 мл мочи (1-я пробирка) и раствора пентозы (2-я пробирка) и с 1 мл мочи + 1 мл раствора пентозы (3-я пробирка) и нагревают до кипения.

При положительной реакции появляется желто-зеленое окрашивание. В моче здорового человека пентозы не обнаруживаются.

2. Оформление результатов в рисунках. Выводы.