3.2 Лабораторная работа №2.

Определение хлоридов в сыворотке крови титриметрическим методом с индикатором дифенилкарбазоном.

Принцип: В основу метода положена способность хлорид-ионов в кислой среде образовывать с ионами ртути (ΙΙ) растворимую слабодиссоциируемую соль. При достижении точки эквивалентности избыток ионов ртути (ΙΙ) образует с дифенилкарбазоном комплекс фиолетового цвета.

Состав набора:

1) раствор реактива(120ммоль/л по роданиду ртути (ΙΙ), 800 ммоль/л по азотной кислоте);

2) стандарт – раствор хлоридов 100 ммоль/л;

3) индикатор – дифенилкарбазон.

Оборудование: штатив с пробирками, колбочки, химические стаканчики, градуированные пипетки.

Б. Проведение анализа.

1. В химическую колбочку на 30-50 мл или широкую пробирку вносят 2,0 мл воды и 0,1 мл стандарта, добавляют 1 каплю (0,1 мл) индикатора. При постоянном перемешивании титруют раствором реактива до появления фиолетового окрашивания.

2. В химическую колбочку или широкую пробирку вносят 2,0 мл воды и 0,1 мл исследуемой биологической жидкости – сыворотки крови (мочи, спинномозговой жидкости), добавляют 1 каплю (0,1мл) индикатора и титруют раствором реактива.

РАСЧЁТ:

С_х =_С_ст_ х V(х), где С (СΙ) = 100 ммоль/л х 0,95 мл = 105 ммоль/л

V_ст 0,9 мл

С_х – концентрация хлоридов (ммоль/л) в исследуемом растворе

С_ст – концентрация хлоридов в стандартном растворе (100 ммоль/л)

V_х – объём реактива, который уходит на титрование исследуемого образца

V_ст– объём реактива, который уходит на титрование стандарта

ПРИМЕЧАНИЕ: Если биологическая жидкость имеет щелочную среду рН>8, необходимо раствор подкислить разбавленной 1:4 азотной кислотой до рН <8, по индикаторной бумажке.

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ:

Сыворотка крови – 95- 110 ммоль/л;

Спинномозговая жидкость – 120-139ммоль/л;

Моча – 170-210 ммоль/л.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 4

Закрепление знаний, умений и навыков.

4.1. Выполнение лабораторной работы.

4.2. Учёт результатов. Начальная интерпретация.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 5

Контроль конечного уровня знаний, умений.

5.1. Оформление работы. Запись кдз.

Диагностическая информация.

МОЧА.

↑. Повышенное потребление соли; постменструальный диурез (физиологический); усиленный диурез любого происхождения, например, нефрит с потерей солей; истощение запасов калия, недостаточность коры надпочечников, тубулоинтерстициальные поражения, синдром Бартера.

↓. Недостаточное потребление соли; предменструальная задержка солей и жидкости (физиологическая), избыточная внепочечная потеря хлоридов (например, рвота, кишечный свищ, тяжёлый понос, избыточное потоотделение при недостаточном потреблении NаСΙ), гиперфункция коры надпочечников, задержка хлоридов в послеоперационном периоде, любые причины задержки солей (например, образование отёков, повреждение мозга).

ОТНОСИТЕЛЬНАЯ ГИПЕРХЛОРЕМИЯ.

Отмечается при обезвоживании, вызванном недостаточным поступлением жидкости (но не при дегидратации, обусловленной потерей жидкости при поносах и рвоте). При нефритах, нефрозах, нефросклерозах наступает задержка соли вследствие недостаточной фильтрационной способности почек. В целях снижения осмотического давления организм стремится:

° увеличить количество внеклеточной жидкости (развиваются отёки);

° выделять большое количество соли вместе с потом;

° увеличить поступление хлоридов во внутриклеточное пространство;

° задержать хлориды в костной системе, в кожи и других тканях (сухая форма задержки).

В случае, если компенсационные механизмы перестают справляться со своей задачей, наступает абсолютная гиперхлоремия.

Гиперхлоремия наблюдается при поступлении с пищей большого количества хлоридов, гиперхлоремических ацидозах, декомпенсации сердца.

Гипохлоремия отмечается при формах обезвоживания, связанных с поносами, и особенно, рвотой. Особенно ярко выражено уменьшение хлоридов при стенозе привратника. Тяжёлая гипохлоремия может появиться при почечных заболеваниях и др. Отравление сулемой вызывает переход хлоридов из крови в ткани, при этом развивается гипохлоремия, не связанная с обеднением организма хлором.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 6.

Домашнее задание:

1. Выучить содержание практического занятия № 76(41).

1. Повторить материал по учебнику «Биологическая химия»

Ермолаев и другие стр. 232 -236, 237-238.

По учебнику «Методы лабораторных клинических исследований» Камышников В.С. стр. 642-645.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 7.

Список литературы для преподавателя и для учащихся.

Для учащихся.

1. Методы клинических лабораторных исследований. Учебное пособие. Камышников В.С. Минск, «Белорусская наука», 2001г.

2. Основы биохимии. Кухта В.К, Морозкина Т.С., Таганович А.Д., Олецкий Э.И. Москва, «Медицина», 1999г.

3. Биологическая химия. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичёва. Москва, «Медицина», 1989г.

Для преподавателя:

1. Методы клинических лабораторных исследований. Учебное пособие. Камышников В.С. Минск, «Белорусская наука», 2001г.

2. Основы биохимии. Кухта В.К, Морозкина Т.С., Таганович А.Д., Олецкий Э.И. Москва, «Медицина», 1999г.

3. Биологическая химия. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичёва. Москва, «Медицина», 1989г.

4. Справочник «Клинико-биохимическая лабораторная диагностика Т.ΙΙ, Камышников В.С.