- •Диагностика инфекций половой системы
- •Основной спектр микроорганизмов, ответственных за возникновение воспалительных заболеваний гениталий, состоит из следующих представителей:
- •Микроорганизмов, вызывающих заболевания половой системы сейчас насчитывают около 30.
- •Основными методами диагностики являются:
- •Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе
- •Преаналитический этап.
- •используются модифицированные шпатели типа Эйра или щетки Cytobrash
- •Подготовка пациента
- •У мужчин материал берут из уретры.
- •Бактериоскопический метод заключается в приготовлении мазка из исследуемого материала, окраске его (иногда изучают
- •Для бактериологического исследования.
- •Бактериологический метод включает посев исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и
- •Для ПЦР исследования.
- •Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала,
- •Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый
- •урогенитальные
- •ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего
- •Для серодиагностики.
- •Серологическая диагностика, основанная на реакции антиген - антитело, может быть использована для определения
- •Венерические заболевания
- •Хламидиоз
- •Диагностика
- •Бактериоскопический метод
- •Бактериологический метод
- •Иммуноферментный анализ (ИФА).
- •Иммунофлюоресцентный метод — прямая, непрямая иммунофлюоресценция (ПИФ, НПИФ) ПИФ - определение антигена с
- •Анализ на хламидиоз методом полимеразной цепной реакции - по нескольким молекулам ДНК. Основные
- •Микоплазмоз и Уреаплазмоз
- •Бактериоскопический метод
- •К методам лабораторной диагностики генитальных микоплазм относятся бактериологический, молекулярно-генетический, серологические методы.
- •Наиболее оптимальной и часто практикуемой основой для роста микоплазм признана среда, в состав
- •Генитальные микоплазмы могут культивироваться как на жидких, так и на плотных питательных средах.
- •Рост M.hominis проявляется через 24—48 ч в виде характерных колоний с плотным центром
- •Для U.urealyticum характерно образование на агаре очень мелких колоний и часто их сливной
- •Тест-система "Mycoplasma DUO" производства "Sanofi Pasteur" позволяет культивировать, идентифицировать и дифференцированно титровать Ureaplasma
- •Серологические реакции (РСК, РИМ, РПГА, ИФА)
- •Чаще используют реакцию агрегат-гемагглютинации и ИФА. Реакция агрегат-гемагглютинации позволяет выявить наличие антигена микоплазм
- •Появление ПЦР открыло новые возможности для диагностики внутриклеточных инфекций. ПЦР основана на выделении
- •Трихомониаз
- •Бактериоскопическое исследование
- •Вторая методика - это окрашивание препарата метиленовым синим или по Граму. Ведётся поиск
- •Бактериологический метод
- •Среди серологических методов для определения антитрихомонадных антител оптимальным является иммуноферментный анализ. Однако показано,
- •Новая генодиагностическая технология - “ПЦР-технология” (ПЦР – полимеразная цепная реакция) в последнее время
- •Бактериальный вагиноз
- •Gardnerella vaginalis
- •Mobiluncus spp
- •Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G.
- •ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
- •Забор материала.
- •Выделение и культивирование вирусов
- •Папилломавирусная инфекция
- •Цитологическое исследование мазков по Паппаниколау.
- •Типирование папилломавирусов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
- •Цитомегаловирус
- •Серодиагностика
- •ДНК-диагностика цитомегаловируса
- •Кандидоз
- •Лабораторная диагностика заболевания включает в себя:
- •Микроскопический метод.
- •Микологическое исследование
- •Серологическое исследование
- •Кроме классических микробиологических методов лабораторной диагностике сегодня является определение маркеров кандидоза - Дарабинитола
- •Сифилис
- •Все методы лабораторной диагностики сифилиса можно условно разделить на:
- •Взятие материала для микроскопирования.
- •Темнопольная микроскопия.
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).
- •Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ).
- •РИБТ
- •Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa).
- •Иммуноблотинг (Western blot)
- •Нетрепонемные тесты
- •Реакция Вассермана (RW, РВ)
- •Экспресс-метод (микрореакция на стекле).
- •Гонореея
- •Диагностика гонореи.
- •бактериоскопическое исследование
- •Бактериологическое исследование
- •Кроме посева, может использоваться метод (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи
- •ДИАГНОСТИКА МЯГКОГО ШАНКРА.
- •Взятие материала.
- •Довольно часто возбудитель мягкого шанкра хорошо виден под микроскопом: это напоминающая стаю рыбок
- •Диагностика донованоза
- •Основным методом диагностики донованоза служит гистологическое исследование пораженных тканей. Микроскопия мазка-отпечатка или измельченного
- •Диагноз основан на клинической картине, результатах гистологического исследования, данных анамнеза о половых контактах,
- •Спасибо за внимание
Вторая методика - это окрашивание препарата метиленовым синим или по Граму. Ведётся поиск известной формы трихомонады с правильно очерченным асимметричным ядром на фоне нежно ячеистой структуры цитоплазмы.
Для выявления жгутиков и ундулирующей мембраны препарат следует окрашивать по Романовскому-Гимзе.
Чувствительность метода микроскопии по данным литературы варьирует от 38% до 82%
Бактериологический метод
Метод выращивания трихомонад в бульонной культуре - "золотой стандарт" для диагностики, потому что это простой в интерпретации метод и требует менее, чем 300-500 трихомонад/мл забранного материала для начала роста в культуре.
Т. vaginalis выращивается на питательной среде СДС-199 М , которая имеет следующий состав:
100 мл солевого раствора (натрия хлорида 6,5 г, калия хлорида 0,14 г, кальция хлорида 0,12 г, натрия бикарбоната 0,2 г, 0,5 мл 0,2% раствора метиленового синего, дистиллированной воды до 1 л);20 мл среды 199;450 мг солянокислого цистеина;
30 мл сыворотки крови эмбрионов телят (без консерванта);10 мл 20% раствора мальтозы;
тиамина хлорида 5% и пиридоксина гидрохлорида 5% по 0,25 мл и аскорбиновой кислоты 5% — 0,5 мл на 100 мл среды;ампициллина натриевой соли 125 000 ЕД и гентамицина 40 000 ЕД на 100 мл среды.
Среди серологических методов для определения антитрихомонадных антител оптимальным является иммуноферментный анализ. Однако показано, что трихомонадная инфекция не приводит к развитию выраженного гуморального ответа и иммунитета.
Антитрихомонадные антитела IgG могут циркулировать в сыворотке крови до года после успешного курса лечения, при этом они не обеспечивают иммунитета. С помощью определения антител невозможно дифференцировать течение болезни от реконвалесценции.
Клиническое значение имеет прямое определение специфических белков T. vaginalis в биопробах с использованием моноклональных антител в качестве быстрого метода диагностики трихомониаза.
Прямой иммуноферментный и иммунофлюоресцентный анализ мазков вагинального соскоба, использующий пероксидазо- и флюорохром- меченные смеси моноклональных антител к различным структурам T. vaginalis достаточно чувствительные и специфичные методы.
Новая генодиагностическая технология - “ПЦР-технология” (ПЦР – полимеразная цепная реакция) в последнее время опережает остальные методы генодиагностики трихомониаза и наравне с культуральным методом широко используется в клинической практике.
Колонии
цистоподобных
трихомонад
Бактериальный вагиноз
Микрофлора влагалища представляет собой подвижную экосистему. В норме основой микрофлоры влагалища являются лактобациллы (Lactobacillus spp.), играющие защитную функцию. Кислая среда влагалища и перекись водорода подавляют рост условно-патогенных микробов (стафилококков, стрептококков, кишечной палочки, анаэробных бактерий, Gardnerella vaginalis, Mobiluncus spp.), которые в небольшом количестве выявляются во влагалище подавляющего большинства женщин.
Если доля лактобацилл снижается , их место в экосистеме занимают условно-патогенные микробы
(в первую очередь Gardnerella vaginalis и Mobiluncus spp).
Gardnerella vaginalis
Вагинальная гарднерелла (Gardnerella vaginalis) - анаэробная грамвариабельная (чаще грамотрицательная) мелкая бактерия
Mobiluncus spp
Мобилункус (Mobiluncus) это подвижный вибрионоподобный, имеющий форму запятой, анаэробный микроорганизм.
Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G. vaginalis и условно-патогенной анаэробной флорой, в первую очередь представителями семейства Bacteroides, Mobiluncus, M. hominis и U.urealyticum.
Предварительный диагноз БВ может быть поставлен при наличии у пациентки 3-х из 4-х перечисленных признаков:
•1 наличие “ключевых” клеток при цитологическом исследовании урогенитального мазка; •2 рН влагалищного отделяемого >4,5;
•3 специфический характер выделений; •4 положительный аминотест
Окончательное установление диагноза БВ возможно только на основании данных о состоянии микрофлоры влагалища. Комплексная диагностика состояния вагинальной микрофлоры, основанная на сочетании микроскопического исследования мазка и ПЦР анализа
ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Лабораторные методы при диагностике вирусных инфекций включают:
выделение и идентификацию возбудителя;обнаружение и определение титров противовирусных антител;обнаружение антигенов вирусов в образцах исследуемого материала;
микроскопическое исследование препаратов исследуемого материала.
Забор материала.
При заборе материала для исследований необходимо выполнять следующие условия:
образцы следует отбирать как можно раньше либо с учетом ритма циркуляции возбудителя;материал следует отбирать в объеме, достаточном для всего комплекса исследований;
образцы следует доставлять в лабораторию незамедлительно (!), при относительно кратковременной транспортировке (не более 5 сут) образцы сохраняют на льду, при более длительной - при температуре -50°С.