- •Диагностика инфекций половой системы
- •Основной спектр микроорганизмов, ответственных за возникновение воспалительных заболеваний гениталий, состоит из следующих представителей:
- •Микроорганизмов, вызывающих заболевания половой системы сейчас насчитывают около 30.
- •Основными методами диагностики являются:
- •Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе
- •Преаналитический этап.
- •используются модифицированные шпатели типа Эйра или щетки Cytobrash
- •Подготовка пациента
- •У мужчин материал берут из уретры.
- •Бактериоскопический метод заключается в приготовлении мазка из исследуемого материала, окраске его (иногда изучают
- •Для бактериологического исследования.
- •Бактериологический метод включает посев исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и
- •Для ПЦР исследования.
- •Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала,
- •Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый
- •урогенитальные
- •ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего
- •Для серодиагностики.
- •Серологическая диагностика, основанная на реакции антиген - антитело, может быть использована для определения
- •Венерические заболевания
- •Хламидиоз
- •Диагностика
- •Бактериоскопический метод
- •Бактериологический метод
- •Иммуноферментный анализ (ИФА).
- •Иммунофлюоресцентный метод — прямая, непрямая иммунофлюоресценция (ПИФ, НПИФ) ПИФ - определение антигена с
- •Анализ на хламидиоз методом полимеразной цепной реакции - по нескольким молекулам ДНК. Основные
- •Микоплазмоз и Уреаплазмоз
- •Бактериоскопический метод
- •К методам лабораторной диагностики генитальных микоплазм относятся бактериологический, молекулярно-генетический, серологические методы.
- •Наиболее оптимальной и часто практикуемой основой для роста микоплазм признана среда, в состав
- •Генитальные микоплазмы могут культивироваться как на жидких, так и на плотных питательных средах.
- •Рост M.hominis проявляется через 24—48 ч в виде характерных колоний с плотным центром
- •Для U.urealyticum характерно образование на агаре очень мелких колоний и часто их сливной
- •Тест-система "Mycoplasma DUO" производства "Sanofi Pasteur" позволяет культивировать, идентифицировать и дифференцированно титровать Ureaplasma
- •Серологические реакции (РСК, РИМ, РПГА, ИФА)
- •Чаще используют реакцию агрегат-гемагглютинации и ИФА. Реакция агрегат-гемагглютинации позволяет выявить наличие антигена микоплазм
- •Появление ПЦР открыло новые возможности для диагностики внутриклеточных инфекций. ПЦР основана на выделении
- •Трихомониаз
- •Бактериоскопическое исследование
- •Вторая методика - это окрашивание препарата метиленовым синим или по Граму. Ведётся поиск
- •Бактериологический метод
- •Среди серологических методов для определения антитрихомонадных антител оптимальным является иммуноферментный анализ. Однако показано,
- •Новая генодиагностическая технология - “ПЦР-технология” (ПЦР – полимеразная цепная реакция) в последнее время
- •Бактериальный вагиноз
- •Gardnerella vaginalis
- •Mobiluncus spp
- •Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G.
- •ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
- •Забор материала.
- •Выделение и культивирование вирусов
- •Папилломавирусная инфекция
- •Цитологическое исследование мазков по Паппаниколау.
- •Типирование папилломавирусов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
- •Цитомегаловирус
- •Серодиагностика
- •ДНК-диагностика цитомегаловируса
- •Кандидоз
- •Лабораторная диагностика заболевания включает в себя:
- •Микроскопический метод.
- •Микологическое исследование
- •Серологическое исследование
- •Кроме классических микробиологических методов лабораторной диагностике сегодня является определение маркеров кандидоза - Дарабинитола
- •Сифилис
- •Все методы лабораторной диагностики сифилиса можно условно разделить на:
- •Взятие материала для микроскопирования.
- •Темнопольная микроскопия.
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).
- •Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ).
- •РИБТ
- •Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa).
- •Иммуноблотинг (Western blot)
- •Нетрепонемные тесты
- •Реакция Вассермана (RW, РВ)
- •Экспресс-метод (микрореакция на стекле).
- •Гонореея
- •Диагностика гонореи.
- •бактериоскопическое исследование
- •Бактериологическое исследование
- •Кроме посева, может использоваться метод (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи
- •ДИАГНОСТИКА МЯГКОГО ШАНКРА.
- •Взятие материала.
- •Довольно часто возбудитель мягкого шанкра хорошо виден под микроскопом: это напоминающая стаю рыбок
- •Диагностика донованоза
- •Основным методом диагностики донованоза служит гистологическое исследование пораженных тканей. Микроскопия мазка-отпечатка или измельченного
- •Диагноз основан на клинической картине, результатах гистологического исследования, данных анамнеза о половых контактах,
- •Спасибо за внимание
Для бактериологического исследования.
Взятие материала предпочтительно проводить до начала антибактериальной терапии. Подготовка пациента аналогична с первым методом. Забор материала осуществляется специальными одноразовыми зонд-тампонами, которые затем помещаются в транспортную среду.
Транспортная система со средой — представляет собой стерильную пластиковую пробирку с агаризованной или жидкой средой, закрытую герметично пробкой. Следует использовать транспортные системы со средой (консерванты), которая позволяет пролонгировать время транспортировки до 24 часов и более .
Бактериологический метод включает посев исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и ее идентификацию.
В том случае, если в исследуемом материале предполагается содержание возбудителя в достаточном количестве, посев материала производят на плотные питательные среды (для получения изолированных колоний). При незначительном содержании микроорганизмов исследуемый материал прежде всего засевают на жидкие питательные среды — среды обогащения.
Идентификацию выделенной чистой культуры производят по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, антигенным и токсигенным свойствам (в зависимости от вида возбудителя). Определение перечисленных свойств позволяет установить вид возбудителя.
Для ПЦР исследования.
Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя.
Умужчин – соскоб слизистой оболочки мочеиспускательного канала, который помещается в пробирку со специальным реагентом.
Уженщин дополнительно берется на исследование содержимое влагалища, цервикального канала матки, уретры. Также при ИППП могут использовать мочу и кровь(редко).
Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала, забираемого для исследования, не должно быть избыточным, т.к. вместе с возбудителем в пробу попадают вещества, которые могут вызывать тормозить ПЦР или могут способствовать разрушению ДНК при хранении и транспортировке. При взятии мазков и соскобов достаточное количество материала – размером “со спичечную головку”.
Подготовка пациента.
Перед забором соскоба из уретры необходимо обработать ее наружное отверстие тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Вводят зонд в уретру у женщин на глубину 1,0—1,5 см и у мужчин – на 3-4 см. Затем аккуратно несколькими вращательными движениями производят соскоб эпителиальных клеток.
Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый урогенитальный зонд (щеточка), который собирает необходимое количество эпителия, не травмируя слизистую, почти не впитывает образец и хорошо отдает собранный материал в жидкую транспортную среду.
Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают зонд в течение 10—15 с, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора. Прижимая его к стенке пробирки и отжав избыток жидкости,
удаляют зонд и закрывают пробирку.
урогенитальные
зонды,
цервикальные
шпатели,
щеточки,
Зеркала.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего его используют для выявления инфекций передающихся половым путем (ИППП) и вирусных гепатитов.
ПЦР диагностика эффективна для обнаружения микроорганизмов трудно выявляемых в лабораторных условиях, атипичных форм бактерий, внутриклеточных паразитов и микроорганизмов, способных длительно существовать в организме хозяина и вызывать хронические заболевания.
Для серодиагностики.
Кровь для серологического исследования на берут из локтевой вены натощак шприцем либо одной иглой (самотеком). Шприц и игла должны быть после стерилизации промыты изотоническим веществом натрия хлорида (нельзя промывать водой, спиртом, кислотами, щелочами). В чистую сухую пробирку забирают 5–7 мл крови.
Кровь для исследования экспресс-методом берут из пальца либо из локтевой вены.
По мере надобности для исследования в отдаленных лабораториях можно вместо крови пересылать сухие сыворотки. Для этого на следующий день после взятия крови сыворотку отделяют от сгустка. Потом набирают 1 мл сыворотки в шприц и выливают ее в виде 2-ух отдельных кружков на полоску писчей бумаги, вощаной бумаги либо целлофана размером 6.
Серологическая диагностика, основанная на реакции антиген - антитело, может быть использована для определения как тех, так и других, и играет роль в определении этиологии вирусной инфекции даже при отрицательных результатах выделения вируса. Успех серологической диагностики зависит от специфичности реакции и соблюдения временных условий взятия крови, необходимых для синтеза организмом антител. В большинстве случаев используют парные сыворотки крови, взятые с интервалом в 2 - 3 нед. Положительной реакция считается по крайней мере при 4-кратном нарастании титра антител.
Венерические заболевания
Гонорея Мягкий шанкр или шанкроид Донованоз Сифилис
Новые «венерические заболевания»
Хламидиоз
Микоплазмоз
Уреаплазмоз
Трихомониаз Бактериальный вагиноз
Папилломавирусная инфекция Генитальный герпес Цитомегаловирус Кандидоз