Микробиологическая характеристика и диагностика пневмоцистоза

Возбудитель – Pneumocystis carini

Морфология - свободная особь – трофозоит – овальной офрмы, окружена шаровидным слизистым слоем.

В процессе деления пневмоцисты проходят разные стадии спорогонии. В итоге под общей оболочкой цисты скапливаются несколько (7 – 8) ядер, каждое из которых даст начало 7 - 8 новым особям паразита.

Тинкториальные свойства: выявляются в препаратах, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Пневмоцисты – фиолетовые, ядра – темно-синие.

Источники инфекции: больной человек, здоровые носители (особенно часто встречаются среди персонала родильных домов, отделений для недоношенных детей и в домах ребенка), крысы.

Путь передачи: воздушно-капельный, допускается возможность трансплацентарной передачи.

Реципиенты: чаще заболевают грудные, особенно недоношенные дети. У взрослых пневмоцистоз – оппортунистическая инвазия, часто осложняющая течение туберкулеза, лимфогранулематоза, СПИДа и др.

Инкубационный период: 30 – 40 дней до 3 месяцев.

Продром: снижение аппетита, похудание, нервозность .

В разгар болезни: субфебрилитет, симптомы хронической интерстициальной пневмонии. Альвеолы и бронхиолы заполняются пенистой массой, в результате нарушается газообмен, появляется сухой упорный кашель, учащенное дыхание, одышка, цианоз, при минимальных физикальных данных.

Продолжительность течения болезни до 8 недель.

Прогноз: без лечения неблагоприятный.

Материал для исследования:

• Слизь, полученная методом прямой ларингоскопии, катетером из трахеи, из верхних дыхательных путей;

• Мокрота, полученная при откашливании (лучше всего паровой ингаляции);

• Гистологические срезы, мазки-отпечатки из легких (от трупа).

Методы исследования:

1. Микроскопический, не раньше 2-й недели от начала болезни. В препаратах, окрашенных по Романовскому-Гимзе хорошо видны 7 -8 – ядерные цисты; плохо различимы трофозоиты.

2. Иммунологические методы в стадии разработки и внедрения: РИФ, РНИФ, РЭМА, ИФА.

3. Биологический метод – интраназальное и внутрикишечное заражение крыс с последующим вскрытием животных и паразитологическим анализом.

4. ПЦР – молекулярно-биологический метод.

Приложение 5

Противогрибковые антибиотики

- нистатин, леворин, гризиофульвин, амфотерицин В, кетоконазол.

Аллергические пробы самостоятельного значения не имеют, так как аллергены, полученные из грибов недостаточно специфичны.

Приложение 6

Культивирование грибов

Питательные среды для культивирования грибов:

1. Не селективные среды:

• Пивное сусло (неопохмеленное сусло стерилизуют при 110⁰С 30 минут). Затем используют его для приготовления:

а) сусло жидкое (разводят водой);

б) среда Сабуро жидкая (вода, глюкоза, пептон);

в) сусло-агар (добавляют 2 - 3% агар-агар).

• Среда Сабуро плотная (агар, пептон, глюкоза, мальтоза, вода);

• Рисовая среда Левиной (фильтруют. Добавляют агар-агар);

• Среда Левина (МПА, лактоза, эозин, метиленовая синь);

• Среда Эндо (МПА, лактоза, кислый фуксин, обесцвеченный щелочью);

• Картофельно-глюкозный агар (отваренный в течение 1 часа картофель растирают, разбавляют водой, процеживают, добавляют глюкозу, агар);

• МПА с 2% глюкозой;

• Желатиновая среда ( в бульоне на отваре сердечной мышцы быка, добавляют желатин);

• 5 - 10% КА (агар, дополненный экстрактом сердца и мозга);

• Асцетический агар, асцетическая жидкость.

2. Селективные среды, дополненные комплексом антибиотиков:

• Пенициллин (20 ед/мл);

• Стрептомицин (40 ед/мл);

• Гентамицин (0,5 мкг/мл);

• Левомицетин (16 мг/мл).