2. Реакция образования азокрасителя

Если анализируемое вещество не образует окрашивания с раствором железа (III) хлорида, то необходимо провести реакцию образования азокрасителя.

Образование осадка от желто-оранжевого до оранжево-красного цвета свидетельствует о наличии первичной ароматической группы в структуреанализируемого вещества. Такая функциональная группа характерна для структуры сульфаниламидных препаратов, к числу которых относятся норсульфазол-натрий, сульфацил-натрий и этазол-натрий.

Отличить эти препараты друг от друга возможно по следующим характеристикам:

• По местоположению максимума поглощения в УФ-спектре веществ (λ = 279,5 нм (норсульфазол-натрий), λ = 266,3 и 271,5 нм (сульфацил-натрий), λ = 266,9 нм (этазол-натрий));

• По окраске медных солей этих веществ (грязно фиолетового цвета у норсульфазола-натрия, голубовато-зеленого цвета у сульфацила-натрия, травянисто-зеленого цвета, переходящего постепенно в черный – у этазола-натрия).

3. Реакция образования азокрасителя после предварительного нагревания препарата в кислой среде

Из числа анализируемых веществ смешанной группы только стрептоцид растворимый не взаимодействует с раствором железа (III) хлорида и не образует азокраситель. Для доказательства этого препарата вначале следует провести гидролиз с раствором кислоты хлористоводородной, а затем 1 мл охлажденного раствора используют для доказательства ароматической первичной аминогруппы.

Спектрофотометрия лекарственных веществ третьей группы

Спектры анализируемых веществ третьей группы в 0,1 моль/л кислоты хлористоводородной снимают при условиях, представленных при анализе веществ второй группы.

В таблице 7 представлены максимумы поглощения лекарственных веществ органической структуры.

Анализ веществ, УФ-спектры которых в 0,1 М HCl не имеют максимума поглощения

Эту группу образуют барбитал, бромизовал, гексаметилентетрамин, глюкоза, кислота глютаминовая, метионин и фенобарбитал. Дифференциация этих веществ проводится следующим образом:

1. По реакции взаимодействия с кобальта нитратом. Положительную реакцию с солями кобальта характерна для производных барбитуровой кислоты - барбитала, бензонала и фенобарбитала. Различить эти вещества можно по температуре плавления (189 – 192 °С, 134 – 137 °С и 174 – 178 °С соответственно), а также с применением тонкослойной и высокоэффективной жидкостной хроматографии.

2. Реакция с нингидридом.

Положительная нингидриновая проба характерна для аминокислот – кислоты глютаминовой и метионина.

Отличить эти два препарата можно по результатам следующих реакций:

• Цветная реакция с резорцином в присутствии кислоты серной концентрированной (реакция отличия кислоты глютаминовой от метионина). 2 мг препарата смешивают с 2 мг резорцина и 5 каплями кислоты серной концентрированной и смесь нагревают до появления зелено-коричневого окрашивания. После охлаждения добавляют 5 мл воды и 5 мл раствора аммония гидроксида. Наблюдается красно-фиолетовое окрашивание с зеленой флуоресценцией;

• Реакция образования меркаптана и сульфидов (реакция на серосодержащую аминокислоту – метионин): 50 мг препарата нагревают в пробирке с 5 – 6 каплями 30 % раствора натра едкого до получения сплава; пробирку закрывают кусочком фильтровальной бумаги, которую смачивают 1 – 2 каплями свежеприготовленного раствора 5 % натрия нитропруссида. На фильтровальной бумаге появляется красно-фиолетовое окрашивание.

К охлажденному сплаву добавляют 5 мл воды и смесь подкисляют кислотой серной разведенной. Ощущается запах сероводорода и меркаптана.