
- •Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 1. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1987. – 295 с.
- •Электронное оглавление
- •9. Методы работы с днк 260
- •Предисловие редактора перевода
- •Предисловие
- •Структура книги
- •Особенности книги
- •Организация и передача генетического материала
- •I. Введение
- •Прокариоты: бактерии и сине-зеленые водоросли
- •Одноклеточные и многоклеточныеэукариоты
- •МейозIi
- •Значение мейоза
- •Литература
- •2.Менделевскаягенетика Первые представленияо наследственности
- •Открытие законов наследственности
- •Методы Менделя
- •Доминантность и рецессивность
- •Расщепление
- •Гены - носители наследственности
- •Независимое комбинирование
- •Тригибридные скрещивания
- •27 Гладкие желтые пурпурные
- •Множественные аллели
- •Генотип и фенотип
- •Литература
- •3. Хромосомныеосновы наследственности Гены и хромосомы
- •Наследование, сцепленное с полом
- •Нерасхождение х-хромосом
- •Вторичное нерасхождение
- •Сцепленное с полом наследование у человека и других видов
- •Определение пола
- •Отношение полов
- •Литература
- •4. Природа генетическогоматериала
- •Бактерии как экспериментальныйобъект
- •Экспериментальные исследованиябактериофагов
- •Нуклеиновые кислоты - наследственный материал вирусов
- •Химический состав и строениенуклеиновых кислот
- •Модель структуры днк Уотсона-Крика
- •Проверка модели Уотсона-Крика
- •Различные формы организациидвухцепочечной днк
- •Организация днк в хромосомах
- •Общие особенности репликации днк
- •Литература
- •5. Геномэукариот
- •Рекомбинация сцепленных генов
- •Генетические карты
- •Трехфакторные скрещивания
- •Генетическая интерференция
- •Когда происходит кроссинговер?
- •Мейоз у грибов
- •Цитологические наблюдениякроссинговера
- •Корреляция между генетическими и цитологическими картами хромосомдрозофилы
- •Внеядерная наследственность
- •Литература
- •6. Тонкая структура гена
- •Бактериофаг как генетическая система
- •СистемаrIi бактериофага т4
- •Природа мутаций в областиrIi
- •Функциональные особенностиrIi-мутаций
- •Цистрон
- •КартированиеrIi-мутаций с помощью делеций
- •Предельная разрешающая способностьрекомбинационного анализа
- •Уточнение генетической терминологии
- •Комплементационный анализу высших эукариот
- •Рекомбинационный анализтонкой структуры генау высших эукариот: дрозофила
- •Литература
- •7. Геномвируса
- •Размножение бактериофагов
- •Мутантные бактериофаги
- •Комплементационный анализусловно летальных мутаций фагаХ174
- •Рекомбинационный анализ мутантовфагаХ174
- •Умеренный бактериофагλ
- •Гены фагаλ
- •Профагλ
- •Сопоставление генетическойи физической карт фага а
- •Организация геномафагов т2 и т4
- •Литература
- •8. Бактериальныйгеном
- •МутантыЕ. Coli
- •Генетические элементыE.Coli
- •Физическое картирование бактериальных генов методомпрерванной конъюгации
- •Кольцевая форма геномаЕ. Coli
- •Подвижные генетические элементы (транспозоны)
- •Генетическое картированиеЕ. Coli
- •Конъюгационное картирование
- •Трансдукционное картирование
- •Обзор результатов генетического анализа
- •Литература
- •9.Методы работы с днк
- •Кинетика ренатурации днк
- •Рестрикция днк и ферменты модификации
- •Рестрикционный анализ молекул днк
- •Определение последовательности нуклеотидов в днк ( секвенирование )
- •Метод рекомбинантных днк
- •Векторы для клонирования днк
- •Библиотеки геномов
- •Обзор методов работы с днк
- •Литература
- •Оглавление
Литература
Avery О. Т., MacLeod С. M., McCarty M. (1944). Studies on the chemical nature of the substance inducing transformation of Pneumococcal types, J. Exp. Med., 79, 137-158. Cairns J. (1963). The bacterial chromosome and its manner of replication as seen by autoradiography, J. Mol. Biol., 6, 208-213. Dickerson R. E., Drew H. R., Conner B. N.. Wing R.M., Fratini A.V., Kopka M.L. (1982). The anatomy of A-, B-, and Z-DNA, Science, 216, 475-485. Hershey A.D., Chase M . (1952). Independent functions of viral protein and nucleic acidin growth of bacteriophage, J. Gen. Physiol., 36, 39-56. Kavenoff R., Zimm B. (1973). Chromosome-sized DNA molecules from Drosophila, Chromosoma, 41, 1-27. Meselson M., Stahl F. (1958). The replication of DNA in Escherichia coli, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 44, 671-682. Nordheim A., Pardue M. L., Lafer E. M., Mutter A., StollarB.D., Rich A. (1981). Antibodies to left-handed Z-DNA bind to |
interband regions of Drosophila polytene chromosomes, Nature, 294, 417-422. Wang A.H.-J., Quigley G.J., Kolpak F.J., Crawford J. L., van Boom J. H., van der Marel G., Rich A. (1979). Molecular structure of a left-handed double helical DNA fragment at atomic resolution, Nature, 282, 680-686. Watson J. D., Crick F.H.C. (1953). Molecular structure of nucleic acids. A structure for deoxyribose nucleic acid, Nature, 171, 737-738. Watson J.D., Crick F.H.C. (1953). Genetical implications of the structure of deoxyribonucleic acid, Nature, 171, 964-967. Wilkins M.H.F. et al. (1953). Molecular structure of deoxypentose nucleic acids, Nature, 171, 738-740. Chromatin, Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology XLII, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y., 1978. Chromosome Structure and Function, Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology XXXVIII, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y., 1973.
|
4. Природа генетического материала125
Ключевые слова и понятия
Ауксотроф Водородная связь Гистон Двойная спираль ДНК Колония Негативная колония (бляшка) Нуклеозид Нуклеоид Нуклеосома Нуклеотид Основание Полуконсервативная репликация |
Правило Чаргаффа Прототроф Радиоавтография Репликация сигма-типа Репликация тета-типа РНК Трансформация Фосфодиэфирная связь Эксперимент Мезельсона -Сталя Эксперимент Херши - Чейза В-форма ДНК Z-форма ДНК |
Задачи
4.1. Суспензию бактерий последовательно разводят 1/100, 1/100 и 1/50, по 0,2 мл суспензии из последнего разведения высевают на поверхность трех чашек Петри с агаризованной средой. После инкубации на этих чашках появилось 105, 84 и 98 бактериальных колоний. Какова была примерная концентрация бактерий в исходной культуре? Ту же исходную культуру, разведенную последовательно 1/100, 1/100, 1/10, наносят по 0,2 мл на поверхность трех чашек Петри, засеянных фагом Т2. На чашках выросло 40, 25 и 30 колоний. Какова частота возникновения устойчивых к фагу Т2 бактерий в исходной культуре? 4.2. Каковы были бы результаты экспериментов Мезельсона и Сталя, если бы ДНК реплицировалась консервативно? А если дисперсно? 4.3. Некоторые ДНК-фаги, например фХ174, содержат одну кольцевую молекулу ДНК. Каков, по вашему мнению, механизм репликации их генома? Выделенная из фага ДНК способна заражать сферопласты Е. coli; однако разрыв даже одной фосфодиэфирной связи в ДНК де- |
зоксирибонуклеазой (фермент, расщепляющий такие связи) лишает молекулу ДНК инфекционности. Молекулы ДНК того же фага, выделенные из инфицированных клеток, намного устойчивее к дезоксирибонуклеазе. Почему? 4.4. Синтетический полимер dA/dT (d обозначает дезоксирибозу) - это двухцепочечная молекула, у которой однацепь-poly-dA, а вторая - poly-dT; он характеризуется определеннойтемпературой плавления (Тт). Это температура, при которой половина нуклеотидов существует в двухцепочечной форме, а половина -в одноцепочечной. Температура плавления poly-dA/dT ниже, чем polydG/dC. Как вы думаете, почему? Воспользовавшись данными, приведенными в табл. 4.1, оцените относительные значения Тт для ДНК человека, Е. coli и Sarcina lutea. 4.5. В районе исследовательской станции Южного полюса упал метеорит типа угольного хондрита. С его поверхности выделены вирус, названный Z1, и его хозяин. Продумайте постановку эксперимента, позволяющего определить, что является наследственным веществом Z1, |
126Организация и передача генетического материала
| |
белок или ДНК. Продумайте возможные результаты эксперимента в обоих случаях. 4.6. Установлено, что наследственным веществом вируса Z1 и его хозяина является ДНК. Для определения |
способа репликации ДНК клеток хозяина был поставлен эксперимент типа Мезелсона - Сталя. Результаты эксперимента представлены на рис. 4.25. Каков способ репликации? |