Научные стремления 2011-1

затем 30 циклов, каждый из которых включал денатурацию при 94° в течение 30 секунд, отжиг праймеров при 60° в течение 30 секунд и элонгацию при 72° в течение 1 минуты, после чего следовала финальная элонгация при 72° в течение 4 минут. Амплифицированные фрагменты гена CYP1A1 подвергались обработке рестриктазой MspI, а затем наносились на 2% агарозный гель, содержащий бромистый этидий. Электрофорез проводили в 1хТАЕ буфере при напряжении 100В. Визуализацию осуществляли в проходящем УФ свете.

Амплифицированный участок гена CYP 1A1 имеет размер 340 п.н. и локализован в 3‘-нетранслируемой области гена. Нормальный аллель («дикий тип», w1) не содержит сайта узнавания рестриктазой Msp1. У мутантного аллеля (m1) появляется сайт рестрикции, по которому амплифицированнный участок разрезается на два фрагмента: 200 п.н. и 140 п.н. Наличие гетерозигот определялось присутствием на электофореграмме как продукта амплификации размером 340 п.н., так и фрагментов 200 п.н. и 140 п.н. Отсутствие продукта размером 340 п.н. указывало на гомозиготность по m1 аллелю. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программ SPSS Statistics

17.0.1 и MS Excel 2007.

Результаты и обсуждение.

Таблица 2 - Частоты встречаемости CYP1A1генотипов больных шизофренией, и контрольной группы

Значимых различий в распределении генотипов среди пациентов, страдающих шизофренией, и контрольной группой, согласно результатам статистической обработки данных (таблица 2), не было обнаружено (P=0,159). Исходя из этого, можно заключить, что наличие m1 мутантного аллеля не влияет на предрасположенность к развитию патологии у его носителя.

Таблица 3 - Частоты встречаемости CYP1A1 генотипов матерей больных шизофренией, и матерей контрольной группы

Были обнаружены достоверные различия в частотах встречаемости материнских генотипов (P=0,026) (таблица 3). На основе того, что частота встречаемости гетерозиготного генотипа w1m1 среди матерей контрольной группы значительно выше, чем среди матерей больных, страдающих шизофренией, и составляет 19,5% и 12,3% соответственно, можно предположить, что исследуемый аллель m1 является протективным по отношению к развитию шизофрении у ребенка. Ранее также было определено, что не только мутантный аллель гена CYP1A1 может влиять на механизмы развития шизофрении, но и полиморфизмы других генов системы детоксикации ксенобиотиков, могут оказывать влияние на развитие заболевания. Например, полиморфизм генов второй стадии детоксикации ксенобиотиков, таких как GSTT, GSTM может влиять на предрасположенность к развитию шизофрении. Было получено [1], как и в случае гена CYP1A1, что наличие делетированного аллеля гена GSTM у матерей будет протективным к развитию шизофрении у ребенка, тогда как для ряда других тяжелых заболеваний он будет генотипом риска [11-13].

Частота встречаемости мутантного аллеля m1 среди больных шизофренией и контрольной группы незначительно отличается от популяционных частот [2] и составляет 5,9% и 10,35% соответственно, а частота m1 аллеля среди матерей контрольной группы немного превышает средний популяционный показатель, и составляет 13,41% .

При анализе сочетаний генотипов мать-ребенок больной и контрольной группы достоверных результатов не было обнаружено (P1=0,168; P2= 0,500) (таблица 4, 5). Однако при оценке корреляции генотипов мать-ребенок на риск предрасположенности развития шизофрении было обнаружено, что сочетание нормального генотипа ребенка и гомозиготного генотипа матери, по дикому аллелю (w1w1/w1w1), может впоследствии явиться фактором риска развития шизофрении у ребенка (OR=2,431).

Таблица 4 – Частоты встречаемости сочетания CYP1A1 генотипов матерей и больных шизофренией

Выводы. В данной работе изучался полиморфизм rs 4646903 (MspI) гена CYP1A1, который заключается в однонуклеотидной замене T6235C в 3‘-

432

нетранслируемой области, и приводящей к значительному увеличению уровня экспрессии фермента. Было определено, что наличие полиморфного аллеля m1 у матерей будет протективным к развитию шизофрении у ребенка. В то же время исследуемый m1 мутантный аллель, как известно, ассоциирован с развитием ряда тяжелых заболеваний, таких как рак легких, эндометрия, желудка, и других [4-6]. По результатам данной работы можно предположить, что полиморфный аллель m1 гена CYP1A1 матери может влиять на сложный механизм формирования шизофрении в пренатальный период развития ребенка, как и некоторые другие гены системы детоксикации ксенобиотиков. Однако механизм происходящих при этом процессов остается до конца не выясненным.

Литературные источники

1.Левданский, О.Д. Может ли материнский генотип оказывать влияние на вероятность развития шизофрении у детей? / О.Д. Левданский, И.М. Голоенко, М.Г. Синявская, Н.Г. Даниленко, В.Г. Объедков// Материалы научно-практической конференции с международным участием «Генетическая и регенеративная медицина: проблемы и перспективы», Киев, Украина, 14-15 октября 2010.

2.Левданский, О.Д. Частота встречаемости аллеля m1 гена CYP1A1 среди белорусов/О.Д. Левданский, О.Д. Левданская // Материалы международной научной конференции «Генетика и биотехнология на рубеже тысячелетий», Минск, Беларусь, 25-29

октября 2010. – С.138.

3.Berry, N. Molecular genetics of schizophrenia: a critical review. / N. Berry, V. Jobanputra, H. Pal// Journal. Psychiatry Neuroscience.– 2003.–Vol. 28(6). – P.415-29.

4.Doherty, J.A. Genetic factors in catechol estrogen metabolism in relation to the risk of endometrial cancer/ J.A. Doherty [et al.]// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. – 2005.- Vol. Feb;14(2). – P. 357-366.

5.González, A. Polymorphisms in detoxification genes CYP1A1, CYP2E1, GSTT1 and GSTM1 in gastric cancer susceptibility/ A. González, V. Ramírez, P. Cuenca, R. Sierra// Rev Biol Trop. - 2004 – Vol. Sep;52(3). – P. 591-600.

6.Shah, P.P. Evidence for increased cytochrome P450 1A1 expression in blood lymphocytes of lung cancer patients/ P.P. Shah, K. Saurabh, M.C. Pant // Mutat Res. – 2009. - Nov 2; 670(1-2). – P. 74-8.

7.Schork, J. Braff Statistical Genetics Concepts and Approaches in Schizophrenia and Related Neuropsychiatric / J. Schork, A. Tiffany, D.L. Braff // Nicholas Schizophrenia Bulletin. – 2007. – Vol. 33.№1. – P. 95–104.

8. Sullivan, P.F. Schizophrenia as a complex trait: evidence from a meta-analysis of twin studies / P.F. Sullivan, K.S. Kendler, M.C. Neale// Arch Gen Psychiat. – 2003. - 60: 12. - P. 1187-1192.

9.Schizophrenia.com [Electronic resource]. Mode of access: http://www.schizophrenia.com/szfacts.htm Date of access: 02.10.2011.

10.Schizophrenia forum [Electronic resource]. Mode of access: http://www.schizophreniaforum.org/for/int//Murray/murray.asp Date of access: 02.10.2011.

11.Taspinar, M. CYP1A1, GST gene polimorphisms and risk of chronic myeloid leukaemia/ M.Taspinar [et al.]// Swiss Med WKLY. – 2008. – 138. – P. 12-17.

12.Wang, J. Association of GSTM1, CYP1A1 and CYP2E1 genetic polymorphisms with susceptibility to lung adenocarcinoma: a case-control study in Chinese population/ J. Wang, Y. Deng, L. Li, K. Kuriki// Cancer Sci. – 2003. - May;94(5). – P. 448-52.

13.Zhuo, W.L. Association studies of CYP1A1 and GSTM1 polymorphisms with esophageal cancer risk: evidence-based meta-analyses./ W.L. Zhuo, Y.S. Zhang, Y. Wang // Arch Med Res. – 2009. - Apr; 40(3). – P. 169-79.

433

V.D. Liaudanskaya1, I.M. Galaenka1, V.G. Ab’edkau2

INFLUENCE OF CYP1A1 MOTHER’S GENOTYPE ON PREDISPOSITION TO CHILD’S SCHIZOPHRENIA DEVELOPMENT

1Institute of genetics and cytology, National Academy of sciences, Minsk 2Belarusian State Medical University, Minsk

Summary

Presence of rs 4646903 (MspI) polymorphism of CYP1A1 gene can makes a significant influence on predisposition to schizophrenia development. A mutant allele m1 of maternal genotype plays as defender against schizophrenia development in child. While, this polymorphism among mothers in most cases predisposes to development of serious damages, like cancer.

434

УДК 611.438-018.1/2:612.112.92.015.1

Н.А. Луговцов, А.Н. Платонов

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ (S-100) ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В ТИМУСЕ ЧЕЛОВЕКА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

В МЕДИЦИНЕ

Белорусский государственный медицинский университет, Минск

Введение. Дендритные клетки (ДК) – лучшие природные антигенпрезентирующие клетки. Они обладают качествами, позволяющими им эффективно функционировать для активирования/ингибирования Т-клеток и индуцирования иммунного ответа. Дендритные клетки являются гетерогенной группой клеток, происходят из CD34+ стволовых клеток костного мозга. Предшественники дендритных клеток найдены как в костном мозге, так и в периферической крови, а зрелые клетки - в лимфоидных и нелимфоидных тканях. Определены 3 подтипа ДК: клетки Лангерганса, интерстициальные ДК и плазматические ДК. Первые два подтипа найдены в коже человека и обозначаются миелоидными ДК, плазматические ДК имеют лимфоидное происхождение и найдены в Т-зонах лимфоидных органов, тимусе и периферической циркуляции. Миелоидные дендритные клетки захватывают и процессируют антиген (АГ) на периферии и затем мигрируют во вторичные лимфоидные органы, чтобы представить эти антигены Т-клеткам и активировать их. Тимические дендритные клетки вовлечены в презентацию собственных антигенов развивающимся тимоцитам и таким образом ингибируют развитие аутореактивных Т-клеток. Исследование дендритных клеток, которые обеспечивают селекцию тимоцитов и антигенпрезентацию, является важным для понимания процессов дифференцировки в тимусе [2]. Для изучения дендритных клеток используются различные маркеры (CD 83, CD11c, CD80, CD86) [3]. Маркером незрелых дендритных клеток считается S-100, однако он не является строгоспецифичным маркером [4]. Представители S100 белков демонстрируют выраженную тканеспецифичную и клеточноспецифичную экспрессию.

Актуальность. Роль дендритных клеток переоценить сложно. Они не только играют важнейшую роль в иммунном ответе здорового человека, но и находятся всегда в центре внимания исследований иммунной системы. ДК являются ключевыми звеньями в лечении наиболее актуальных на сегодняшний день заболеваний: онкологических и аутоиммунных, а также находят свое применение в трансплантации.

Цель исследования. Изучение локализации дендритных клеток в тимусе человека, выявление закономерностей их распределения, описание прикладного применения дендритных клеток в медицине

Материалы: препараты тимуса, удаленные по хирургическим показаниям в Минском детском кардиохирургическом центре.

Метод: ИГХ реакция с поликлональным антителом к S-100 (Daco, USA).

435

Результаты и обсуждение. Установлено, что в тимусе наблюдается два типа иммунореактивности: истинно-положительная иммунореактивность поликлонального антитела (интенсивная реакция цитоплазмы и ядра клетки) и псевдо-положительная иммунореактивность (умеренная и слабая реакция цитоплазмы клетки и негативная реакция ядра). Обнаружено, что истинноположительная иммунореактивность определяется в незрелых и созревающих дендритных клетках и адипоцитах периваскулярных пространств тимуса, псевдо-положительная иммунореактивность определяется в гранулоцитах и единичных эпителиальных клетках. Также установлено, что S-100 положительные дендритные клетки имеют максимальную плотность на кортико-медулярной границе и возле телец Гассаля тимуса, причем наибольшая их плотность наблюдается около молодых и зрелых форм телец.

Вывод: идентифицированы S-100 положительные клетки в тимусе человека (дендритные клетки, адипоциты, псевдоположительная реакция - гранулоциты) и описана их топография.

Литературные источники

1.Savchenko S. Development and maturation of thymic dendritic cells during human ontogeny / Savchenko S., Hasegawa G. and Naito M. // Cell and Tissue Research 2006 Vol. 325, N. 3, pp. 455-460

2.Paola Romagnani, Francesco Annunziato, Roberto Manetti / High CD30 Ligand Expression by Epithelial Cells and Hassal's Corpuscles in the Medulla of Human Thymus // Blood

1998 Vol. 91 No. 9. рр. 3323-3332.

3.Watanabe N. Hassall's corpuscles instruct dendritic cells to induce CD4+CD25+ regulatory T cells in human thymus / Watanabe N., Wang Y., Lee H. // Nature 2005 Vol. 436 pp. 1181-1185.

4.Marius Raica Structural heterogeneity and immunohistochemicalprofile of Hassall corpuscles in normal human thymus / Marius Raica, Svetlana Encica, Andrei Motoc // Ann Anat 2006 Vol. 188 рр. 345—352

M.A. Luhautsou, A.M. Platonau

IMMUNOHISTOCHEMICAL (S-100) RESEARCH OF DENDRITIC CELLS IN HUMAN THYMUS AND ESSENTIAL APPLICATION OF THESE CELLS IN MEDICINE

Belarusian State Medical University, Minsk

Summary

Dendritic cells (DCs) are nature‘s best antigen-presenting cells. Performing research on DCs allows us to understand differentiation processes in thymus more precisely. We have defined that there are two types of immune reactivity in thymus: truly positive immune reactivity of polyclonal antibody (TPIR) and false positive immune reactivity (FPIR). TPIR is observed in immature and developing DC and adipocytes of perivascular areas. FPIR found in granulocytes and individuals thymic epithelial cells.

436

УДК 613.7 - 053.5

Ю.С. Лукьянова

ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ДОСУГА И ФИЗИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ШКОЛЬНИКОВ

Гомельский государственный медицинский университет, Гомель

Актуальность. Сохранение здоровья подрастающего поколения является актуальной проблемой современной медицины и педагогики. Большинство исследований выявляют отрицательные тенденции в структуре здоровья детского населения и, в частности, школьников [1, 2]. Значительные изменения в области образования (открытие школ нового типа, переход на 5-дневную неделю и др.) отрицательно сказались на здоровье школьников. Как показали многочисленные наблюдения, из года в год ухудшается их физическое и психическое развитие, снижается уровень здоровья, растет общая заболеваемость и школьная патология, что вызывает необходимость разработки комплекса мер по его охране и реабилитации [2, 4]. Следовательно, именно школе принадлежит большая роль в формировании и поддержании здоровья учащихся, их психического здоровья [1, 3, 4].

Одной из важной составляющей здоровья является образ жизни, который включает в себя режим дня, труда и отдыха, сон, правильное питание, закаливание, физическую нагрузку, личную гигиену и вредные привычки. Понятие «здоровый образ жизни» – концентрированное выражение взаимосвязи образа жизни и здоровья человека [1, 2, 5]. При правильном и строгом соблюдении режима дня вырабатывается четкий ритм функционирования организма. А это в свою очередь создает наилучшие условия для работы и восстановления, тем самым способствует укреплению здоровья и повышению производительности труда. При составлении распорядка дня особенно важно определить сроки и продолжительность активного и пассивного отдыха. Для детей разных возрастов систематическое занятие физкультурой и спортом приобретает исключительное значение [5].

Исследования последних лет показывают, что образ жизни детей и подростков имеет многочисленные дефекты, при этом среди подрастающего поколения не только не отмечается положительной динамики характеристик образа жизни, но и увеличивается распространенность рисковых форм поведения, деформирующих стиль жизни. В связи с этим необходимо научное обоснование политики и стратегии в области формирования здорового стиля поведения ─ важного элемента, обеспечивающего санитарноэпидемиологическое благополучие детей и подростков [2, 5].

Цель исследования: Изучение досуга и уровня физической активности школьников для разработки рекомендаций по формированию, укреплению и сохранению здоровья детей школьного возраста.

Материалы и методы исследования. Для изучения характера досуга и уровня физической активности школьников было проведено анкетирование семей, имеющих детей школьного возраста и проживающих в городе Бобруйске

437

Могилевской области Республики Беларусь. Всего было проанкетировано 176 детей в возрасте 10-12 лет (43,4% от числа опрошенных составили мальчики и

56,6% девочки).

Комплексная оценка уровня двигательной активности ребенка проводилась с учетом сведений о характере досуговых занятий дома, посещении спортивных секций, занятиях физической культурой дома, наличии спортивного инвентаря и частоты его использования, времени и характере отдыха на открытом воздухе в течение дня. Вся совокупность проанкетированных детей была разделена на две группы: с недостаточным и оптимальным уровнем двигательной активности. Физическая активность ребенка подразделялась на два вида: регулярные занятия физической культурой только в общеобразовательной школе, дополнительные занятия физической культурой и спортом вне школы.

Результаты и обсуждение. В развитии и формировании организма ребенка огромное значение имеет организация режима дня и внешкольных занятий. По данным анкетирования 83,0% опрошенных детей имеют те или иные нарушения в режиме дня. Так, 24,5% детей ложатся спать после 22 часов, что значительно сокращает длительность ночного сна, так как обучение в школе начинается в первую смену, 35,8% школьников не имеют установленного времени отхода ко сну и ложатся спать всегда в разное время. Важным режимным моментом для ребенка является время пребывания на свежем воздухе. Ежедневно 2 часа и более на свежем воздухе проводят больше половины ребят – 52,8%, У 28,3% опрошенных детей ежедневные прогулки на воздухе не превышают 2 часов. Не каждый день бывают прогулки на свежем воздухе у 18,9% детей. Независимо от времени года находится вне дома после 21 часа, разрешается родителями только в 3,8%, что свидетельствует о том, что

внекоторых семьях имеет место элементы безнадзорности.

Впроцессе формирования здоровой всесторонне развитой личности важное значение имеет объем и содержание досуговых занятий, их достаточность и соответствие возрасту ребенка. В ходе исследования был проведен анализ и гигиеническая оценка длительности и характера досуговых занятий современных школьников (таблица 1).

Таблица 1 - Досуг детей школьного возраста

438

В ежедневном досуге просмотр телевизора занимает менее 2 часов у 64,1% школьников, 2 часа и более у 33,9%. Отличительной чертой досуга современных школьников является возможность играть на компьютере. Результаты исследований показали, что за компьютером 2 часа и более без перерывов проводят 17,0% детей. Обращает на себя внимание время, уделяемое детьми чтению книг. Так, совершенно не читают художественную литературу 17,0% детей, 13,2% детей читают книги 2 часа и более в день, и большинство школьников читают художественную литературу менее 2 часов в день. В свободное время не посещают спортивные секции 45,3% детей, не занимаются в творческих кружках – 50,9% опрошенных детей.

Недостаточный уровень двигательной активности характеризовался преобладанием статического компонента в досуге (просмотр телевизора, игра на компьютере, чтение книг и т.д.), отсутствие занятий физической культурой и спортом дома и в спортивных секциях и отмечался у 75,5% опрошенных детей. Двигательный уровень считается оптимальным у 24,5% детей с преобладанием активного отдыха в досуге, посещением спортивных секций и творческих кружков. Физическая активность ограничивается только занятиями в школе у 65,8% опрошенных, дополнительно физические упражнения самостоятельно дома выполняют 15,1%, в спортивной секции занимаются 17,0% опрошенных.

Выводы: в результате проведенного исследования установлены значительные нарушения в режиме дня школьников: поздний отход ко сну, недостаточный и нерегулярный отдых на свежем воздухе. Большинство детей в свободное время предпочитают смотреть телевизор и играть на компьютере, нежели заниматься в творческих кружках или спортивных секциях. Недостаточный уровень двигательной активности характерен для большинства опрошенных детей. Целесообразно разрабатывать индивидуальные программы медико-профилактического воздействия для улучшения качества жизни школьников. Важным является проведение активной профилактической деятельности как основы системного оздоровления с повышением уровня медицинской информированности и вовлечением в физкультурнооздоровительные мероприятия.

Литературные источники

1.Кирилкина, Л.А., Чарыева, Ж.Г., Кутепов, Е.Н. Факторы риска, влияющие на состояние здоровья детей // Л.А. Кирилкина, Ж.Г. Чарыева и др. / Гигиена и санитария. – М. «Медицина». – 1999 – №6. – С.46-47.

2.Кучма, В.Г. Дети в мегаполисе: некоторые гигиенические проблемы // В.Р. Кучма / М.: Издатель НЦЗД РАМН. – 2002. – 280 с.

3.Платонова, А.Г., Маркелова, С.В. Внутришкольная среда как фактор воздействия на организм ребенка // А.Г. Платонова, С.В. Маркелова / Гигиена: прошлое, настоящее, будущее. Сб. науч. тр. Федерального центра гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. – Вып.

1.– М., 2001. – С. 487-488.

4.Физиология роста и развития детей и подростков (теоретические и клинические вопросы)/ Под ред. А.А. Баранова, Л.А. Щеплягиной / М., 2000. – 584 с.

5.Фомин, Н.А., Вавилов, Ю.Н. Физиологические основы двигательной активности // Н.А. Фомин, Ю.Н. Вавилов / М.: Физкультура и спорт. — 1991. — 224 с.

439

J.S. Lukjanova

HYGIENIC ESTIMATION OF LEISURE AND PHYSICAL

ACTIVITY OF SCHOOLBOYS

The Gomel State Medical University, Gomel

Summary

Work is devoted to studying of leisure and a level of physical activity of schoolboys in the age of 10-12 years. Significant infringements in a mode of day of schoolboys are established: a late withdrawal to a dream, insufficient and irregular rest on fresh air, the long pastime behind a computer and viewing of the TV, insufficient impellent activity. It is expedient to develop individual medico-preventive programs for improvement of quality of a life of schoolboys, to increase a level of their medical knowledge.

440